本文關(guān)鍵詞：一種新型致真菌性足菌腫的馬杜拉分支菌TMMU3956的表型及分子特征　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2009年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】： 足菌腫是一種熱帶或亞熱帶疾病,該病的世界分布極其不均,南緯15?和北緯30?之間的區(qū)域?yàn)樽憔[高發(fā)區(qū),尤以南亞的印度、非洲的蘇丹和南美的墨西哥發(fā)病率為最高。據(jù)蘇丹喀土穆中心醫(yī)院的保守統(tǒng)計(jì),足菌腫的就診率大約在300~400人/年度。而地處溫帶和寒帶的國(guó)家發(fā)病率較低,罕見(jiàn)于中國(guó)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),1960~2009這半個(gè)世紀(jì)以來(lái),我國(guó)共有足菌腫的報(bào)道18例,發(fā)病率不足1人/年度。 足菌腫可發(fā)生于全身任何部位,其中以足部最多見(jiàn),約占70%,其次為手、四肢、肩背、臀部、會(huì)陰。一些罕見(jiàn)部位如胸腹壁、睪丸、女陰、腭部、眼瞼、眶內(nèi)、鼻旁竇、腦、肺、脊柱、膽囊、手術(shù)切口處也有報(bào)道。頭頸部足菌腫的發(fā)生率為3.75%,一個(gè)無(wú)法解釋的現(xiàn)象是:發(fā)生在頭面部的足菌腫,80%由放線(xiàn)菌引起,僅有不足20%由真菌引起。盡管頭頸部足菌腫發(fā)病率低,但后果嚴(yán)重且非常難以治療。 根據(jù)致病菌種類(lèi)的不同,足菌腫分為真菌性足菌腫和放線(xiàn)菌性足菌腫兩種。馬杜拉分支菌是真菌性足菌腫最常見(jiàn)的致病菌,已知的致病菌種有兩種:足菌腫馬杜拉分支菌和灰色馬杜拉分支菌。足菌腫馬杜拉分支菌在過(guò)去一直被認(rèn)為是同質(zhì)的,不存在多態(tài)現(xiàn)象。但是,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,越來(lái)越多的證據(jù)表明足菌腫馬杜拉分支菌和灰色馬杜拉分支菌的異質(zhì)現(xiàn)象非常明顯,很有可能存在其它菌種。系統(tǒng)進(jìn)化分析甚至顯示足菌腫馬杜拉分支菌和灰色馬杜拉分支菌的進(jìn)化距離很遠(yuǎn),極大可能不屬于一個(gè)種屬。 本課題報(bào)道了重慶地區(qū)一例罕見(jiàn)的發(fā)生在下頜部的真菌性足菌腫,研究該病例的意義不僅在于它發(fā)病部位的特殊性和地域的罕見(jiàn)性,更重要的是我們從患者下頜部黑色顆粒中分離到一株國(guó)內(nèi)罕見(jiàn)的暗色真菌,常規(guī)真菌學(xué)無(wú)法判知其種屬。經(jīng)ITS區(qū)測(cè)序發(fā)現(xiàn),該真菌與足菌腫馬杜拉分支菌有最大的相似性,但相似性小于95%,極大可能是馬杜拉分支菌屬一新的菌種,菌株編號(hào)為T(mén)MMU3956。 鑒于馬杜拉分支菌混亂的分類(lèi)學(xué)范疇,本研究的目的在于獲得TMMU3956詳盡的形態(tài)學(xué)、理化特性、藥物敏感性、動(dòng)物致病性和分子生物學(xué)等方面的資料,為證明它是馬杜拉分支菌屬一新的菌種提供證據(jù),并對(duì)馬杜拉分支菌的進(jìn)化起源和分類(lèi)學(xué)進(jìn)行探討。 我們以TMMU3956為研究對(duì)象,將菌株接種在沙堡氏培養(yǎng)基(SDA)、馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA)、腦心浸膏培養(yǎng)基(BHIA)、察氏培養(yǎng)基(CDA)和玉米培養(yǎng)基(CMA)上行平皿培養(yǎng)和玻片培養(yǎng),8周后觀(guān)察菌落宏觀(guān)形態(tài)和光鏡、掃描電鏡下微觀(guān)形態(tài)。行溫度試驗(yàn)、同化試驗(yàn)觀(guān)察其理化特性。采用改良的美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)M-38A方案對(duì)TMMU3956進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn),測(cè)試藥物包括氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑、兩性霉素B、特比萘芬和伏立康唑。玻璃珠-鹽析法提取TMMU3956的DNA,使用通用引物和足菌腫馬杜拉分支菌特異性引物擴(kuò)增真菌的ITS1、ITS2、D1/D2、18S和ITS1+2區(qū),測(cè)序后進(jìn)行BLAST,并選取有代表性的40種真菌性足菌腫致病菌行系統(tǒng)進(jìn)化分析。最后用TMMU3956感染免疫正常的和免疫抑制的BALB/c小鼠和新西蘭大白兔,觀(guān)察動(dòng)物致病性。 結(jié)果顯示:光鏡與電鏡下,該真菌至少觀(guān)察到兩種無(wú)性繁殖方式:瓶梗產(chǎn)孢和孢子囊孢子產(chǎn)孢。最佳生長(zhǎng)溫度為37℃,最高耐熱溫度為42℃。能同化葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、纖維二糖、麥芽糖、海藻糖。對(duì)伊曲康唑、兩性霉素B、伏立康唑高度敏感,特比萘芬中度敏感,對(duì)氟胞嘧啶和氟康唑耐藥。未檢測(cè)到BALB/c小鼠和新西蘭大白兔致病性。18S和ITS1+2區(qū)與足菌腫馬杜拉分支菌的相似性分別為100%和93%,足菌腫馬杜拉分支菌特異性探針無(wú)法擴(kuò)增TMMMU3956。系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示TMMU3956與足菌腫馬杜拉分支菌遺傳距離最近,同屬于子囊菌門(mén)核菌綱;而灰色馬杜拉分支菌屬于子囊菌門(mén)腔菌綱,與TMMU3956相去甚遠(yuǎn)。 根據(jù)TMMU3956的形態(tài)學(xué)、理化特性、rDNA的序列分析及系統(tǒng)進(jìn)化分析,我們認(rèn)為該菌株有別于足菌腫馬杜拉分支菌和灰色馬杜拉分支菌,支持該菌株為馬杜拉分支菌屬一新的致病菌種。
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【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類(lèi)號(hào)】：R379

