發(fā)布時(shí)間：2018-04-13 01:41

  本文選題：FBS + 成骨生長(zhǎng)肽　； 參考：《中國(guó)修復(fù)重建外科雜志》2015年02期

【摘要】：目的探討培養(yǎng)液中不同濃度FBS對(duì)成骨生長(zhǎng)肽(osteogenic growth peptide,OGP)促進(jìn)BMSCs增殖和分化的影響。方法取8只5周齡SD大鼠四肢骨,貼壁法分離純化BMSCs并傳代,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。取第3代BMSCs分組培養(yǎng):分別采用濃度為1×10-10、1×10-9和1×10-8 mol/L的OGP進(jìn)行培養(yǎng),以正常培養(yǎng)細(xì)胞作為對(duì)照組;同時(shí)每組設(shè)FBS濃度為0、2%、5%、8%和10%5個(gè)梯度。培養(yǎng)后1、3、5、7、9、12 d采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖,9 d時(shí)采用對(duì)硝基苯磷酸二鈉法測(cè)定早期分化指標(biāo)細(xì)胞內(nèi)ALP活性。結(jié)果倒置相差顯微鏡下觀察BMSCs貼壁生長(zhǎng),增殖迅速,呈纖維狀渦旋生長(zhǎng),形態(tài)典型。MTT檢測(cè)示,FBS低于5%時(shí)各組細(xì)胞不能持續(xù)增殖,當(dāng)FBS濃度為8%以上時(shí)細(xì)胞可持續(xù)增殖;OGP 1×10-8 mol/L和1×10-9 mol/L組在FBS各濃度中促增殖效果均大于對(duì)照組(P0.05);FBS濃度低于10%時(shí),OGP 1×10-8 mol/L組促增殖效果顯著優(yōu)于其余OGP濃度組(P0.05),但FBS濃度為10%時(shí)OGP 1×10-8 mol/L組無促增殖優(yōu)勢(shì)。ALP檢測(cè)示,各組組內(nèi)隨FBS濃度增加,ALP活性增加(P0.05);當(dāng)FBS濃度為5%、8%時(shí),各OGP濃度組ALP活性均大于對(duì)照組(P0.05),且OGP 1×10-8 mol/L組最高(P0.05);當(dāng)FBS濃度為10%時(shí),各OGP組ALP活性仍大于對(duì)照組(P0.05),但OGP1×10-8 mol/L組與OGP 1×10-9 mol/L組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 8%FBS濃度為OGP促進(jìn)BMSCs增殖分化的最佳血清濃度,且OGP促進(jìn)BMSCs增殖分化的最適濃度為1×10-8 mol/L。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of different concentrations of FBS in culture medium on the proliferation and differentiation of osteogenic growth peptidine (OGP) induced by osteogenic growth peptide (OGP).Methods the limb bones of 8 5-week-old SD rats were isolated and purified by adherent method. The morphology of the cells was observed by inverted phase contrast microscope.The third passage of BMSCs was divided into three groups: 1 脳 10 ~ (-10) (1 脳 10 ~ (-9)) and 1 脳 10 ~ (-8) mol/L OGP, respectively, and normal cultured cells were used as the control group, and each group was divided into two groups: the FBS concentration was 0 脳 10 ~ (-10) (1 脳 10 ~ (-9)) and 10 ~ (-8) mol/L, respectively.MTT assay was used to detect cell proliferation at 12 days after culture. The ALP activity was measured by p-nitrobenzene disodium phosphate assay at 9 days after culture.Results the adherent growth of BMSCs was observed under inverted phase contrast microscope, and the proliferation was rapid and fibrous vortex was observed.When the concentration of FBS was more than 8%, the proliferation effect of OGP1 脳 10-8 mol/L and 1 脳 10-9 mol/L group was higher than that of the control group P0.05FBS concentration lower than that of the control group when the concentration of OGP1 脳 10-8 mol/L was lower than that of the other OGP group, but FBS concentration was higher than that of the other OGP group.OGP 1 脳 10 ~ (-8) mol/L group had no proliferative advantage.When the concentration of FBS was 5, the activity of ALP in each OGP group was higher than that in the control group, and the highest level of P0.05in the OGP 1 脳 10-8 mol/L group, when the concentration of FBS was 10, the highest level of P0.05 was found in the group with OGP 1 脳 10 ~ (-8) mol/L, when the concentration of FBS was 10 ~ (-5), the activity of ALP in each group was higher than that in the control group.The activity of ALP in the OGP group was still higher than that in the control group (P0.05), but there was no significant difference between the OGP1 脳 10-8 mol/L group and the OGP 1 脳 10-9 mol/L group.Conclusion 8s concentration is the best serum concentration for OGP to promote the proliferation and differentiation of BMSCs, and the optimal concentration of OGP for BMSCs proliferation and differentiation is 1 脳 10 ~ (-8) mol 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1).
【作者單位】： 山東中醫(yī)藥大學(xué);山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科;山東省醫(yī)科院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：山東省中醫(yī)藥科技發(fā)展計(jì)劃資助項(xiàng)目(2013-219) 濟(jì)南市科技支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(201102016) 山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(ZR2014HM085)~~
【分類號(hào)】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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6 趙U，

本文編號(hào)：1742395