本文關(guān)鍵詞：宿主免疫抑制對(duì)青蒿琥酯抗日本血吸蟲(chóng)作用的影響及日本血吸蟲(chóng)成蟲(chóng)自發(fā)熒光研究　出處：《蘇州大學(xué)》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 日本血吸蟲(chóng)病是一種嚴(yán)重危害我國(guó)人民健康、影響經(jīng)濟(jì)發(fā)展的寄生蟲(chóng)病�；熥鳛檠x(chóng)病綜合性防治措施的重要組成部分,其目的在于通過(guò)殺滅人和哺乳動(dòng)物體內(nèi)的血吸蟲(chóng),降低人、畜感染率和感染度,獲得控制患病和消滅傳染源的雙重效果。我國(guó)和某些以病人為血吸蟲(chóng)病主要傳染源的國(guó)家,在安全有效、使用方便的特效藥問(wèn)世之前,化療已被列為主要措施之一,與滅螺并列為兩大固定防治措施。青蒿琥酯(Artesunate)等青蒿素類藥物對(duì)日本血吸蟲(chóng)病和曼氏血吸蟲(chóng)病的早期預(yù)防治療效果肯定,并已在多次現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用和抗洪救災(zāi)中發(fā)揮了積極有效的作用。本實(shí)驗(yàn)旨在研究青蒿琥酯的抗日本血吸蟲(chóng)作用與宿主免疫功能狀態(tài)的關(guān)系,特別是用氫化可的松(Hydrocortisone)造模觀察宿主免疫功能抑制狀態(tài)對(duì)青蒿琥酯抗血吸蟲(chóng)作用的影響,以期為各種原因?qū)е碌臋C(jī)體免疫缺陷人群更加合理、安全、有效的用藥提供參考和依據(jù)。另外,我們還利用熒光顯微鏡和激光共聚焦掃描顯微鏡對(duì)日本血吸蟲(chóng)成蟲(chóng)的自發(fā)熒光現(xiàn)象進(jìn)行了觀察和光譜學(xué)信息分析。 第一部分宿主免疫抑制對(duì)青蒿琥酯抗日本血吸蟲(chóng)作用的影響 目的:研究宿主免疫抑制對(duì)青蒿琥酯抗日本血吸蟲(chóng)作用的影響。 方法:小鼠常規(guī)方法實(shí)驗(yàn)室感染日本血吸蟲(chóng)尾蚴,每鼠50±2條,并隨機(jī)分為4組:對(duì)照組、氫化可的松組(HC組)、青蒿琥酯組(Art組)和氫化可的松+青蒿琥酯組(HC+Art組)。感染后第7d開(kāi)始腹腔注射氫化可的松構(gòu)建免疫抑制模型,25mg/kg.d,連續(xù)7d。感染后第14d一次灌胃給藥青蒿琥酯混懸液,400mg/kg。感染7wk后剖殺所有小鼠取蟲(chóng)計(jì)數(shù)。同樣造模方法于感染后第14d開(kāi)始注射氫化可的松,第21d青蒿琥酯灌胃治療,感染7wk后取蟲(chóng)做鹽酸卡紅染色制片。 結(jié)果:青蒿琥酯在免疫抑制小鼠體內(nèi)的殺蟲(chóng)作用較之于在免疫功能正常小鼠體內(nèi)顯著減弱,減蟲(chóng)率分別為19.92%和33.00%(P0.05);在免疫抑制小鼠模型中,使用青蒿琥酯治療與否,其減蟲(chóng)率分別為19.92%和19.28%,并無(wú)顯著性差異(P0.05)。鹽酸卡紅染色直觀顯示蟲(chóng)體腸管大體變化也提示,青蒿琥酯在免疫抑制模型中對(duì)蟲(chóng)體的損傷作用明顯減弱。 結(jié)論:青蒿琥酯的抗日本血吸蟲(chóng)效果與宿主的免疫功能狀態(tài)有著密切關(guān)系,在宿主免疫功能抑制狀態(tài)下青蒿琥酯甚至不能發(fā)揮有效的殺蟲(chóng)作用。宿主正常的免疫功能狀態(tài)可能是青蒿琥酯充分發(fā)揮殺蟲(chóng)作用的重要前提之一。 第二部分日本血吸蟲(chóng)成蟲(chóng)自發(fā)熒光觀察及共聚焦λ掃描分析 目的:研究日本血吸蟲(chóng)成蟲(chóng)自發(fā)熒光現(xiàn)象及共聚焦λ掃描特點(diǎn),豐富日本血吸蟲(chóng)生物學(xué)和光譜學(xué)信息。 方法:小鼠感染日本血吸蟲(chóng)尾蚴6wk后剖殺,收集成蟲(chóng)于無(wú)菌生理鹽水中并分離雌雄蟲(chóng)體。熒光顯微鏡下分別以紫外光、藍(lán)光、綠光等不同激發(fā)光源激發(fā)觀察蟲(chóng)體自發(fā)熒光;激光共聚焦掃描顯微鏡下分別以405nm、458nm、476nm、488nm、514nm、543nm、633nm等7種激發(fā)光激發(fā)雄蟲(chóng)口吸盤(pán)部做自發(fā)熒光λ掃描分析。 結(jié)果:不同激發(fā)光照射下日本血吸蟲(chóng)蟲(chóng)體能發(fā)出多種不同顏色的自發(fā)熒光,以藍(lán)光激發(fā)的黃綠色熒光效果最佳,蟲(chóng)體大體結(jié)構(gòu)清晰;λ掃描分別以405nm、488nm、514nm和543nm激發(fā)光激發(fā)樣品,相應(yīng)敏感的發(fā)射波長(zhǎng)分別為490-510nm、550-570nm、560-580nm和590-600nm,其中488nm和514nm激發(fā)效果較好。458nm、476nm、633nm激發(fā)效果欠佳。 結(jié)論:熒光顯微鏡下可觀察日本血吸蟲(chóng)成蟲(chóng)自發(fā)熒光,最佳模式是以藍(lán)光激發(fā)觀察黃綠色熒光;日本血吸蟲(chóng)雄蟲(chóng)自發(fā)熒光光譜較寬,主要分布于500-600nm;488nm和514nm為較適宜的激發(fā)波長(zhǎng)。
[Abstract]:Schistosomiasis is a serious harm to the health of our people, parasitic diseases affecting economic development. Chemotherapy as an important part of comprehensive schistosomiasis control measures, its purpose is to reduce people by killing human and mammalian in vivo, and the infection rate of Schistosoma infection rate of livestock, to gain control of double effect of illness and eliminate the source of infection. Our country and some to the patient as the main infection sources of schistosomiasis in the country, safe and effective, convenient use before the advent of medicine, chemotherapy has been listed as one of the main measures, and the snail is one of two major fixed control measures. Artesunate (Artesunate) etc. artemisinins at early stage of schistosomiasis and the prevention and treatment of schistosomiasis mansoni a positive effect, and has several field application and flood relief has played a positive and effective role. This experiment aims to study the Anti Japanese artesunate The relationship between schistosome and host immune function, especially the use of hydrocortisone (Hydrocortisone) effect of anti schistosomiasis effect model to observe the host immune function inhibition of artesunate, in order for all causes of immunodeficiency crowd is more reasonable, safe, and provide reference for effective medication. In addition, we also use fluorescence microscopy confocal laser scanning microscopy and autofluorescence of adult Schistosoma japonicum were analyzed to observe and spectroscopic information.
