本文選題：人類白細(xì)胞抗原G　切入點(diǎn)：粒細(xì)胞集落刺激因子　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文

【摘要】： 研究背景及目的 異基因造血干細(xì)胞移植(Allogeneic hematopoietic stem celltransplantation,allo-HSCT)現(xiàn)廣泛應(yīng)用于惡性血液病、惡性腫瘤、某些自身免疫性疾病及某些遺傳與代謝疾病等治療。制約其臨床應(yīng)用的主要原因之一是供者來源困難。為了擴(kuò)大供者來源,由國內(nèi)北京大學(xué)人民醫(yī)院原創(chuàng)的“在HLA單倍型相合造血干細(xì)胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)中,采用非體外去除T細(xì)胞—粒細(xì)胞集落刺激因子(Granulocyte-colony-stimulating factor,G-CSF)動(dòng)員外周血干細(xì)胞和骨髓混合移植”技術(shù)獲得極大成功,能顯著降低移植后移植物抗宿主病(Graft versus host disease,GVHD)的發(fā)生率與致死率,其療效相當(dāng)于人類白細(xì)胞抗原(Human leucocyte antigen,HLA)相合同胞HSCT。 然而,G-CSF在HLA單倍型相合HSCT中誘導(dǎo)的免疫耐受機(jī)理至今尚未完全闡明,且單純動(dòng)員的外周血干細(xì)胞移植并不能降低移植后GVHD的發(fā)生率和致死率,尤其是慢性移植物抗宿主病(Chronic graft-versus-host disease,cGVHD)發(fā)生。G-CSF動(dòng)員外周血干細(xì)胞需要聯(lián)合骨髓移植才能達(dá)到理想的免疫耐受作用。這使我們提出了動(dòng)員后骨髓中是否存在誘導(dǎo)免疫耐受的其他因素的假設(shè)。 人白細(xì)胞抗原G(Human leukocyte antigen,HLA-G)是非經(jīng)典HLA-I類分子,HLA-G作為新的免疫抑制分子在妊娠免疫、腫瘤免疫逃逸及實(shí)體器官移植等方面已有廣泛研究,并對其在誘導(dǎo)免疫耐受機(jī)理進(jìn)行了初步探討:抑制CD8+T細(xì)胞和自然殺傷(Natural killer,NK)細(xì)胞殺傷活性、抑制CD4+T細(xì)胞增殖、抑制異源性反應(yīng)T細(xì)胞增殖周期、影響APC成熟和功能、誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Regulatory T cells,Treg細(xì)胞)形成、調(diào)節(jié)細(xì)胞因子分泌等。因HLA-G與免疫耐受密切相關(guān),因此我們設(shè)想:G-CSF動(dòng)員單純外周血干細(xì)胞移植不能良好的誘導(dǎo)免疫耐受,而聯(lián)合動(dòng)員的骨髓移植則產(chǎn)生良好的免疫耐受是否與骨髓中富含的HLA-G這一免疫抑制分子有關(guān)?G-CSF作為細(xì)胞因子能否誘導(dǎo)HLA-G表達(dá)和分泌?G-CSF通過HLA-G如何調(diào)節(jié)細(xì)胞因子分泌誘導(dǎo)免疫耐受?本研究將針對這些問題開展。 方法 流式細(xì)胞術(shù)檢測G-CSF動(dòng)員前后外周血和骨髓中膜結(jié)合型HLA-G(Membrane-bound Human leukocyte antigen-G,mHLA-G)表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血漿及骨髓液分泌型HLA-GHLA-G(Secretory Human leukocyte antigen-G,sHLA-G)含量;檢測加入G-CSF培養(yǎng)后的骨髓單個(gè)核細(xì)胞及外周血單個(gè)核細(xì)胞HLA-G表達(dá)及分泌情況,并檢測HLA-G在骨髓各細(xì)胞亞群表達(dá)情況;建立G-CSF刺激后HLA-G穩(wěn)定表達(dá)的T淋巴細(xì)胞作為進(jìn)一步研究HLA-G誘導(dǎo)免疫耐受機(jī)理的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞:①混合淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探討能抑制T細(xì)胞的異源性增殖反應(yīng);②與同種異源骨髓單個(gè)核細(xì)胞共同培養(yǎng)檢測上清液中IFN-γ及IL-10濃度,探討HLA-G對細(xì)胞因子分泌的影響。 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理,兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),不同時(shí)間點(diǎn)mHLA-G、sHLA-G比較采用單因素方差分析,P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 G-CSF動(dòng)員后mHLA-G及sHLA-G在外周血和骨髓中均顯著高于未動(dòng)員者(均有P＜0.05),骨髓細(xì)胞動(dòng)員后組mHLA-G、sHLA-G含量也顯著高于外周血?jiǎng)訂T后組(均有P＜0.05);骨髓單個(gè)核細(xì)胞及外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)G-CSF刺激培養(yǎng)后mHLA-G及sHLA-G均較對照組高(均有P＜0.05)且存在時(shí)間差異(第1d表達(dá)增高,d3、5與d1比無顯著性差異);G-CSF刺激骨髓單個(gè)核細(xì)胞,HLA-G在CD3+細(xì)胞相對較高;G-CSF刺激后的HLA-G穩(wěn)定表達(dá)T淋巴細(xì)胞作為刺激細(xì)胞進(jìn)行混合淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)測得RPI為54.3%,細(xì)胞與同種異源骨髓單個(gè)核細(xì)胞共同培養(yǎng)檢測上清液中IFN-γ、IL-10均顯著高于對照組(均有P＜0.05)。 結(jié)論 G-CSF動(dòng)員的骨髓能更好的誘導(dǎo)免疫耐受可能與動(dòng)員后骨髓中富含HLA-G這一免疫抑制分子有關(guān)。G-CSF可以直接上調(diào)HLA-G表達(dá)及分泌。G-CSF通過HLA-G誘導(dǎo)免疫耐受的機(jī)理可能為:抑制異源性T細(xì)胞增殖反應(yīng);上調(diào)骨髓移植物中IFN-γ、IL-10分泌。
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【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 黃曉軍,韓偉,許蘭平,陳歡,劉代紅,陳育紅,江倩,路瑾,劉開彥,任漢云,陸道培;HLA配型不合情況下造血干細(xì)胞移植的新方法[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年03期

2 韓偉,陸道培,黃曉軍,劉開彥,陳歡,許蘭平,劉代紅,江倩,陳育紅,路瑾,王靜波,吳彤,董陸佳,任漢云;HLA配型不合造血干細(xì)胞移植GIAC方案100例臨床分析[J];中華血液學(xué)雜志;2004年08期

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本文編號：1654960