發(fā)布時(shí)間：2017-10-20 13:12

  本文關(guān)鍵詞：抗LAMP2單克隆抗體的制備及初步鑒定

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【摘要】：目的：通過制備免疫肽段并免疫BALB/c小鼠來制備抗LAMP2單克隆抗體，并對(duì)抗體進(jìn)行初步鑒定。 方法：（1）用博奧森LAMP2蛋白，并將此多肽分別連接鑰孔戚血藍(lán)素（簡稱：peptide-KLH）或牛血清蛋白（簡稱：peptide-BSA）；（2）以peptide-KLH作為抗原免疫BALB/c小鼠；（3）取血清效價(jià)大于1：10000的小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞SP2/0進(jìn)行融合，以peptide-BSA包被，通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測雜交瘤細(xì)胞的上清進(jìn)行篩選；用有限稀釋法進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的克隆化；（4）單克隆抗體的大量制備是通過腹腔注射雜交瘤細(xì)胞而獲得；（5）用鼠單克隆抗體亞類分型試劑盒鑒定抗體的亞類，，免疫組化方法表明制備的單克隆抗體能識(shí)別LAMP2蛋白。 結(jié)果：得到一株能穩(wěn)定分泌抗-LAMP2單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；應(yīng)用免疫組化方法表明制備的抗-LAMP2的單克隆抗體能識(shí)別LAMP2抗原；此單克隆抗體的亞類為IgG2a/κ。 結(jié)論：已獲得的雜交瘤細(xì)胞株能穩(wěn)定分泌目的單克隆抗體；免疫組化方法表明制備的單克隆抗體能識(shí)別LAMP2抗原，為更深入地研究LAMP2及其各亞型的生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ)，也為實(shí)驗(yàn)室后期制備LAMP2抗原的ELISA試劑盒準(zhǔn)備了條件。
【關(guān)鍵詞】：LAMP2 多肽 單克隆抗體
【學(xué)位授予單位】：延安大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 引言8-15
• 材料和方法15-23
• 結(jié)果23-25
• 討論25-26
• 結(jié)論26-27
• LAMP2 的最新研究進(jìn)展27-32
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 自噬與腫瘤32-37
• 參考文獻(xiàn)35-37
• 致謝37-38
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章38

【共引文獻(xiàn)】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 董志武;血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬的調(diào)控及膜聯(lián)蛋白A7促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞自噬作用的研究[D];山東大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 朱宇;抑制自噬對(duì)壓力超負(fù)荷大鼠心肌肥厚以及心臟收縮功能的影響[D];蘇州大學(xué);2009年

本文編號(hào)：1067330