本文關(guān)鍵詞：新型單胺氧化酶熒光探針的研究　出處：《浙江工業(yè)大學(xué)》2009年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 單胺氧化酶 熒光探針 香豆素 熒光檢測 提取

【摘要】： 單胺氧化酶(MAO)是一種膜結(jié)合線粒體酶,在多巴胺氧化代謝中起重要作用。根據(jù)其對底物或抑制劑結(jié)合的特異性、細(xì)胞分布、免疫特異性等特性分為A和B兩種形式。它與人體的很多精神性疾病以及健康有著密切的關(guān)系,譬如帕金森癥、阿爾之海默癥、精神分裂癥和攻擊性行為及癌癥等。因此,MAO作為新藥物的靶標(biāo)越來越受到廣泛的關(guān)注和研究。目前有多種方法檢測單胺氧化酶的活性:分光光度法、放射性法、高效液相法以及熒光探針法等。分光光度法、放射性法、高效液相法等都不適合高通量的篩選;而熒光探針具有很高的靈敏度和專一性,并且樣品不需要復(fù)雜的提純,因此熒光探針法被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)和生物學(xué)。 本論文首先根據(jù)單胺氧化酶的反應(yīng)機(jī)理成功設(shè)計(jì)和合成了一個(gè)探針:4-甲基-7-(3-氨基丙基)-香豆素。該探針并無熒光,但經(jīng)與單胺氧化酶作用,3-氨基丙基轉(zhuǎn)化為醛,接著發(fā)生消除反應(yīng)后,生成了具有強(qiáng)烈熒光性能的4-甲基-7-羥基香豆素。因此通過檢測熒光的變化就可檢測MAO的活性。 接著利用從人胎盤和牛肝中提取的MAOA和MAOB粗酶,系統(tǒng)的研究了探針的檢測條件:2h,溫度為37℃,硼酸緩沖液pH=8.4,最后對他們的動力學(xué)常數(shù)進(jìn)行了測定。結(jié)果為MAOA:K_m=16.04±0.05μmol/L,V_max=0.72±0.01nmol/min/mg;MAOB:K_m=12.25±0.05μmol/L,V_max,=2.57±0.02nmol/min/mg。最后,本論文對探針進(jìn)行了簡單的應(yīng)用,包括酶提取和人血清的檢測。 總之,本論文所設(shè)計(jì)的探針是非常高效和靈敏的,同時(shí)它對MAOA和MAOB有選擇性。
[Abstract]:Monoamine oxidase (MAO) is a membrane binding mitochondrial enzyme that plays an important role in the oxidative metabolism of dopamine. It is divided into two forms, A and B, according to the specificity, cell distribution, and immunological specificity of the combination of substrates or inhibitors. It is closely related to many mental disorders and health of human body, such as Parkinson's disease, Alzheimer's disease, schizophrenia and aggressive behavior and cancer. Therefore, as the target of new drugs, MAO has attracted more and more attention and research. There are many methods to detect the activity of monoamine oxidase, such as spectrophotometry, radioactivity, high performance liquid phase and fluorescence probe. Spectrophotometry, radioactivity and high performance liquid chromatography are not suitable for high-throughput screening. However, fluorescent probes are highly sensitive and specific, and samples do not need complex purification. Therefore, fluorescence probe method is widely applied in biomedicine and biology.
【學(xué)位授予單位】：浙江工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R341

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 施林祥,李東輝;實(shí)時(shí)熒光PCR研究新進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2005年05期

2 黃萍;顏仰東;李東輝;;量子點(diǎn)熒光探針在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2007年20期

3 徐麗;劉明明;嚴(yán)拯宇;;量子點(diǎn)的制備及其在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用[J];藥學(xué)進(jìn)展;2008年04期

4 張丹;張煒;;單胺氧化酶與胚胎植入關(guān)系的研究進(jìn)展[J];國際生殖健康/計(jì)劃生育雜志;2009年03期

5 袁景利;葉志強(qiáng);王桂蘭;;稀土熒光生物探針與時(shí)間分辨熒光生物成像分析技術(shù)[J];生物物理學(xué)報(bào);2009年S1期

6 ;血清單胺氧化酶的測定及臨床應(yīng)用[J];天津醫(yī)藥;1977年05期

7 袁振鐸,李麗娟,余永光,任淑卿;正常家兔血清單胺氧化酶(Monoamine Oxidase)活性測定[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1981年02期

8 陳英玉，馬樹俊，龍振洲;熒光探針標(biāo)記單克隆抗體在不同條件下的熒光變化[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1996年04期

9 方理本;;西藥忌口[J];健康博覽;1996年09期

10 張海容;郭祀遠(yuǎn);李琳;蔡妙顏;;靶向分子羧甲基多糖與DNA作用機(jī)理研究[J];光譜學(xué)與光譜分析;2006年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 周硼;孟慶濤;宋春霞;趙秀文;;熒光探針法測定水環(huán)境中汞離子的研究[A];第五屆全國環(huán)境化學(xué)大會摘要集[C];2009年

2 陳進(jìn)雪;葉志強(qiáng);王桂蘭;袁景利;;一種過氧化氫測定用新型鋱配合物熒光探針的設(shè)計(jì)、合成與應(yīng)用[A];第十屆中國化學(xué)會分析化學(xué)年會暨第十屆全國原子光譜學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

3 張同艷;孫世國;彭孝軍;;生物熒光探針芘類活性衍生物的合成研究[A];中國化學(xué)會第二十五屆學(xué)術(shù)年會論文摘要集（上冊）[C];2006年

