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重組甲型流感病毒NS2蛋白抑制感染小鼠肺組織干擾素的產(chǎn)生

發(fā)布時間:2017-12-16 20:41

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【摘要】:目的用大腸桿菌表達(dá)獲得甲型流感病毒(IAV)非結(jié)構(gòu)蛋白2(NS2),并觀察NS2蛋白對小鼠肺組織γ干擾素(IFN-γ)產(chǎn)生的影響。方法構(gòu)建p ET22b(+)/NS2原核表達(dá)質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosetta-gami(2),通過誘導(dǎo)表達(dá)、純化獲得NS2。將40只BALB/c小鼠,隨機(jī)分8組,分別為正常對照組、200μg/kg NS2聯(lián)合病毒組、200μg/kg NS2聯(lián)合RNA組、100μg/kg滅活病毒、0.2×半數(shù)致死量(LD50)病毒組、50μg/kg病毒RNA組、200μg/kg NS2組和100μg/kg NS2組,各組滴鼻給予小鼠處理。通過反轉(zhuǎn)錄PCR、Western blot法分別檢測肺組織IFN-γ的mRNA和蛋白表達(dá)。結(jié)果在異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)下表達(dá)并純化獲得重組NS2;將NS2或/和IAV滴鼻給小鼠后,反轉(zhuǎn)錄PCR和Western blot法檢測表明NS2聯(lián)合病毒組的小鼠肺組織IFN-γmRNA和蛋白水平較病毒組均降低。結(jié)論 NS2抑制IAV所誘導(dǎo)的小鼠肺組織IFN-γmRNA和蛋白的水平。
【作者單位】: 貴州醫(yī)科大學(xué)微生物學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81260249) 貴州省第九批優(yōu)秀青年科技人才培養(yǎng)對象資助[黔科合人字(2013)31號] 第54批博士后基金(2013M542302)
【分類號】:R392-33
【正文快照】: 流行性感冒(以下簡稱流感)是主要由甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)引起的急性呼吸道傳染病。IAV的核心是分為8個節(jié)段的單負(fù)鏈RNA,這8個片段共編碼10種蛋白質(zhì),其中8種為結(jié)構(gòu)蛋白,包括聚合酶堿性蛋白1(polymerase basic protein 1,PB1)、PB2、聚合酶酸性蛋白(polymerase a

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