維生素C提高體外培養(yǎng)的去分化脂肪細(xì)胞心肌分化效率
發(fā)布時(shí)間:2017-11-17 18:02
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【摘要】:目的:采用維生素C處理體外培養(yǎng)的去分化脂肪(dedifferentiated fat,DFAT)細(xì)胞,以期進(jìn)一步提高DFAT細(xì)胞的心肌分化效率。方法:用天花板貼壁培養(yǎng)法使大鼠成熟脂肪細(xì)胞去分化為DFAT細(xì)胞,并體外培養(yǎng)增殖至第3代,然后在培養(yǎng)基中添加維生素C或(和)乳鼠心臟細(xì)胞裂解液誘導(dǎo)DFAT細(xì)胞心肌分化。3周后,用倒置相差顯微鏡觀察DFAT細(xì)胞的形態(tài)變化,用real-time PCR、免疫熒光和Western blot檢測(cè)DFAT細(xì)胞的心肌特異性標(biāo)志物c Tn T、GATA-4及NKx2.5 mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果:大鼠脂肪細(xì)胞經(jīng)天花板貼壁培養(yǎng)后形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槌衫w維細(xì)胞樣的DFAT細(xì)胞。DFAT細(xì)胞在普通培養(yǎng)條件下可自發(fā)表達(dá)少量心肌特異性標(biāo)志物。經(jīng)乳鼠心臟細(xì)胞裂解液誘導(dǎo)后,DFAT細(xì)胞體積增大、變長(zhǎng),可見肌管樣結(jié)構(gòu),c Tn T、GATA-4及NKx2.5 mRNA和蛋白的表達(dá)水平較普通培養(yǎng)的DFAT細(xì)胞顯著升高。在維生素C的作用下,DFAT細(xì)胞c Tn T、GATA-4及NKx2.5的表達(dá)水平進(jìn)一步升高。未觀察到自發(fā)性搏動(dòng)細(xì)胞。結(jié)論:維生素C可促進(jìn)DFAT細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞。
【作者單位】: 貴州省心血管病研究所;貴州省人民醫(yī)院心內(nèi)科;貴州省人民醫(yī)院病理科;
【基金】:貴州省科技廳科學(xué)技術(shù)基金資助項(xiàng)目(No.黔科合J字[2014]2112) 貴州省衛(wèi)生廳科學(xué)技術(shù)基金資助項(xiàng)目(No.gzwkj2013-1-006)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 急性心肌梗死已成為嚴(yán)重危害我國(guó)人民生命健康的重要疾病[1]。雖然藥物及介入治療有了長(zhǎng)足進(jìn) 展[2],但這些方法不能再生心肌以代償損失心肌的培養(yǎng)瓶,將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中進(jìn)行天收縮力,限制了心功能的恢復(fù)。因此,心肌梗死患者花板培養(yǎng)(37℃、5%CO2、飽和濕度)。用
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條
1 呂學(xué)祥;曾秋棠;;心肌細(xì)胞裂解液誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞的分化作用[J];臨床心血管病雜志;2008年03期
2 陳家歡;魏育蕾;彭莎;王華巖;;豬羊水干細(xì)胞特異向跳動(dòng)心肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化[J];生物工程學(xué)報(bào);2011年08期
3 黃榕,
本文編號(hào):1196867
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