4 龔維;邢艷瓏;尹伶靈;丁白瑜;唐波;;基于硒氮、硒磷功能鍵的新型熒光探針及其在細(xì)胞成像中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第十五屆全國有機(jī)分析及生物分析學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

5 鄭小蘭;樊曉星;閆敏;孫丹;鄭洪;;一種新型高選擇性次氯酸熒光探針[A];中國化學(xué)會第27屆學(xué)術(shù)年會第09分會場摘要集[C];2010年

6 陳繪麗;高巍;薛錦芳;;一種新穎的鋅離子熒光探針及其在細(xì)胞成像中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第27屆學(xué)術(shù)年會第08分會場摘要集[C];2010年

7 徐立謙;白銀娟;孫偉;李劍利;楊秉勤;史真;;新型銅離子誘導(dǎo)FRET熒光探針的設(shè)計(jì)與合成[A];有機(jī)合成創(chuàng)新—產(chǎn)業(yè)化的新動力——中國化學(xué)會全國第三屆有機(jī)合成化學(xué)與過程學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2010年

8 徐容;Kenneth W．Spitzer;;應(yīng)用熒光探針測定單個(gè)心肌細(xì)胞內(nèi)的氯離子濃度[A];動物學(xué)專輯——上海市動物學(xué)會2000年年會論文集[C];2000年

9 佟連鵬;張建偉;孔志霞;崔京南;;一種具有變色效應(yīng)的可在生理pH下檢測Co~(2+)的熒光探針[A];中國化學(xué)會第26屆學(xué)術(shù)年會光化學(xué)分會場論文集[C];2008年

10 王丹丹;張文珠;葉志強(qiáng);王桂蘭;袁景利;;熒光素-銪復(fù)合納米粒子比率型熒光探針的制備與應(yīng)用[A];第十屆中國化學(xué)會分析化學(xué)年會暨第十屆全國原子光譜學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 湖北省黃岡市第一人民醫(yī)院藥劑科 張廣求;服用這些藥物應(yīng)忌口[N];健康報(bào);2008年

2 ;春季吃魚有講究[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2003年

3 顏華;貧血影響孩子智力[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2009年

4 劉建生;只要誠信 就能做好（中）[N];國際商報(bào);2005年

5 中信證券 姚杰;科華生物(002022)甲流試劑測評第一[N];中國證券報(bào);2009年

6 會芳;哪些病人不能吃魚[N];大眾科技報(bào);2002年

7 李惠明;服西藥也要“忌口”[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2003年

8 吳笑春;解說單胺氧化酶抑制劑[N];健康報(bào);2004年

9 衣曉峰　金鷗 記者 吳天飛;熒光探針可超早期發(fā)現(xiàn)“癌魔”[N];哈爾濱日報(bào);2009年

10 曉喻;“壞”基因“壞”環(huán)境生出“壞”孩子[N];健康報(bào);2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 崔雷;反應(yīng)激活型疾病診斷熒光探針及其它相關(guān)探針的設(shè)計(jì)、合成及應(yīng)用[D];華東理工大學(xué);2011年

2 李娜;腙類衍生物金屬離子熒光探針及單核苷酸多態(tài)性熒光檢測[D];清華大學(xué);2010年

3 徐林;多功能熒光探針的設(shè)計(jì)、合成與性能研究[D];華東理工大學(xué);2012年

4 武祥龍;新型單克隆抗體熒光探針和pH值熒光探針的合成及免疫熒光組織化學(xué)應(yīng)用[D];西北大學(xué);2010年

5 孟慶濤;材料化熒光探針的合成及應(yīng)用研究[D];大連理工大學(xué);2011年

6 吳玉波;手性d-PET硼酸熒光探針的合成及性能研究[D];大連理工大學(xué);2011年

7 龍凌亮;一系列有機(jī)小分子熒光功能材料的設(shè)計(jì)、合成及其應(yīng)用研究[D];湖南大學(xué);2010年

8 程探宇;氟硼二吡咯（BODIPY）熒光探針的設(shè)計(jì)、合成與應(yīng)用研究[D];華東理工大學(xué);2011年

9 張小玲;新型細(xì)胞Ca～(2+)熒光探針的合成及在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用[D];西北大學(xué);2002年

10 崔冠峰;新型稀土?xí)r間分辨熒光探針的合成與應(yīng)用[D];大連理工大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王嵩;基于BODIPY染料的汞熒光探針的設(shè)計(jì)與應(yīng)用[D];大連理工大學(xué);2010年

2 陸優(yōu)優(yōu);新型單胺氧化酶熒光探針的研究[D];浙江工業(yè)大學(xué);2009年

3 黃寶麗;雙光子金屬離子熒光探針的制備及其性能研究[D];山東輕工業(yè)學(xué)院;2011年

4 李湘廣;新型Carbopyronine熒光探針的設(shè)計(jì)及合成研究[D];西北大學(xué);2011年

5 張妍;幾種熒光探針的合成及在有機(jī)溶劑中水含量檢測中的應(yīng)用[D];湖南大學(xué);2010年

6 陳修福;基于ICT機(jī)理銅離子比率熒光探針[D];大連理工大學(xué);2011年

7 劉媛媛;肽鏈修飾的熒光探針測定活性生物分子的研究及應(yīng)用[D];山東師范大學(xué);2010年

8 杜妍曄;基于PET原理的鉻熒光探針的設(shè)計(jì)與合成[D];廣東工業(yè)大學(xué);2011年

9 汪樂余;半導(dǎo)體納米熒光探針的合成、表征及應(yīng)用[D];安徽師范大學(xué);2002年

10 張曉琳;萘酰亞胺類一氧化氮熒光探針的設(shè)計(jì)、合成及光譜研究[D];大連理工大學(xué);2006年

，

本文編號：1343335