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日本血吸蟲(chóng)感染小鼠體內(nèi)IL-17、IL-23的動(dòng)態(tài)變化研究

發(fā)布時(shí)間:2018-01-06 23:31

  本文關(guān)鍵詞:日本血吸蟲(chóng)感染小鼠體內(nèi)IL-17、IL-23的動(dòng)態(tài)變化研究 出處:《華中科技大學(xué)》2010年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:在人類的寄生蟲(chóng)病中,血吸蟲(chóng)病是嚴(yán)重影響社會(huì)經(jīng)濟(jì)和公共健康的一種全球性疾病,其危害性僅次于瘧疾。血吸蟲(chóng)病在約76個(gè)國(guó)家或地區(qū)流行,主要分布在亞洲、非洲與拉丁美洲。對(duì)人體危害較大的血吸蟲(chóng)有3種,即日本血吸蟲(chóng)、埃及血吸蟲(chóng)、曼氏血吸蟲(chóng)。其中,在我國(guó)流行的是日本血吸蟲(chóng),其感染人數(shù)超過(guò)76萬(wàn),尤其在農(nóng)村和城郊地區(qū),由于人群衛(wèi)生知識(shí)缺乏及基本衛(wèi)生設(shè)施達(dá)不到衛(wèi)生要求,而使該地區(qū)人群處于高感染風(fēng)險(xiǎn)中。 疫苗是控制與根除血吸蟲(chóng)病的重要手段之一。血吸蟲(chóng)病的疫苗研究已逾半個(gè)世紀(jì),目前世界上公認(rèn)為有發(fā)展前途的疫苗候選抗原有6種,即血吸蟲(chóng)97kD的副肌球蛋白、谷胱苷肽S轉(zhuǎn)移酶、Sm37甘油磷酸脫氫酶、Sm14脂肪酸結(jié)合蛋白、磷酸丙糖異構(gòu)酶、照射疫苗,但這些疫苗效果不是很理想,離實(shí)際應(yīng)用尚有一定的距離,因此還需進(jìn)一步研究血吸蟲(chóng)與宿主的相互關(guān)系,研究其免疫效應(yīng)機(jī)制。眾所周知,有效的免疫均會(huì)產(chǎn)生抗原特異性的CD4+ T細(xì)胞反應(yīng),其在宿主防御方面發(fā)揮重要作用。 最近研究發(fā)現(xiàn)了一種新的CD4+ T細(xì)胞亞群—Th17,其命名同Th1與Th2一樣,是一種功能性的分類方法,主要是基于其分泌細(xì)胞因子的不同而命名,分化成熟的Thl7可以分泌IL-17A,IL-17F,IL-21,IL -22等多種細(xì)胞因子,其中IL-17A在宿主防御與自身免疫性疾病中具有重要的調(diào)節(jié)作用。研究還發(fā)現(xiàn),孤兒核受體(Orphan nuclear receptor,RORγt)是控制Thl7細(xì)胞分化的特征性轉(zhuǎn)錄因子。在初始CD4+ T細(xì)胞向Th17細(xì)胞的分化中,TGF-β與IL-6首先啟動(dòng)該過(guò)程,隨后產(chǎn)生的Th17細(xì)胞自分泌產(chǎn)生IL-21擴(kuò)大分化規(guī)模,進(jìn)一步活化STAT3,誘導(dǎo)RORγt表達(dá);而IL-23是維持Th17存活的重要因子,缺少IL-23不影響Th17的產(chǎn)生,但Th17不能擴(kuò)增和存活。Th17是感染性炎癥必需的效應(yīng)細(xì)胞,研究發(fā)現(xiàn),多種微生物早期均可誘導(dǎo)表達(dá)IL-17,IL-17與其受體結(jié)合后即可誘導(dǎo)這些受體細(xì)胞(如粒細(xì)胞、上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞)表達(dá)趨化因子與細(xì)胞因子,從而誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞的產(chǎn)生、活化并將其招募至感染部位,參與機(jī)體的防御作用。除此外,IL-17的產(chǎn)生還能誘導(dǎo)Th1和TDTH的分化,誘導(dǎo)Th1型炎癥反應(yīng)。IL-23/IL-17細(xì)胞因子軸越來(lái)越成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)問(wèn)題,基于以上方面的研究,我們認(rèn)為L(zhǎng)-23/IL-17細(xì)胞因子軸與日本血吸蟲(chóng)感染也存在某些方面的聯(lián)系。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)檢測(cè)日本血吸蟲(chóng)自然感染小鼠模型中IL-17和IL-23的動(dòng)態(tài)表達(dá)來(lái)探討L-23/IL-17細(xì)胞因子軸在日本血吸蟲(chóng)病發(fā)病中的可能作用。 BALB/c鼠經(jīng)皮感染25條日本血吸蟲(chóng)尾蚴,在感染后不同時(shí)間點(diǎn)(1、2、4、6、8、10周)剖殺,無(wú)菌取脾,分離脾臟組織及脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液,并經(jīng)心臟灌注收集成蟲(chóng)。用雙抗體夾心ELISA和RT-PCR檢測(cè)正常對(duì)照組(0周處理組)與感染組中IL-17A與IL-23p19在蛋白水平與mRNA水平的表達(dá)。 ELISA結(jié)果顯示,血吸蟲(chóng)感染后,脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-17A蛋白分泌水平明顯升高,且在感染后的第1周檢測(cè)到急劇升高的IL-17A,此后逐漸下降,至感染后第4周恢復(fù)至正常水平,第8周時(shí)其表達(dá)水平低于正常值;感染后小鼠體內(nèi)IL-23p19的表達(dá)水平也逐步升高,并于感染后第2周到達(dá)高峰,感染后第4周開(kāi)始逐漸下降,到第8周末IL-23p19的表達(dá)低于正常值。 RT-PCR顯示,正常對(duì)照組與感染后6個(gè)時(shí)間點(diǎn)剖殺的小鼠體內(nèi)均檢測(cè)到IL-17A和IL-23p19 mRNA的表達(dá),且感染與正常對(duì)照組相比,兩種細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平均有一定程度的上升。