本文關(guān)鍵詞：江蘇省部分地區(qū)尿道致病性大腸桿菌（UPEC）分子流行病學(xué)調(diào)查與致病性研究

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【摘要】：尿道感染(urinary tract infections, UTIs)是人類常見疾病,大部分女性一生中至少經(jīng)歷一次泌尿道感染。迄今為止,尿道致病性大腸桿菌(uropathogenic Escherichia coli, UPEC)是所有泌尿道感染中最常見的病原體。UPEC通過(guò)攜帶特定的毒力因子黏附并侵入宿主,突破宿主自身天然的免疫防御系統(tǒng),引起某些組織損傷和炎性反應(yīng)。UPEC在腸道外的生存能力使得它們能導(dǎo)致包括泌尿道感染在內(nèi)的多種疾病。我國(guó)對(duì)UPEC的研究還處于初步階段,相關(guān)的流行病學(xué)資料比較缺乏,給由UPEC引起的泌尿道感染以及混合性尿道感染的防治帶來(lái)了困難。本課題旨在收集江蘇省部分地區(qū)UPEC分離株的基礎(chǔ)上,了解本地區(qū)UPEC的分子流行病學(xué)情況,為深入研究該病的致病機(jī)理和防制措施奠定基礎(chǔ)。 本研究自2011年9月起至2012年9月止,總共從江蘇省部分地區(qū)尿道感染臨床病例中分離、鑒定出183株UPEC分離株。并且通過(guò)一系列分子生物學(xué)方法,對(duì)UPEC分離株的血清型、種系發(fā)生型、毒力基因作了研究。研究發(fā)現(xiàn)分離菌株中最常見的血清型為O1,其它主要血清型還有O6、O12、O15、O26、O74和075；種系發(fā)生型中,D和B2型最為常見,分別占分離株的41%和30%,而A和B1型分別占17%和12%。 本課題并未對(duì)所有的毒力基因進(jìn)行檢測(cè),而是選取了14個(gè)和UPEC致病性密切相關(guān)的毒力基因。在受檢的14個(gè)毒力基因中,tonB和dsdA的檢出率最高,分別為98%和97%。degP、ompR和fimH的檢出率也在90%以上；某些毒力基因如fliC、neuC、ireA、vat,在UPEC菌株中的檢出率不高于23%。在分離到的183株UPEC菌株中,受檢毒力基因數(shù)量在10個(gè)以上的總計(jì)有56株(30.6%),在5個(gè)以下的總計(jì)有9株(4.9%),介于兩者之間的為118株(64.5%)。 根據(jù)國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道,本文分析O血清型、種系發(fā)生分型、毒力基因數(shù)量之間的相互關(guān)系,選擇常見血清型O1(S128、S22)、O4(S33)、O75(S85)菌株和非常見血清型江蘇地區(qū)流行菌株O15(S73)、O26(Y19)、O74(S100)在1日齡雛雞、21日齡SPF雞動(dòng)態(tài)分布試驗(yàn)、6-8周齡BALB/c小鼠的致病性進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)： 1日齡雛雞致死性試驗(yàn)結(jié)果表明：E058、U17接種雞在24h內(nèi)死亡率達(dá)到100%。常見血清型菌株S33(04)、S100在24h內(nèi)死亡率同樣達(dá)到100%；S58、S128(O1)在第2d死亡率達(dá)到100%;S85(075)在第3d雞全部死亡。而非常見血清型菌株S100(074)在24h內(nèi)死亡率同樣達(dá)到100%,S58(074)在第2d雞全部死亡,Y19(026)僅在第2d引起2羽1日齡雛雞的死亡；S73僅在第3d造成1羽雛雞的死亡。其他菌株S22(O4)、 S19(O15)、S51(O19)及陰性對(duì)照組均未導(dǎo)致雞的死亡。 21日齡SPF雞動(dòng)態(tài)分布結(jié)果表明：與高致病性菌株U17相比,UPEC分離株常見血清型S33(04)的動(dòng)態(tài)分布結(jié)果與U17差異不顯著(P0.05)；S128(01)除肝、腎外,其他臟器中的動(dòng)態(tài)分布結(jié)果也顯著或極顯著低于U17,但與E058菌株差異不顯著(P0.05)。同屬01血清型的S22菌株則表現(xiàn)為極低或無(wú)致病力；S85(075)的動(dòng)態(tài)分布結(jié)果與U17相比差異極顯著(P0.001),說(shuō)明S85致病性極顯著低于U17,同時(shí)與E058相比也有明顯差異。而非常見血清型江蘇地區(qū)流行菌株S100(074)、S73(O15)、Y19(O26),總體來(lái)說(shuō)與U17差異極顯著,但S100比其他兩菌株在各個(gè)臟器的帶菌量上略表現(xiàn)更高的致病力。病理切片結(jié)果表明,某些高致病性菌株(如U17、S33)表現(xiàn)出大腸桿菌腸道外感染的典型病理變化,心外膜增厚,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和細(xì)菌增殖等。 6-8周齡BALB/c小鼠感染模型中,與高致病性菌株U17相比,結(jié)合尿液、膀胱和腎臟中的細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果,初步表明常見血清型S33菌株比U17致病性更強(qiáng),而非常見血清型S73菌株致病性較弱或無(wú)致病力。根據(jù)病理切片分析,所有UPEC分離菌株都不能導(dǎo)致6-8周齡BALB/c小鼠全身性感染,即心臟、肝臟、脾臟、肺臟未出現(xiàn)任何病理性變化。泌尿系統(tǒng)相關(guān)臟器腎臟、輸尿管亦正常,與國(guó)外報(bào)道的情況相符。但是某些強(qiáng)毒力菌株(如u17、S33、S128)可導(dǎo)致膀胱固有層毛細(xì)血管擴(kuò)張充血,組織結(jié)構(gòu)疏松,可見程度不等的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。 綜上所述,常見血清型04(S33)致病性較U17更強(qiáng),01血清型的S128菌株與U17相比致病性相當(dāng),而同屬于01血清型的S22菌株致病性較弱,在一定程度上反映了毒力基因數(shù)量的多少和致病性的強(qiáng)弱之間存在一定的正相關(guān)關(guān)系。同時(shí),非常見血清型江蘇地區(qū)流行菌株074(S100)亦具有一定的致病性,與常見血清型075(S85)致病性無(wú)差異,而015(S73)、026(Y19)血清型菌株致病性較弱或無(wú)致病力。
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R378

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳祥,高崧,王雷,焦新安,劉秀梵;華東地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的O血清型和毒力因子[J];微生物學(xué)報(bào);2004年01期

2 高崧,劉秀梵,張如寬,焦新安,文其乙,吳長(zhǎng)新,唐一鳴,朱曉波,李琮,陳娟,崔力兵,崔洪平;我國(guó)部分地區(qū)禽病原性大腸桿菌的分離與鑒定[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);1999年02期

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本文編號(hào)：1264051