本文關(guān)鍵詞：NGF刺激PC12細胞神經(jīng)分化過程中轉(zhuǎn)錄因子E2F1參與PTPRO表達調(diào)控的研究　出處：《東北師范大學(xué)》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： PTPRO是受體型酪氨酸磷酸酯酶家族的一員,其功能主要涉及神經(jīng)組織中軸突的生長和導(dǎo)向,以及腫瘤抑制。PTPRO的表達具有組織特異性,在哺乳動物中PTPRO主要表達于不同發(fā)育時期的腎臟組織和神經(jīng)組織,而在很多腫瘤細胞中則通過DNA甲基化沉默。有文獻報道,PTPRO在機體發(fā)育和腦的成熟中發(fā)揮重要作用,例如在腎臟中,PTPRO表達于發(fā)育早期的腎小球細胞頂部和發(fā)育成熟的腎小球足細胞頂部;在腦中,PTPRO基因最高表達出現(xiàn)于妊娠中后期,這一時期也是腦部軸突發(fā)生的主要時期。已有研究證明,受體型酪氨酸磷酸酯酶家族(RPTPs)成員在調(diào)節(jié)果蠅神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中起主要作用。在脊椎動物中,許多受體型酪氨酸磷酸酯酶家族(RPTPs)成員例如:typeⅡa RPTPs,typeⅢRPTP已經(jīng)在軸突生長過程中發(fā)揮重要作用,但是PTPRO參與軸突生長的具體機制以及表達調(diào)控機制卻報道很少。 本論文旨在研究PTPRO基因在NGF誘導(dǎo)PC12軸突分化過程中表達升高的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制。通過反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)、real-time RCR和Western blotinging檢測我們發(fā)現(xiàn),NGF誘導(dǎo)PC12軸突分化后,PTPRO基因表達發(fā)生了明顯的上調(diào)。細胞轉(zhuǎn)染和熒光素酶報告基因分析結(jié)果顯示,外源過表達轉(zhuǎn)錄因子E2F1能顯著提高PTPRO啟動子熒光素酶報告基因的活性。real-time RCR和western bloting結(jié)果表明,轉(zhuǎn)錄因子E2F1提高了細胞內(nèi)源PTPTO基因的mRNA和蛋白表達水平。點突變實驗確定了PTPRO啟動子上E2F1的結(jié)合位點。而ChIP實驗表明E2F1能夠結(jié)合在PTPRO的啟動子上。 通過以上實驗,我們初步地研究了PC12細胞在NGF刺激后PTPRO表達上調(diào)的調(diào)控機制。為下一步更詳細的研究PTPRO在神經(jīng)分化過程中的具體分子機制以及PTPRO基因調(diào)控的具體機制定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:PTPRO is a member of the receptor tyrosine phosphatase family, whose function mainly involves the growth and guidance of axons in the nerve tissue and tumor inhibition. The expression of PTPRO is tissue-specific. In mammals, PTPRO is mainly expressed in different developmental stages of renal tissue and nerve tissue, while in many tumor cells, DNA methylation is silent. There are reports in the literature, PTPRO play an important role in the development of the body and brain maturation, for example in the kidney, the expression of PTPRO in the development of glomerular cells and top early podocyte top mature development; in the brain, the highest expression of PTPRO gene in late pregnancy, the main period of this period is also the occurrence of brain axons. It has been shown that the member of the type tyrosine phosphatase family (RPTPs) plays a major role in regulating the development of the nervous system in Drosophila. In vertebrates, many receptor tyrosine phosphatase family (RPTPs) members, such as type II a RPTPs, type III RPTP, have played an important role in the process of axonal growth. However, there are few reports about the mechanism of PTPRO involved in axonal growth and the regulation mechanism of its expression.
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R33;R730.2

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本文編號：1345820