【參考文獻(xiàn)】

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1 孔維云;王宇飛;陸曉濤;;放線(xiàn)菌足菌腫一例[J];海南醫(yī)學(xué);2007年11期

2 錢(qián)堅(jiān)革,沈異,余愛(ài)如,孫建方,呂桂霞;奴卡氏菌性足菌腫1例[J];臨床皮膚科雜志;2002年05期

3 梁潔;楊慧蘭;劉仲榮;吳燕虹;林挺;樊建勇;;星形諾卡菌性足菌腫[J];臨床皮膚科雜志;2006年10期

4 張品南;足菌腫2例[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;1996年01期

5 劉玲,鄭曼妮,周俊,溫生貴;骨盆馬杜拉病一例報(bào)告[J];中華骨科雜志;2004年09期

6 夏修蛟,許愛(ài)娥,李若瑜,王端禮,PadhylA.A;鐮形支頂孢所致的足菌腫一例[J];中華皮膚科雜志;2001年06期

7 李厚敏,劉偉,李若瑜;美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)2003年版產(chǎn)孢絲狀真菌藥敏試驗(yàn)方案簡(jiǎn)介[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2005年01期

8 金輝;左壯;劉陽(yáng);;巴西奴卡氏菌致足菌腫1例[J];中國(guó)誤診學(xué)雜志;2005年18期

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本文編號(hào)：1431239