骨痹合劑對去雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠膝骨性關節(jié)炎模型CollagenX、Aggrecan作用觀察
發(fā)布時間:2017-12-09 04:07
本文關鍵詞:骨痹合劑對去雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠膝骨性關節(jié)炎模型CollagenX、Aggrecan作用觀察
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【摘要】:目的:建立一種與人類膝關節(jié)骨性關節(jié)炎發(fā)病過程相似的去雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠膝骨性關節(jié)炎模型,在此模型成功的基礎上,觀察骨痹合劑對該模型Collagen X、Aggrecan表達的影響。 方法:選擇48只10天齡SD幼鼠,隨機分為正常對照組、直立組、直立聯(lián)合假Hulth組、直立聯(lián)合Hulth組(共4組,每組12只)。正常對照組不做任何處理;其余三組在腹腔麻醉下去除雙前肢,手術后置于原母鼠飼養(yǎng)籠內飼養(yǎng)。直立聯(lián)合假Hulth組在去除雙前肢四個月后行假Hulth手術;直立聯(lián)合Hulth組在去除雙前肢四個月后行Hulth手術。四個組在第二次手術后1個月,腹腔麻醉下處死,取下四組的膝關節(jié),通過固定、脫鈣、脫水、包埋、切片、撈片、烤片,行HE染色、甲苯胺藍染色、藏紅固綠染色及免疫組化觀察分析。在評價模型成功的基礎上,再選擇52只10天齡SD幼鼠,在腹腔麻醉下去除雙前肢,術后置于原母鼠飼養(yǎng)籠內飼養(yǎng),去除雙前肢后四個月行Hulth手術,在Hulth手術后1個月時隨機分為空白對照組、骨痹合劑組、氨糖美辛組、生理鹽水組(共4組,每組13只),每組處死3只,評價模型,在模型成功的基礎上,骨痹合劑組按0.5ml/100g體重給予骨痹合劑灌胃;氨糖美辛組按2mg/100g體重給予氨糖美辛(溶于同體積的生理鹽水里)灌胃;生理鹽水組按0.5ml/100g體重給予生理鹽水灌胃;空白對照組不做任何干預,連續(xù)灌胃給藥4周后,麻醉處死相對應的各組大鼠,取下膝關節(jié)通過固定、脫鈣、脫水、包埋、切片、撈片、烤片,行HE染色、甲苯胺藍染色、藏紅固綠染色及免疫組化觀察分析。 結果:組織形態(tài)學觀察正常對照組HE染色、甲苯胺藍染色、藏紅固綠染色顯示關節(jié)軟骨表層光滑、平整,軟骨細胞分布均勻,排序整齊,各層次清晰。直立組、去雙前肢聯(lián)合假Hulth組、直立聯(lián)合Hulth組顯示關節(jié)面軟骨表層潰瘍或裂隙,甚至出現(xiàn)局部缺損,軟骨細胞數(shù)量明顯減少,軟骨層染色不均,局部出現(xiàn)失染現(xiàn)象;關節(jié)各層軟骨細胞出現(xiàn)簇集樣生長,深層可見肥大軟骨細胞;尤以直立聯(lián)合Hulth組最為明顯。通過各組藥物干預,與正常對照組、生理鹽水組比較,骨痹合劑組、氨糖美辛組的關節(jié)軟骨表層較光滑、平整,關節(jié)表面較連續(xù),軟骨細胞分布較均勻,排序較整齊,各層次較清晰,無明顯細胞簇集現(xiàn)象,潮線較完整,局部染色較均勻。 結論:成功建立了去雙前肢直立、去雙前肢直立聯(lián)合假Hulth、去雙前肢直立聯(lián)合Hulth三種模型,其中去雙前肢直立聯(lián)合Hulth模型膝關節(jié)退變更為典型,此模型制作簡便,可重復性強,與人類直立狀態(tài)膝骨性關節(jié)炎發(fā)病機制相似,,可為進一步研究膝骨性關節(jié)炎發(fā)病機制及開發(fā)有效治療措施奠定了基礎。骨痹合劑可延緩去雙前肢直立聯(lián)合Hulth模型軟骨退變狀態(tài),可通過上調細胞外基質Aggrecan表達、下調Collagen X表達,延緩膝骨性關節(jié)炎軟骨的退變進程。
【學位授予單位】:云南中醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R274.9;R-332
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條
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本文編號:1269002
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