本文關(guān)鍵詞：bFGF（堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子）真核表達(dá)載體的構(gòu)建

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【摘要】：目的：人體受到外傷以后尤其是手外科和創(chuàng)傷骨科造成的外傷中的開放性傷口是毀滅性，神經(jīng)斷裂、血管壞死、韌帶撕裂、肌肉壞死等等，手術(shù)治療能解決神經(jīng)的重建術(shù)、血管的移植術(shù)、韌帶修復(fù)術(shù)、為防止肌肉的壞死或者感染外傷處防止VSD負(fù)壓引流術(shù)，這些方面能解決開放性傷口很大的醫(yī)學(xué)治療性，但是對(duì)于術(shù)后患者恢復(fù)則是有很多局限性，所以對(duì)于上述的臨床難題一直是學(xué)者或者研究人員不斷探索我研究的重點(diǎn)，也是醫(yī)學(xué)界未解決的諸多事件之一。由于科技不斷的進(jìn)展及人類醫(yī)學(xué)的進(jìn)步包括手術(shù)后對(duì)神經(jīng)重建術(shù)后的恢復(fù)，韌帶修復(fù)術(shù)的加強(qiáng)，血管移植術(shù)后的血管強(qiáng)化，這些年來(lái)人們都這些研究取得了很多的進(jìn)步，也從本身的基礎(chǔ)上有了更加深刻的認(rèn)識(shí)。這樣的話應(yīng)用臨床指導(dǎo)或者驗(yàn)證臨床效果有很多的促進(jìn)作用。相應(yīng)的是由于諸多因素的影響及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)顯微技術(shù)的進(jìn)展速度限制，，周圍神經(jīng)損傷的術(shù)后尤其是針對(duì)外傷后神經(jīng)損傷銳器損傷的話神經(jīng)修復(fù)相對(duì)后期修復(fù)來(lái)說(shuō)是恢復(fù)率及功能上有較好的效果。若是磨損性的神經(jīng)挫斷行神經(jīng)縫合后神經(jīng)遠(yuǎn)端及神經(jīng)元的修復(fù)和后期恢復(fù)率上效果一般，所以對(duì)于神經(jīng)、血管、軟骨細(xì)胞以及對(duì)患者的恢復(fù)問(wèn)題是外科系統(tǒng)非常重視的問(wèn)題。 堿性成纖維生長(zhǎng)細(xì)胞（簡(jiǎn)稱bFGF）:由于當(dāng)初醫(yī)學(xué)的局限性，bFGF為1974年首次從牛神經(jīng)細(xì)胞中純化而來(lái)，隨著顯微醫(yī)學(xué)的不斷進(jìn)展證實(shí)促進(jìn)細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)作用的是很強(qiáng)的對(duì)肽因子，而且這個(gè)進(jìn)步有很大的生物學(xué)作用，對(duì)多種細(xì)胞包括神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分行及神經(jīng)修復(fù)有很大的影響，并且在生理及病理中發(fā)揮一定的作用。它也是手外科、創(chuàng)傷骨科、周圍外科領(lǐng)域中的信號(hào)調(diào)節(jié)因子之一，對(duì)神經(jīng)元修復(fù)及神經(jīng)細(xì)胞有促進(jìn)作用。且它在周圍神經(jīng)損傷后，遠(yuǎn)端軸突和近端神經(jīng)元胞體所發(fā)生的一系列反應(yīng)。包括生長(zhǎng)錐形成延伸、選擇性粘附、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子上調(diào)、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)遞質(zhì)合成、神經(jīng)元重塑、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞外基質(zhì)作用等方面。 本實(shí)驗(yàn)的目的：通過(guò)顯微醫(yī)學(xué)技術(shù)進(jìn)行體外培養(yǎng)bFGF基因形成真核表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程，為下一步實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)染培養(yǎng)BMSCs提供可靠的實(shí)驗(yàn)學(xué)素材。 方法：（1）通過(guò)體外培養(yǎng)細(xì)胞再用RT-PCR獲得bFGF的cDNA； （2）將連于bFGF基因片段的表達(dá)載體構(gòu)建過(guò)程，通過(guò)實(shí)驗(yàn)方法觀測(cè)其生理或者微量元素的表達(dá)及活躍性。為下一步實(shí)驗(yàn)的轉(zhuǎn)染打下良好的實(shí)驗(yàn)學(xué)素材和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 結(jié)果：（1）成功獲取bFGF的cDNA基因片段；（2）成功獲取了穩(wěn)定表達(dá)bFGF的構(gòu)建過(guò)程，并通過(guò)RT-PCR技術(shù)、Westernblot進(jìn)行了鑒定。 研究理論：通過(guò)體外培養(yǎng)細(xì)胞bFGF基因形成真核表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程，為下一步實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)染培養(yǎng)BMSCs提供可靠的實(shí)驗(yàn)學(xué)素材，為進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R3416

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 路艷蒙,傅文玉,樸英杰,喬?hào)|訪,安連兵;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)[J];電子顯微學(xué)報(bào);2002年04期

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3 戴文達(dá);方濤林;李熙雷;林紅;董健;陳崢嶸;;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)、多向分化與鑒定[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

本文編號(hào)：1264738