本文關(guān)鍵詞：巨細(xì)胞病毒核酸疫苗構(gòu)建及其在小鼠中的免疫保護(hù)效果評(píng)價(jià)　出處：《湖南師范大學(xué)》2010年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 巨細(xì)胞病毒 核酸疫苗 致死量感染 抗體免疫應(yīng)答 細(xì)胞免疫應(yīng)答

【摘要】：本文分為巨細(xì)胞病毒及其疫苗研究概述、核酸疫苗構(gòu)建及保護(hù)效果評(píng)價(jià)三個(gè)部分。 人類巨細(xì)胞病毒(HCMV)是一種機(jī)會(huì)性感染皰疹病毒,在人群中普遍感染,可在免疫缺陷個(gè)體及新生兒中引起嚴(yán)重疾病。因而了解與其相關(guān)的宿主免疫保護(hù)機(jī)制,并研究出安全有效的疫苗顯得非常重要。美國(guó)2001年將研發(fā)CMV疫苗列為優(yōu)先發(fā)展項(xiàng)目。盡管第一個(gè)HCMV疫苗臨床研究開(kāi)始于30年前,至今仍無(wú)有效預(yù)防HCMV感染及相關(guān)疾病的疫苗面世。目前研究較多的是蛋白亞單位疫苗及核酸疫苗。 由于皰疹病毒嚴(yán)格的種屬特異性,一般用MCMV動(dòng)物模型來(lái)研究巨細(xì)胞病毒的免疫,它們有相似的病毒顆粒結(jié)構(gòu)、基因組組成、組織嗜性及潛伏感染。將PCR擴(kuò)增得到的MCMV Smith株M04、M54、M55、M84、M105和IE-1基因片段分別克隆入pcDNA3.1/myc-His B載體,構(gòu)建成各自基因的表達(dá)質(zhì)粒。這些基因分別編碼gp34,DNA聚合酶,包膜蛋白B(gB),p65,DNA解旋酶和pp89蛋白。經(jīng)過(guò)測(cè)序等證明各個(gè)質(zhì)粒構(gòu)建正確。 我們?cè)贐ALB/c小鼠中評(píng)價(jià)上述核酸疫苗抗CMV急性及潛伏性感染,提供免疫保護(hù)的有效性。通過(guò)電穿孔法免疫小鼠(每次分別免疫100μg,共免疫五次,每次間隔兩周),隨后用致死劑量(3×LD50)的同源病毒(為唾液腺分離病毒SGV,即將MCMV在BALB/c小鼠體內(nèi)連續(xù)傳代14次制得的高毒力SGV)感染小鼠。通過(guò)檢測(cè)小鼠體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)、體重丟失、唾液腺感染病毒滴度及存活率等來(lái)評(píng)價(jià)疫苗的保護(hù)效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,pM55質(zhì)粒能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生高水平的特異性抗體免疫應(yīng)答,pM04,pM84,pM105和pIE1質(zhì)粒免疫過(guò)的小鼠能產(chǎn)生顯著數(shù)目的分泌IFN-y的,脾臟細(xì)胞。五次免疫后,pM04,pM84和pIE-1質(zhì)粒疫苗能提供小鼠完全保護(hù),而pM54,pM55和pM105質(zhì)粒提供的保護(hù)率為56-67%。結(jié)果表明MCMV DNA疫苗能提供有效抗致死量SGV感染的保護(hù)力。
[Abstract]:This article is divided into three parts: the summarization of the study of cytomegalovirus and its vaccine, the construction of nucleic acid vaccine and the evaluation of protection effect.
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李雪丹,金紅;先天巨細(xì)胞病毒感染致畸機(jī)制研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).病毒學(xué)分冊(cè);2004年04期

，

本文編號(hào)：1342492