發(fā)布時間：2018-01-07 11:16

  本文關鍵詞：穩(wěn)定敲低MYH10基因細胞株的建立　出處：《醫(yī)學研究雜志》2015年11期 　論文類型：期刊論文

  更多相關文章： MYH基因 COS-細胞株 慢病毒感染

【摘要】：目的構(gòu)建穩(wěn)定敲低MYH10基因的COS-7細胞株。方法在293TX細胞中進行病毒的包裝,用獲得的高效價慢病毒感染COS-7細胞,通過免疫印跡和熒光顯微鏡,檢測病毒感染后COS-7細胞MYH10蛋白表達的變化。結(jié)果在構(gòu)建的兩種重組質(zhì)粒中,MYH10-lentiviral shRNA-2在轉(zhuǎn)染后表現(xiàn)出明顯的干擾作用,感染后能明顯下調(diào)COS-7細胞的MYH10蛋白表達。結(jié)論病毒感染的COS-7細胞可明顯抑制COS-7細胞內(nèi)源MYH10的表達,說明了穩(wěn)定敲低MYH10基因的COS-7細胞株的建立,為進一步研究MYH10在相關疾病中的功能奠定了基礎。
[Abstract]:COS-7 cell line objective to construct stable knockdown of MYH10 gene. Methods the virus in 293TX cells for packaging, obtained high titer lentivirus infected COS-7 cells by Western blot and fluorescence microscopy, the expression changes of COS-7 cells MYH10 protein detection after virus infection. Results in the two kinds of recombinant plasmid, MYH10-lentiviral shRNA-2 exhibit obvious interference effect in transfected expression after infection significantly reduced MYH10 protein expression in COS-7 cells. Conclusion the virus infected COS-7 cells can inhibit COS-7 cell endogenous MYH10, the establishment of COS-7 cell line stable knockdown of the MYH10 gene, which laid the foundation for the further study of MYH10 in related diseases the function.

【作者單位】： 中國人民解放軍307醫(yī)院醫(yī)學工程科;
【基金】：國家自然科學基金青年科學基金資助項目(31400739) 北京市自然科學基金資助項目(5144033)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 非肌肉肌球蛋白重鏈10(nonmuscle myosin heavychainⅡB,MYH10或NMⅡ-B)是一種由人第17號染色體上的MYH 10基因編碼的蛋白,存在于非肌細胞中如血小板、神經(jīng)細胞、巨核細胞等[1~4],在細胞黏附、遷移、胞質(zhì)分裂及細胞趨藥性等方面發(fā)揮著重要的作用,但有關以上作用的機制尚未得到

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 鞏偉麗;徐廣;韓秋影;陳媛;;慢病毒感染方法構(gòu)建穩(wěn)定干涉PDRG1的HeLa細胞系[J];科學技術與工程;2013年22期

2 張洪峰;彭軍;;非肌肉肌球蛋白Ⅱ研究進展[J];中國藥理學通報;2012年01期

【共引文獻】

相關期刊論文 前2條

1 周晨辰;陸t$;張鵬飛;張硌;;穩(wěn)定敲低MYH10基因細胞株的建立[J];醫(yī)學研究雜志;2015年11期

2 劉昆;左兆云;賈慧娜;羅海玲;;免疫共沉淀聯(lián)合質(zhì)譜技術篩選綿羊α-生育酚轉(zhuǎn)移蛋白的互作蛋白[J];中國畜牧雜志;2014年15期

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前6條

1 陳媛;鞏偉麗;韓秋影;張颯;李濤;;逆轉(zhuǎn)錄病毒感染結(jié)合流式細胞分選方法構(gòu)建穩(wěn)定過表達CUEDC2的MCF-10A細胞系[J];科學技術與工程;2012年24期

2 李騰;高彥飛;常艷;王玉博;穆蕊;陳亮;甄誠;韓秋影;于鳴;鞏偉麗;張維娜;李慧艷;;HeLa/GFP—H2B細胞系的構(gòu)建及對其有絲分裂進程的動態(tài)觀察[J];科學技術與工程;2011年21期

3 曾思聰;周兟;盧光t;;端粒酶shRNA慢病毒載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染人類胚胎干細胞[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2011年08期

4 江飛;袁華;丁思陽;牛玉明;杜一飛;陳寧;;E2F-1基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定[J];口腔生物醫(yī)學;2011年01期

5 宋波;韓志強;吳少璞;劉景偉;蔡曉輝;楊靖;許予明;;重組慢病毒載體pLKO-1-EGFP-puro的構(gòu)建[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2010年06期

6 馮小明;張杰;劉永生;陳豪泰;馬麗娜;孫德惠;;慢病毒載體及慢病毒介導的RNA干擾[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2009年03期

，

本文編號：1392328