穩(wěn)定敲低MYH10基因細(xì)胞株的建立
本文關(guān)鍵詞:穩(wěn)定敲低MYH10基因細(xì)胞株的建立 出處:《醫(yī)學(xué)研究雜志》2015年11期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的構(gòu)建穩(wěn)定敲低MYH10基因的COS-7細(xì)胞株。方法在293TX細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝,用獲得的高效價(jià)慢病毒感染COS-7細(xì)胞,通過免疫印跡和熒光顯微鏡,檢測病毒感染后COS-7細(xì)胞MYH10蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果在構(gòu)建的兩種重組質(zhì)粒中,MYH10-lentiviral shRNA-2在轉(zhuǎn)染后表現(xiàn)出明顯的干擾作用,感染后能明顯下調(diào)COS-7細(xì)胞的MYH10蛋白表達(dá)。結(jié)論病毒感染的COS-7細(xì)胞可明顯抑制COS-7細(xì)胞內(nèi)源MYH10的表達(dá),說明了穩(wěn)定敲低MYH10基因的COS-7細(xì)胞株的建立,為進(jìn)一步研究MYH10在相關(guān)疾病中的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:COS-7 cell line objective to construct stable knockdown of MYH10 gene. Methods the virus in 293TX cells for packaging, obtained high titer lentivirus infected COS-7 cells by Western blot and fluorescence microscopy, the expression changes of COS-7 cells MYH10 protein detection after virus infection. Results in the two kinds of recombinant plasmid, MYH10-lentiviral shRNA-2 exhibit obvious interference effect in transfected expression after infection significantly reduced MYH10 protein expression in COS-7 cells. Conclusion the virus infected COS-7 cells can inhibit COS-7 cell endogenous MYH10, the establishment of COS-7 cell line stable knockdown of the MYH10 gene, which laid the foundation for the further study of MYH10 in related diseases the function.
【作者單位】: 中國人民解放軍307醫(yī)院醫(yī)學(xué)工程科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31400739) 北京市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(5144033)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 非肌肉肌球蛋白重鏈10(nonmuscle myosin heavychainⅡB,MYH10或NMⅡ-B)是一種由人第17號(hào)染色體上的MYH 10基因編碼的蛋白,存在于非肌細(xì)胞中如血小板、神經(jīng)細(xì)胞、巨核細(xì)胞等[1~4],在細(xì)胞黏附、遷移、胞質(zhì)分裂及細(xì)胞趨藥性等方面發(fā)揮著重要的作用,但有關(guān)以上作用的機(jī)制尚未得到
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1392328
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