原花青素B1對脂多糖介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的抑制作用及其機(jī)制探討
本文選題:原花青素B + 脂多糖類 ; 參考:《中華危重癥醫(yī)學(xué)雜志(電子版)》2015年05期
【摘要】:目的探索原花青素B1的抗炎活性及其抗炎機(jī)制。方法以人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系(THP-1)為模型,設(shè)立不含脂多糖(LPS)的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)處理THP-1細(xì)胞為對照組,檢測不同濃度原花青素B1(50、100、150、200 mg/L)對THP-1細(xì)胞活力的影響。分別應(yīng)用1 mg/L的LPS(LPS組)、1 mg/L的LPS聯(lián)合原花青素B1 50 mg/L(處理A組)、1 mg/L的LPS聯(lián)合原花青素B1 100 mg/L(處理B組)預(yù)處理THP-1細(xì)胞,收集各組THP-1細(xì)胞上清液,應(yīng)用雙抗體夾心親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物-酶聯(lián)免疫吸附法測定各組THP-1細(xì)胞中TNF-α的釋放水平。應(yīng)用實(shí)時定量PCR法測定各組THP-1細(xì)胞My D88 m RNA和髓樣分化蛋白2(MD-2)m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果不同濃度原花青素的THP-1細(xì)胞活力與對照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=31.35,P0.001),進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn),50、100 mg/L原花青素的THP-1細(xì)胞活力與對照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),而150、200 mg/L原花青素的THP-1細(xì)胞活力均明顯低于對照組(P均0.05)。處理A、B組的TNF-α水平較LPS組均顯著減低(P均0.05),且處理B較處理A組下降更為明顯(P0.05)。對照組、LPS組及處理A組間My D88 m RNA和MD-2m RNA的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=62.500、46.700,P均0.001),且LPS組的My D88 m RNA和MD-2 m RNA表達(dá)均較對照組及處理A組明顯升高(P均0.05),處理A組的My D88 m RNA和MD-2 m RNA表達(dá)高于對照組(P均0.05)。結(jié)論原花青素B1可明顯抑制LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng),負(fù)性調(diào)節(jié)Toll樣受體-My D88信號通路,可能是其抑制炎癥反應(yīng)的潛在機(jī)制。
[Abstract]:Objective to explore the anti-inflammatory activity and anti-inflammatory mechanism of proanthocyanidin B1.Methods Human acute monocytic leukemia cell line (THP-1) was used as a model. THP-1 cells were treated with phosphate buffer without lipopolysaccharide (LPS). The effects of different concentrations of proanthocyanidin B150100150mg / L on the viability of THP-1 cells were detected.THP-1 cells were pretreated with 1 mg/L LPS(LPS group with 1 mg/L LPS combined with proanthocyanidin B15 50 mg / L (group A treated with 1 mg/L LPS combined with procyanidin B100 mg / L (treatment group B)), and the supernatant of THP-1 cells in each group was collected.The release of TNF- 偽 in THP-1 cells was determined by double antibody sandwich affinity biotin peroxidase complex and enzyme linked immunosorbent assay (Elisa).The expression of my D 88 m RNA and myeloid differentiation protein (2(MD-2)m RNA) in THP-1 cells were measured by real time quantitative PCR assay.Results the activity of THP-1 cells at different concentrations of proanthocyanidins was compared with that of the control group.The difference was statistically significant (P 0.001). It was found that the THP-1 cell viability of P0 0100 mg/L proanthocyanidins was not significantly different from that of the control group (P < 0 05), while the THP-1 cell activity of 150200 mg/L proanthocyanidins was significantly lower than that of the control group (P < 0 05).The level of TNF- 偽 in group A was significantly lower than that in group LPS (P 0.05), and the level of TNF- 偽 in group B was significantly lower than that in group A (P 0.05).The expression of D 88 m RNA and MD-2 m RNA was higher than that of control group (P 0.05).Conclusion proanthocyanidin B1 can inhibit the inflammatory response mediated by LPS and negatively regulate the signaling pathway of Toll like receptor -My D88, which may be the underlying mechanism of its inhibition of inflammatory response.
【作者單位】: 大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院急診科;
【基金】:遼寧省教育廳高等學(xué)?蒲许(xiàng)目(L2013348)
【分類號】:R392
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,本文編號:1743964
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