The effect of artesunate against Schistosoma japonicum in the first part of the host immunosuppression
Objective: To study the effect of host immunosuppression on the effect of artesunate against Schistosoma japonicum.
Methods: the conventional method of laboratory mice infected with Schistosoma japonicum cercariae per mouse, 50 + 2, and randomly divided into 4 groups: control group, hydrocortisone group (HC group), artesunate group (Art group) and hydrocortisone plus artesunate group (HC+Art group). 7d after infection of peritoneal injection of hydrocortisone construction the model of immune suppression, 25mg/kg.d, continuous 7d. infection 14d after an intragastric administration of artesunate suspension, 400mg/kg. infection after 7wk killed all mice. The same insect count model after infection after 14d injection of hydrocortisone, 21d artesunate orally treated, 7wk infection after worm hydrochloric acid carmine staining producer.
Results: compared with the insecticidal effect of artesunate in immunosuppressive mice significantly reduced the immune function in normal mice, the worm reduction rates were 19.92% and 33% (P0.05); immune suppression in the mouse model, the use of artesunate in the treatment or not, the worm reduction rates were 19.92% and 19.28%, there was no significant difference (P0.05). Display card hydrochloride red staining insect intestinal gross changes also suggest that artesunate in immunosuppressive effect on body injury model was significantly decreased.
Conclusion: the effect of artesunate against Schistosoma japonicum and the immune function of the host is closely related to the inhibitory condition of artesunate can not even play an effective role in killing the host immune function. Normal immunity of the host may be one of the important premise of the antischistosomal effect of artesunate.
The second part of the autofluorescence of adult Schistosoma japonicum and the analysis of CO focal lambda scanning
Objective: To study the characteristics of the spontaneous fluorescence of Schistosoma japonicum and the characteristics of the co focal lambda scanning, and to enrich the biological and spectroscopic information of Schistosoma japonicum.
Methods: mice infected with cercariae of Schistosoma japonicum 6wk after slaughter, was collected in sterile saline and separating the male and female worms. Under fluorescence microscope respectively with UV light, blue light, green light and different excitation observation body autofluorescence; confocal laser scanning microscope respectively by 405nm, 458nm, 476nm, 488nm, 514nm. 543nm, 633nm and other 7 kinds of excitation male oral sucker of spontaneous fluorescence analysis of lambda scanning.
Results: the different excitation light of Schistosoma japonicum from physical autofluorescence in different colors, with yellow green fluorescence effect of blue light excitation best body generally clear structure; scanning lambda respectively by 405nm, 488nm, 514nm and 543nm excitation emission wavelength sensitive samples, respectively 490-510nm, 550-570nm, 560-580nm and 590-600nm, in which 488nm and 514nm better results.458nm, 476nm, 633nm excitation effect is poor.
Conclusion: Observation of Schistosoma japonicum adult spontaneous fluorescence under fluorescence microscope, the best model is based on the observation of blue light yellow green fluorescence; Schistosoma japonicum by autofluorescence spectrum is wide, mainly distributed in the 500-600nm; 488nm and 514nm as the excitation wavelength is more appropriate.

【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R285;R392

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本文編號(hào)：1365411