本文關(guān)鍵詞：全反式維甲酸促進多能干細胞向間充質(zhì)干細胞樣細胞分化

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【摘要】：目的探索全反式維甲酸(RA)和SB431542對胚胎干細胞(ES)及誘導多能干細胞(i PS)分化為間充質(zhì)干細胞(MSC)樣細胞的影響。方法將培養(yǎng)的鼠ES和i PS根據(jù)不同的分化條件分為對照組、SB431542組及RA不同濃度組,對照組為達爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基(DMEM)完全培養(yǎng)基,SB431542組為DMEM完全培養(yǎng)基中含10μmol·L-1SB431542,RA不同濃度組的DMEM中分別含0.05、0.10、0.20、0.40 nmol·L-1RA。分化培養(yǎng)4 d后觀察細胞形態(tài),流式細胞術(shù)檢測細胞表面標志物CD105和干細胞抗原1(Sca-1)的表達,以CD105+細胞和Sca-1+細胞的比例確定i PS和ES向MSC分化的程度。結(jié)果小鼠ES和i PS在ESGRO-2i培養(yǎng)基里生長較好。ES分化4 d后,對照組和SB431542組ES和i PS分化成內(nèi)皮樣細胞,在含有不同濃度RA的培養(yǎng)基中ES和i PS可有效分化為纖維狀細胞。ES分化4 d后,SB431542組Sca-1+細胞比例顯著高于對照組(P0.05),CD105+細胞比例與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。在RA 0.05、0.10、0.20、0.40 nmol·L-1RA組中,ES分化的CD105+細胞比例顯著高于對照組和SB431542組(P0.05),Sca-1+細胞比例顯著高于對照組(P0.05),但與SB431542組比較顯著降低(P0.05);0.20 nmol·L-1RA組的CD105+和Sca-1+細胞比例顯著高于0.05、0.10、0.40 nmol·L-1RA組(P0.05)。i PS分化4 d后,SB431542組CD105+細胞和Sca-1+細胞比例顯著高于對照組(P0.05)。0.05、0.10、0.20、0.40 nmol·L-1RA組中,i PS分化的CD105+細胞比例顯著高于對照組和SB431542組(P0.05),Sca-1+細胞比例顯著高于對照組(P0.05),但與SB431542組比較均顯著降低(P0.05);0.20 nmol·L-1RA組Sca-1+細胞比例顯著高于0.05、0.10、0.40 nmol·L-1RA組(P0.05),0.20 nmol·L-1RA組CD105+細胞比例顯著高于0.05、0.10 nmol·L-1RA組(P0.05),但與0.40 nmol·L-1RA組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論利用RA可以促進ES和i PS向MSC樣細胞分化,分化方法較為簡單,分化周期較短,為多能干細胞向MSC樣細胞的分化提供了一定的方法基礎。
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院血液學研究所國家重點實驗室;
【基金】：國家重大科學研究計劃項目(編號:2013CB966904)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cell,MSC)是中胚層來源的具有高度自我更新和多向分化潛能的多能干細胞,有向損傷組織定向遷移,促進損傷修復、免疫抑制、抗炎及神經(jīng)營養(yǎng)等功能[1-3],是細胞替代治療和組織工程的首選種子細胞,但其獲得資源有限。多能干細胞包括胚胎干細胞(embry

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