本文關(guān)鍵詞：ATF4重組慢病毒抑制C2C12細(xì)胞增殖并促凋亡

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【摘要】：目的構(gòu)建人活性轉(zhuǎn)錄因子4(ATF4)慢病毒,探討C2C12細(xì)胞成骨分化過程中ATF4基因慢病毒修飾對(duì)其增殖和凋亡的影響。方法構(gòu)建ATF4重組慢病毒載體質(zhì)粒,然后與2個(gè)包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞中包裝成ATF4慢病毒(LV-ATF4);用病毒感染C2C12細(xì)胞,并用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)BMP2誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞分化時(shí)對(duì)其增殖凋亡的影響,免疫印跡法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá),電子顯微鏡觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果成功構(gòu)建和包裝了ATF4重組慢病毒。FCM檢測(cè)結(jié)果表明,BMP2+LV-ATF4處理組S期細(xì)胞(14.89%)低于BMP2+LV-GFP組(30.64%)(P0.05);BMP2+LV-ATF4處理組細(xì)胞凋亡率(31.06%)高于BMP2+LV-GFP組(11.39%)(P0.05);凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)與FCM結(jié)果一致。結(jié)論在BMP2誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞成骨分化時(shí),LV-ATF4慢病毒可促進(jìn)C2C12細(xì)胞的凋亡,抑制其增殖。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)及遺傳學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81371928,81171697) 教育部新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃(NCET-12-1090)
【分類號(hào)】：R3416
【正文快照】： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是蛋白質(zhì)折疊以及修飾、鈣離子儲(chǔ)存的場(chǎng)所,ATF4(activating transcriptional factor4)是蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(protein kinase R-like ER ki-nase,PERK)下游的重要信號(hào)分子[1]。當(dāng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中聚集大量錯(cuò)誤折疊蛋白時(shí),PERK會(huì)進(jìn)一步被激活,通過磷酸化真核細(xì)胞起始因子2α(eu

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 李巧轉(zhuǎn);王婭蘭;李嫻;;慢病毒PARG-shRNA轉(zhuǎn)染降低大腸癌lovo細(xì)胞基質(zhì)黏附、運(yùn)動(dòng)和侵襲能力[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年03期

2 史晨輝;王維山;李長(zhǎng)俊;張振東;郭風(fēng)勁;陳安民;;慢病毒介導(dǎo)uPA-siRNA重組表達(dá)載體的構(gòu)建及促進(jìn)兔軟骨細(xì)胞增殖[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2014年05期

3 劉寶琴;王華芹;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與未折疊蛋白反應(yīng)的研究進(jìn)展[J];中華腫瘤防治雜志;2010年11期

4 韓騰龍;王立峰;張t，

本文編號(hào)：1297326