本文選題：血管內(nèi)皮祖細胞　切入點：綠色熒光蛋白　出處：《吉林大學》2009年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】： 研究脂質(zhì)體介導綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)染人臍血內(nèi)皮祖細胞的方法的可行性,觀察細胞熒光表達情況、轉(zhuǎn)染效率及轉(zhuǎn)染對細胞的影響。體外分離誘導培養(yǎng)人臍血內(nèi)皮祖細胞(EPCs),用陽離子脂質(zhì)體Lipofectamine2000介導攜帶有綠色熒光蛋白基因的質(zhì)粒pEGFP-N1轉(zhuǎn)入EPCs中,激光共聚焦顯微鏡觀察熒光表達,全波長多功能酶標儀檢測比較轉(zhuǎn)染后24h、48h、72h、96h熒光強度,MTT法檢測細胞數(shù)量變化,流式細胞術(shù)測定轉(zhuǎn)染效率。綠色熒光蛋白在基因轉(zhuǎn)染24h后已可見熒光表達,48h熒光表達明顯增強,并且48h、72h、96h熒光強度呈遞減趨勢。轉(zhuǎn)染后細胞數(shù)量減少。轉(zhuǎn)染效率為21.6%±1.3%。脂質(zhì)體可攜帶綠色熒光蛋白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染內(nèi)皮祖細胞,是標記內(nèi)皮祖細胞的一種簡便可行的方法。綠色熒光蛋白可在原代內(nèi)皮祖細胞中表達。轉(zhuǎn)染后細胞數(shù)量減少。
[Abstract]:To study the feasibility of liposome-mediated green fluorescent protein transfection into human umbilical cord blood endothelial progenitor cells, and observe the fluorescent expression of the cells. The efficiency of transfection and the effect of transfection on human umbilical cord blood endothelial progenitor cells were isolated and cultured in vitro. The plasmid pEGFP-N1 carrying green fluorescent protein gene was transfected into EPCs by cationic liposome Lipofectamine2000. The fluorescence expression was observed by confocal laser microscopy. After transfection, the number of cells was detected by MTT method and the transfection efficiency was determined by flow cytometry. The fluorescence expression of green fluorescent protein was obviously enhanced at 48 h after 24 h gene transfection. After transfection, the fluorescence intensity decreased, and the transfection efficiency was 21.6% 鹵1.3. Liposomes could carry green fluorescent protein particles into endothelial progenitor cells. It is a simple and feasible method to label endothelial progenitor cells. Green fluorescent protein can be expressed in primary endothelial progenitor cells.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R329

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本文編號：1590004