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腸侵襲性大腸桿菌DPO-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2017-12-09 12:25

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【摘要】:目的為建立腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)的DPO-PCR快速檢測方法。方法本研究以EIECipaH基因?yàn)榘谢蛟O(shè)計(jì)了一對(duì)雙啟動(dòng)寡核苷酸(DPO)引物,建立了EIEC DPO-PCR檢測方法。結(jié)果退火溫度范圍在47℃~67℃內(nèi)都能有效地?cái)U(kuò)增出目的基因,表明該檢測方法對(duì)退火溫度不敏感;該DPO引物僅與EIEC的擴(kuò)增反應(yīng)呈陽性,而與其他菌株無非特異性擴(kuò)增反應(yīng),表明該方法特異性強(qiáng);該方法的靈敏度為1.17×102 cfu/mL。利用該檢測方法對(duì)采集的230份樣品進(jìn)行檢測,共計(jì)檢出3份EIEC陽性樣品,與國標(biāo)法(GB 4789.6-2003)檢測結(jié)果一致,顯示了良好的實(shí)用性。結(jié)論該DPO-PCR方法設(shè)計(jì)簡單、特異性強(qiáng),具有良好的實(shí)用性。
【作者單位】: 海南出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;黑龍江出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;從化出入境檢驗(yàn)檢疫局;重慶出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所牛遺傳育種研究室;遼寧醫(yī)學(xué)院畜牧獸醫(yī)學(xué)院;
【基金】:海南省社會(huì)發(fā)展科技專項(xiàng)(2015SF29) 國家質(zhì)檢總局科技項(xiàng)目(2013IK031,2013IK051,2015IK089) 重慶市科技計(jì)劃項(xiàng)目(cstc2014yykfA80017) 海南省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)專項(xiàng)項(xiàng)目(ZDXM20130025) 廣東檢驗(yàn)檢疫局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011GDK44,2013GDK04)~~
【分類號(hào)】:S852.61;R378.2
【正文快照】: 海南省社會(huì)發(fā)展科技專項(xiàng)(2015SF29);國家質(zhì)檢總局科技項(xiàng)目(2013IK031,2013IK051,2015IK089);重慶市科技計(jì)劃項(xiàng)目(cstc2014yykfA80017);海南省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)專項(xiàng)項(xiàng)目(ZDXM20130025);廣東檢驗(yàn)檢疫局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011GDK44,2013GDK04)Technology Research and Development

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孫永祥,金以森,毛建勛,陸扁,丁水軍;福氏志賀菌4C亞型生物學(xué)特性研究及ipaH基因檢測[J];中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2005年05期



本文編號(hào):1270400

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