本文關鍵詞：抗苗勒管激素（AMH）在三種多囊卵巢綜合征（PCOS）大鼠模型中的變化及相關性分析

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【摘要】：多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)為育齡期女性常見內(nèi)分泌疾病,發(fā)病率6-10%,以持續(xù)性排卵障礙、高雄激素血癥、卵巢多囊化為特征�？姑缋展芗に�(Anti-mullerian Hormone, AMH),又稱苗勒管抑制素(Mullerian inhibiting substance, MIS),是轉化生長因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)超家族成員之一。AMH在卵巢中由卵巢顆粒細胞分泌,在卵泡生長發(fā)育過程中具有抑制卵泡募集和FSH誘導的卵泡生長的作用。PCOS患者血清AMH較正常女性升高2-3倍,因臨床取材困難,因此尋找合適的動物模型對于研究AMH在PCOS中的作用具有重要意義。目前國內(nèi)外存在的PCOS動物模型多種多樣,造模所用動物及造模方法各不相同,各種模型或在內(nèi)分泌方面,或在形態(tài)學方面與PCOS有相似之處,本實驗目的在于探討AMH在三種常用大鼠PCOS模型中的變化情況并分析AMH與其它指標之間的相關性,為后續(xù)研究AMH在PCOS發(fā)生發(fā)展中的作用提供動物模型基礎。第一部分：AMH在來曲唑大鼠PCOS模型中的變化及相關性分析目的：采用來曲唑灌胃方法進行造模,根據(jù)PCOS Rotterdam2003診斷標準對模型進行評價,對模型進行特點分析,并研究AMH在模型中的變化情況及與其它指標的相關性。方法：選取6周齡雌性SD大鼠,來曲唑灌胃造模,觀察大鼠陰道涂片觀察性周期變化,記錄大鼠體重變化,測量大鼠雙側離體卵巢濕重及體積,利用ELISA法檢測大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、胰島素(INS), AMH。對卵巢行石蠟切片行HE染色光鏡觀察其病理學改變,免疫組化及western blot檢測AMH及AMH-RⅡ蛋白表達情況,并用統(tǒng)計學軟件統(tǒng)計分析模型特點。結果：來曲唑模型組表現(xiàn)出明顯的雄激素、LH升高,孕酮降低以及卵巢多囊性改變,囊性擴張卵泡數(shù)和總卵泡數(shù)明顯大于對照組。此外,模型組大鼠體重、卵巢濕重及卵巢體積也明顯大于對照組。血清AMH及卵巢組織局部AMH、AMH-RⅡ的表達均升高。血清抗苗勒管激素與雄激素、生長卵泡數(shù)呈正相關,與體重呈負相關。結論：來曲唑模型組采用成年大鼠造模,模型表現(xiàn)出明顯的體重增加,卵巢體積及濕重增加,并有胰島素抵抗表現(xiàn),根據(jù)Rotterdam診斷標準為成功的PCOS模型。相關性分析顯示血清抗苗勒管激素的升高可能由于雄激素相關的生長卵泡增多引起。第二部分：AMH在炔諾酮hCG大鼠PCOS模型組中的變化及相關性分析目的：采用18-甲基炔諾酮聯(lián)合hCG法對大鼠進行造模,根據(jù)Rotterdam診斷標準對模型進行評價,對模型進行特點分析,并研究AMH在模型中的變化情況及與其它指標的相關性。方法：選取23日齡雌性SD大鼠,皮下埋植18-甲基炔諾酮避孕硅膠棒,皮下注射hCG。觀察大鼠陰道口開放日齡,大鼠陰道涂片觀察性周期變化,記錄大鼠體重變化、大鼠雙側離體卵巢濕重及體積,利用ELISA法檢測大鼠血清中相關激素水平,對卵巢行石蠟切片行HE染色光鏡觀察其病理學改變,免疫組化及western blot檢測AMH及AMH-RII蛋白表達情況,并用統(tǒng)計學軟件統(tǒng)計分析模型的特點。結果：模型組較對照組相比雄激素明顯升高,卵巢多囊性改變明顯,卵巢濕重及卵巢體積明顯增大,但模型組大鼠體重較對照組無明顯增加。AMH及其受體在卵巢組織局部表達增高,未發(fā)現(xiàn)AMH與其它指標之間明顯相關性。結論：炔諾酮hCG模型組采用幼齡大鼠造模,雄激素升高,卵巢多囊性改變明顯,符合Rotterdam2003診斷標準,為成功的PCOS大鼠模型。AMH在卵巢局部組織高表達機制有待進一步研究第三部分：AMH在硫酸普拉睪酮鈉hCG大鼠PCOS模型組中的變化及相關性分析目的：采用硫酸普拉睪酮鈉聯(lián)合hCG法對大鼠進行造模,根據(jù)Rotterdam診斷標準評價模型,對模型進行特點分析,并研究AMH在模型中的變化情況及與其它指標的相關性。方法：選取23日齡雌性SD大鼠,每天皮下注射硫酸普拉睪酮鈉和hCG,觀察大鼠陰道口開放日齡,大鼠陰道涂片觀察性周期變化,記錄大鼠體重變化,測量大鼠雙側離體卵巢濕重及體積,利用ELISA法檢測大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、胰島素(INS),觀察卵巢病理學改變,免疫組化及western blot檢測AMH及AMH-RII蛋白表達情況,并用統(tǒng)計學軟件統(tǒng)計分析模型特點。結果：硫酸普拉睪酮鈉hCG模型組卵巢體積明顯增加,病理切片顯示有卵巢多囊性改變,但在激素方面僅表現(xiàn)出孕酮降低,其他激素方面的表現(xiàn)不明顯。卵巢組織局部AMH及AMH-RⅡ表達增高,但血清AMH較對照組相比無明顯改變。血清AMH與大鼠體重及生長卵泡數(shù)均呈正相關。結論：硫酸普拉睪酮鈉hCG模型與人類PCOS表現(xiàn)差異較大,作為PCOS模型來說穩(wěn)定性及重復率低。AMH的增高可能由于生長卵泡增多所致。第四部分：總結討論
【關鍵詞】：多囊卵巢綜合征 抗苗勒管激素 來曲唑 大鼠 模型 多囊卵巢綜合征 18-甲基炔諾酮 抗苗勒管激素 大鼠 模型 多囊卵巢綜合征 抗苗勒管激素 硫酸普拉睪酮鈉 大鼠 模型
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R711.75;R-332
【目錄】：

