本文關(guān)鍵詞：基于小鼠模型的兩種組織干細(xì)胞的相關(guān)研究　出處：《中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 內(nèi)源性肺干細(xì)胞指位于肺組織內(nèi)能自我更新并在特定條件下分化為肺組織的細(xì)胞。肺干細(xì)胞參與肺組織的穩(wěn)態(tài)維持和損傷修復(fù)。在肺內(nèi),衰老可能通過(guò)影響肺干細(xì)胞的再生能力和分化功能導(dǎo)致肺組織結(jié)構(gòu)和功能的變化。衰老是肺纖維化發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。肌成纖維細(xì)胞與肺纖維化的發(fā)生密切相關(guān)。為了探討肺干細(xì)胞與衰老及肺纖維化間的相互關(guān)系,我們進(jìn)行了肺損傷處理、干細(xì)胞分析分選及體外培養(yǎng)。但目前尚無(wú)公認(rèn)的肺干細(xì)胞表面標(biāo)記,我們對(duì)遠(yuǎn)端肺組織干細(xì)胞不同表面標(biāo)記分選的肺干細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),比較了(CD31-CD45-Sca-1+CD34+和CD31一CD45一Sca-1-EpCAM+)兩種分選策略。 結(jié)果表明CD31-CD45-Sca-1-rEpCAM+肺干細(xì)胞表面標(biāo)記策略更適合于區(qū)分遠(yuǎn)端肺組織的上皮干細(xì)胞和間質(zhì)干細(xì)胞。我們通過(guò)建立肺損傷小鼠模型來(lái)研究在肺損傷修復(fù)過(guò)程中衰老對(duì)小鼠的肺損傷修復(fù)能力的影響,進(jìn)而探討其肺干細(xì)胞的增殖修復(fù)能力的差異,以期探討肺的損傷修復(fù)機(jī)制。比較不同周齡小鼠的肺干細(xì)胞及肺間質(zhì)干細(xì)胞的數(shù)量,發(fā)現(xiàn)在正常生理狀態(tài)下增齡對(duì)肺干細(xì)胞(包括遠(yuǎn)端肺上皮干細(xì)胞和肺間質(zhì)干細(xì)胞/前體細(xì)胞)的數(shù)量及比例影響不顯著。而在肺損傷修復(fù)過(guò)程中,肺上皮干細(xì)胞和肺間質(zhì)干細(xì)胞/前體細(xì)胞的比例下降。在衰老過(guò)程中肺損傷修復(fù)的能力存在明顯的減弱趨勢(shì)。我們對(duì)不同月齡小鼠的肺組織細(xì)胞中肌成纖維細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行分析,提示在衰老過(guò)程中導(dǎo)致肺間質(zhì)干細(xì)胞的組成發(fā)生了變化,向肌成纖維細(xì)胞分化的比例升高。這是肺纖維化發(fā)生的可能機(jī)制之一。 RunX3 (Runt-related transcription factor 3, Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3)基因與細(xì)胞增殖、凋亡、分化有關(guān),對(duì)免疫系統(tǒng)疾病,癌癥的發(fā)生存在影響。為了研究RunX3基因與造血干細(xì)胞(Haematopoietic stem cells, HSCs)自我更新及分化能力的關(guān)系,我們通過(guò)RunX3基因敲除小鼠的競(jìng)爭(zhēng)性骨髓移植實(shí)驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)研究。 競(jìng)爭(zhēng)性骨髓移植實(shí)驗(yàn)是判斷干細(xì)胞自我更新能力的標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)。移植3月后的受體小鼠利用5-氟尿嘧啶(5-Fluororucail,5-FU)處理以進(jìn)一步確定RunX3基因敲除小鼠的骨髓造血干細(xì)胞在損傷修復(fù)情況下的增殖及分化能力。RunX3小鼠供體來(lái)源的外周血髓系細(xì)胞占總外周血髓系細(xì)胞的比例較野生對(duì)照鼠高。5-FU處理一周后RunX3-/小鼠供體來(lái)源外周血中髓系細(xì)胞比例敲除組較野生組高,5-FU處理一月后RunX3-/小鼠供體來(lái)源外周血中B細(xì)胞比例下降。 RunX3-/小鼠骨髓干細(xì)胞供體來(lái)源的外周血細(xì)胞占總外周血細(xì)胞的比例與野生對(duì)照鼠相比無(wú)明顯差異。小鼠在正常生理狀態(tài)時(shí),RunX3基因?qū)υ煅杉?xì)胞穩(wěn)態(tài)維持及其分化影響不明顯。RunX3基因缺失對(duì)骨髓短期和長(zhǎng)期造血干細(xì)胞的自我更新能力的影響不顯著,但對(duì)骨髓造血干細(xì)胞向髓系血細(xì)胞的分化能力可能有促進(jìn)作用。在應(yīng)激的早期RunX3基因的缺失可能導(dǎo)致了骨髓造血干細(xì)胞向髓系細(xì)胞的分化增多,而向B淋巴細(xì)胞的分化降低。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1350034