大腸桿菌O157噬菌體的分離鑒定及其初步應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2018-01-25 07:56
本文關(guān)鍵詞: 大腸桿菌O157 噬菌體 生物學(xué)特性 噬菌體治療 出處:《吉林大學(xué)》2008年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】: 本研究以大腸桿菌O157為宿主菌,從污水中分離篩選到一株強(qiáng)裂解性噬菌體DLSF48,該噬菌體噬菌斑直徑約7mm,邊緣清晰,效價(jià)在10~9pfu/mL以上,對(duì)細(xì)菌的特異性裂解能力強(qiáng)。 對(duì)DLSF48生物學(xué)特性研究結(jié)果表明:該噬菌體的最適生長(zhǎng)溫度為37℃,最適pH值為8;在70℃作用20min及在pH值4~12的環(huán)境中2h仍可保持較高的裂解活性;對(duì)氯仿和乙醚有抗性;最佳感染復(fù)數(shù)在0.1~0.01,感染宿主菌的潛伏期是20min,裂解期為70min,裂解量為99。電鏡觀察顯示,該噬菌體頭部呈正二十面體,直徑約50nm,尾長(zhǎng)約120nm,尾徑約4nm,無被膜;SDS-PAGE鑒定,該噬菌體至少含有6種結(jié)構(gòu)蛋白;噬菌體的基因組為線型雙鏈DNA,大小約為30 kb左右。經(jīng)綜合鑒定,該噬菌體屬于長(zhǎng)尾噬菌體科T1噬菌體屬;通過基因組測(cè)序結(jié)果和同源性分析顯示,該噬菌體為一種新發(fā)現(xiàn)的噬菌體。 噬菌體治療結(jié)果表明:口服噬菌體有明顯的治療效果,在感染O157的同時(shí)口服接種噬菌體,接種噬菌體的劑量為2×10~6pfu以上,3h后劑量為2×10~7pfu以上,6h后劑量為2×10~8pfu以上,對(duì)小鼠可完全保護(hù)。 模擬水污染大腸桿菌O157研究噬菌體的凈化效果,結(jié)果顯示噬菌體DLSF48對(duì)水體中的大腸桿菌O157有明顯的清除作用。 本研究發(fā)現(xiàn)一種新的特異性裂解大腸桿菌O157的長(zhǎng)尾噬菌體,研究了該噬菌體的生物學(xué)特性,并在大腸桿菌O157感染的治療及水環(huán)境凈化上進(jìn)行了初步研究。
[Abstract]:In this study, a strong lytic phage DLSF48 was isolated from sewage with Escherichia coli O157 as the host strain. The plaque diameter of the phage was about 7 mm and the edge was clear. The titer was over 10 ~ 9 pFu / mL, and the specific cleavage ability of bacteria was strong. The biological characteristics of DLSF48 were studied. The results showed that the optimum growth temperature and pH value of the phage were 37 鈩,
本文編號(hào):1462407
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