感染1周后IL-17A mRNA的表達(dá)水平急劇升高,其結(jié)果與蛋白的表達(dá)是一致的。且研究中我們還發(fā)現(xiàn),在日本血吸蟲(chóng)自然感染小鼠模型中IL-17A和IL-23p19 mRNA的變化趨勢(shì)中還存在著正相關(guān)(P0.01)。 本研究通過(guò)對(duì)日本血吸蟲(chóng)自然感染模型體內(nèi)IL-17A與IL-23p19的動(dòng)態(tài)變化的觀察,發(fā)現(xiàn):IL-23p19、IL-17A在血吸蟲(chóng)感染小鼠體內(nèi)協(xié)同表達(dá),并于感染早期呈現(xiàn)顯著上升趨勢(shì),提示IL-17A、IL-23p19可能參與了血吸蟲(chóng)感染早期的免疫病理過(guò)程。
[Abstract]:In the parasitic diseases of humans , schistosomiasis is a global disease which has a serious impact on socio - economic and public health , and its harmfulness is second only to malaria . There are three species of Schistosoma japonicum in Asia , Africa and Latin America . The vaccine is one of the important methods to control and eradicate schistosomiasis . The vaccine research for schistosomiasis has been more than half a century . There are six kinds of vaccine candidate antigens in the world , namely , the 97 kD paramyosin , glutathione S transferase , Sm37 glycerol phosphate dehydrogenase , Sm14 fatty acid binding protein , phosphotriose isomerase and irradiation vaccine . However , these vaccine effects are not ideal , and the mechanism of immune effector is studied . It is well known that effective immunization can produce antigen - specific CD4 + T cell response , which plays an important role in host defense . In this study , it was found that the expression of IL - 17 and IL - 17 could induce the differentiation of Th1 and TDTH and induce Th1 - type inflammatory response . The expression of IL - 17A and IL - 23p19 at different time points ( 1 , 2 , 4 , 6 , 8 , 10 weeks ) in BALB / c mice infected with Schistosoma japonicum was detected by double - antibody sandwich ELISA and RT - PCR . ELISA results showed that IL - 17A secretion levels in the supernatant of spleen cells increased significantly after infection , and the level of IL - 23p19 increased gradually after infection at Week 1 , and the level of IL - 23p19 increased gradually after infection . The level of IL - 23p19 increased gradually in the second week after infection . RT - PCR showed that IL - 17A and IL - 23p19 mRNA were detected in normal control group and 6 time points after infection , and the levels of IL - 17A and IL - 23p19 mRNA were increased in the normal control group . In this study , the dynamic changes of IL - 17A and IL - 23p19 in mice infected with Schistosoma japonicum were observed . It was found that IL - 23p19 and IL - 17A were co - expressed in mice infected with Schistosoma japonicum .

【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R392

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本文編號(hào):1390016


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