發(fā)布時間：2018-02-28 03:51

  本文關(guān)鍵詞： 創(chuàng)傷性腦損傷 SUMO特異性蛋白酶 免疫組織化學(xué)染色 小鼠　出處：《中華神經(jīng)外科疾病研究雜志》2015年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的研究小泛素類修飾蛋白(SUMO)特異性蛋白酶3(SENP3)在創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)腦組織中的分布和表達(dá)變化。方法成年雄性ICR小鼠84只,隨機(jī)分為假手術(shù)組和TBI后3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、5 d共7組(每組12只)。通過自由落體法制作小鼠TBI模型,應(yīng)用免疫印跡法(Western blot)法檢測TBI后腦組織中SENP3及半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)的蛋白表達(dá)變化。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法和免疫組織化學(xué)染色法檢測TBI后腦組織中SENP3的表達(dá)和分布變化。結(jié)果 Western blot結(jié)果顯示,SENP3及Caspase-3蛋白水平在TBI后6 h開始升高,24 h達(dá)到高峰。RT-PCR結(jié)果顯示傷灶周圍腦組織中的SENP3的mRNA水平在TBI后逐漸升高,并在12 h達(dá)到高峰。免疫組織化學(xué)染色檢測結(jié)果顯示假手術(shù)組SENP3在細(xì)胞核及胞漿內(nèi)均有表達(dá),但主要位于核內(nèi)。與假手術(shù)組相比,TBI組的腦組織中SENP3陽性細(xì)胞的核明顯增大、固縮,細(xì)胞排列紊亂。結(jié)論 SENP3可能參與了TBI后的神經(jīng)細(xì)胞凋亡的機(jī)制。
[Abstract]:Objective to study the distribution and expression of Ubiquitin modified protein SUMO-specific protease 3 (SENP3) in brain tissue of traumatic brain injury (TBI). Methods 84 adult male ICR mice were used in this study. They were randomly divided into sham operation group and 7 groups (12 rats in each group), and 7 groups (12 rats in each group) were randomly divided into 7 groups: TBI model was established by free falling body method in 3 hours, 6 hours, 12 hours and 24 hours and 5 days after TBI. Western blotting was used to detect the expression of SENP3 and caspase-3 in brain tissue after TBI. Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunohistochemical staining were used to detect the expression of SENP3 and caspase-3 in brain tissue. The expression of caspase-3 was detected by immunohistochemistry and reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). Results Western blot showed that the levels of SENP3 and Caspase-3 protein began to increase at 6 h after TBI and reached the peak at 24 h. RT-PCR results showed that the mRNA level of SENP3 in the brain tissue around the injured area increased gradually after TBI. The results of immunohistochemical staining showed that SENP3 was expressed in nucleus and cytoplasm of sham-operated group, but mainly in nucleus. Compared with sham-operated group, the nucleus of SENP3 positive cells in brain tissue was significantly increased. Conclusion SENP3 may be involved in the mechanism of neuronal apoptosis after TBI.
【作者單位】： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬金陵醫(yī)院神經(jīng)外科;南方醫(yī)科大學(xué)南京臨床醫(yī)學(xué)院;南京軍區(qū)總醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81171170) 江蘇省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(BK2010459) 軍區(qū)醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新課題資助項(xiàng)目(10Z024)
【分類號】：R651.15;R-332

【共引文獻(xiàn)】

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8 馬y曃，

本文編號：1545640