• 縮略詞表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-15
• 第一部分：AMH在來曲唑大鼠PCOS模型中的變化及相關性分析15-29
• 引言15-16
• 材料與方法16-24
• 結果24-27
• 討論27-29
• 第二部分：AMH在炔諾酮&hCG大鼠PCOS模型中的變化及相關性分析29-36
• 引言29
• 材料與方法29-31
• 結果31-34
• 討論34-36
• 第三部分：AMH在硫酸普拉睪酮鈉&hCG大鼠PCOS模型中的變化及相關性分析36-42
• 引言36
• 材料與方法36-38
• 結果38-40
• 討論40-42
• 第四部分：總結討論42-45
• 參考文獻45-50
• 全文小結50-51
• 在讀期間發(fā)表的學術論文及研究成果51-52
• 綜述52-59
• 參考文獻56-59
• 致謝59-60

【共引文獻】

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 徐玉芬;生精湯去多糖處理對PCOS大鼠促排卵作用的實驗研究[D];浙江中醫(yī)藥大學;2010年

2 劉艷麗;來曲唑法和脫氫表雄酮法誘導PCOS大鼠模型的比較研究[D];鄭州大學;2011年

3 汪宇;鈣網(wǎng)質蛋白和半乳凝素-3在多囊卵巢綜合征大鼠子宮內(nèi)膜的表達及意義[D];內(nèi)蒙古醫(yī)學院;2011年

4 焦楠;化痰祛瘀補腎法治療肥胖型多囊卵巢綜合征的臨床觀察[D];北京中醫(yī)藥大學;2012年

5 王萍;肥胖型多囊卵巢綜合征患者軀體、心理、社會功能特征分析[D];南京醫(yī)科大學;2012年

6 馬蘭;基于形態(tài)學途徑探討中藥治療多囊卵巢綜合征不孕的作用機制[D];北京中醫(yī)藥大學;2013年

7 朱文麗;網(wǎng)膜素-1在多囊卵巢綜合征大鼠中的表達及二甲雙胍的干預作用[D];河北醫(yī)科大學;2013年

8 林潔;Irisin蛋白在多囊卵巢綜合征大鼠代謝中的作用研究[D];福建醫(yī)科大學;2014年

9 彭穎潔;加味二陳湯配合埋線對肥胖型多囊卵巢綜合征患者胰島素抵抗的影響[D];山東中醫(yī)藥大學;2014年

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本文編號：1064003