本文關(guān)鍵詞：IL-17及JAK抑制劑AG490對(duì)泡沫化巨噬細(xì)胞ABCA1表達(dá)的影響

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【摘要】：目的: 白介素-17（Interleukin-17，IL-17）是新近發(fā)現(xiàn)的一個(gè)促炎癥細(xì)胞因子，具有致動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）的作用，酪氨酸蛋白激酶-信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子（Janus kinase signal transducers and activators of transcription，JAKs-STATs）是其發(fā)揮作用的途徑之一。三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1（ATP-binding cassette transporter，ABCA1）在細(xì)胞中的主要作用為促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)膽固醇運(yùn)輸和減少細(xì)胞內(nèi)的炎癥因子。雙面神激酶（Janus kinase，JAK）抑制劑2-氰基-3-(3，4-二羥基苯基)-N-(苯甲基)-2-丙烯酰胺(2-cyano-3-(3，4-dihydroxyphenyl)-N-(phenylmethyl)-2-propenamide，AG490)為JAK抑制劑，能阻斷JAKs-STATs信號(hào)通路。本文通過(guò)觀察IL-17及AG490對(duì)泡沫化巨噬細(xì)胞ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)情況，探討IL-17及AG490對(duì)泡沫化巨噬細(xì)胞的作用。 方法: 1.檢測(cè)IL-17對(duì)泡沫化巨噬細(xì)胞ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)情況：THP-單核（Thp-1monocyte，THP-1）細(xì)胞經(jīng)佛波酯（phorbol12-myristate13-acetate，PMA）（100nmol/L）誘導(dǎo)24h-48h形成巨噬細(xì)胞，經(jīng)氧化低密度脂蛋白（oxidizedlow density lipoprotein，ox-LDL）(50μg/mL)泡沫化后建立巨噬細(xì)胞泡沫化模型，油紅O乙醇染液鑒定泡沫化巨噬細(xì)胞。上述泡沫化巨噬細(xì)胞中分別加入IL-17（100ng/mL），不同時(shí)間點(diǎn)（0h，6h，12h，24h）收取細(xì)胞，分別提取RNA及蛋白，RT-PCR、Western blotting檢測(cè)ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)。上述泡沫化巨噬細(xì)胞中加入IL-17(0ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），24h后收取細(xì)胞，分別提取RNA及蛋白，RT-PCR、Western blotting檢測(cè)ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)。 2.檢測(cè)JAK抑制劑AG490與IL-17對(duì)泡沫化巨噬細(xì)胞ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)情況: IL-17（100ng/mL）及AG490（0umol/L、10umol/L、20umol/L、30umol/L）共處理泡沫化巨噬細(xì)胞24h后收取細(xì)胞，分別提取RNA及蛋白，RT-PCR、Western blotting檢測(cè)ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)。 結(jié)果: 1.THP-1細(xì)胞呈圓形，，懸浮生長(zhǎng)，經(jīng)PMA（100nmol/L）誘導(dǎo)24h-48h后成為梭形的貼壁巨噬細(xì)胞，并伸出偽足，ox-LDL(50μg/mL)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞形成泡沫化巨噬細(xì)胞，其特征為脂質(zhì)成份增多，聚集成滴，能被油紅O乙醇染液染成紅色。 2.隨著泡沫化巨噬細(xì)胞中IL-17濃度的增加（0ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），RT-PCR、Western blotting檢測(cè)ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)隨著IL-17濃度增加而減少（p＜0.05），隨著泡沫化巨噬細(xì)胞中IL-17作用時(shí)間的延長(zhǎng)（0h、6h、12h、24h），RT-PCR、Western blotting檢測(cè)ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)隨IL-17作用時(shí)間增加而減少（p＜0.05）。 3.JAK抑制劑AG490與IL-17（100ng/mL）共同處理泡沫化巨噬細(xì)胞后，RT-PCR、Western blotting檢測(cè)ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)隨著泡沫化巨噬細(xì)胞中AG490濃度增加（0umol/L、10umol/L、20umol/L、30umol/L）而增加（p＜0.05）。 結(jié)論: 1.通過(guò)ox-LDL誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞能夠成功構(gòu)建巨噬細(xì)胞泡沫化模型。 2.IL-17能夠減少泡沫化巨噬細(xì)胞ABCA1mRAN及蛋白的表達(dá)，并呈時(shí)間和濃度依賴(lài)性。 3.AG490能夠減弱IL-17對(duì)泡沫化巨噬細(xì)胞ABCA1mRNA及蛋白的表達(dá)，提示IL-17可能通過(guò)JAKs-STATs信號(hào)通路影響ABCA1表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李帥;黃健;;ABCAl介導(dǎo)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)的機(jī)制及其信號(hào)傳導(dǎo)通路研究進(jìn)展[J];華夏醫(yī)學(xué);2011年01期

2 趙國(guó)軍;唐朝克;;ApoA-Ⅰ與ABCA1結(jié)合激活信號(hào)通路并介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出[J];中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志;2011年04期

3 方正旭;朱亮;李鳴媛;王伶;劉東;程曉曙;;AG490對(duì)凝血酶誘導(dǎo)VSMCs增殖及Bcl-2表達(dá)的影響[J];南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年03期

4 陳樣新,傅國(guó)勝,聶文成;血清妊娠相關(guān)血漿蛋白-A與急性冠狀動(dòng)脈綜合征的臨床相關(guān)性[J];臨床心血管病雜志;2004年05期

5 王振坤;范永臻;郭志剛;;ABCA1主要調(diào)節(jié)者-核激素受體[J];臨床心血管病雜志;2010年03期

6 李帥;黃健;李紅艷;莫新玲;左曉娜;;NO/PKG對(duì)THP-1巨噬細(xì)胞ABCA1基因mRNA表達(dá)和膽固醇含量的影響[J];臨床心血管病雜志;2011年10期

7 薛偕華;魏偉;陳彤;周曉茂;林志誠(chéng);陳立典;;澤瀉湯對(duì)巨噬細(xì)胞泡沫化脂質(zhì)沉積及其LXRα和ABCA1表達(dá)的影響[J];中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志;2013年11期

8 祁莉萍;嚴(yán)曉偉;葉平;陳連鳳;;ABCA1-565C/T基因多態(tài)性對(duì)心�；颊邅�(lái)源的巨噬細(xì)胞膽固醇外流功能影響及其機(jī)制研究[J];中國(guó)全科醫(yī)學(xué);2010年13期

9 李建華;楊永紅;吳平生;郭志剛;;血管平滑肌細(xì)胞中ABCA1對(duì)炎癥因子的調(diào)節(jié)及其意義[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2010年10期

10 黃偉彬;呂磊;張嵐;;JAK/STAT信號(hào)通路在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年04期

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1 來(lái)超;白介素-17在頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄動(dòng)物模型中的表達(dá)[D];山東大學(xué);2011年

本文編號(hào)：1161215