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脂筏微域內(nèi)CD59趨引CBP蛋白介導(dǎo)T細(xì)胞下游信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-10-17 22:25

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【摘要】:目的探討Cbp(Csk-binding protein)在Jurkat細(xì)胞中的過表達(dá)對(duì)其生物學(xué)功能的作用以及GPI錨定蛋白CD59通過Cbp對(duì)細(xì)胞的效應(yīng)機(jī)制。方法構(gòu)建Cbp-EGFP慢病毒載體,轉(zhuǎn)染建立穩(wěn)定的過表達(dá)Cbp-EGFP的Jurkat細(xì)胞株。采用免疫熒光技術(shù),通過共聚焦顯微鏡觀察CD59、Cbp的表達(dá)及定位關(guān)系;檢測CD59抗體刺激前后細(xì)胞的增殖效率及細(xì)胞凋亡情況;Western blot檢測Jurkat細(xì)胞中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白分子的變化。結(jié)果共聚焦顯微鏡下可見CD59、Cbp定位于胞膜上,在抗體刺激后,Cbp組與對(duì)照組均出現(xiàn)明顯的熒光高亮聚集現(xiàn)象。轉(zhuǎn)染Cbp-EGFP后細(xì)胞增殖速率明顯降低(P0.05),而中晚期凋亡現(xiàn)象顯著高于陰性對(duì)照組(P0.05)。CD59單抗作用前后相比,酪氨酸激酶蛋白(Fyn、Lck、ZAP-70)的表達(dá)量均有所下降,而Csk的表達(dá)量增加。結(jié)論 Cbp過表達(dá)能有效抑制Jurkat細(xì)胞的增殖,GPI錨固蛋白CD59可通過Cbp分子調(diào)控細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中重要蛋白酪氨酸激酶的表達(dá),進(jìn)而影響Jurkat細(xì)胞的生物學(xué)活性。
【作者單位】: 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫教研室;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】CD Cbp T淋巴細(xì)胞 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 造血生成細(xì)胞等多種組織細(xì)胞表面廣泛表達(dá)CD59,尤其在淋巴性白血病細(xì)胞表面。CD59分子是一種糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)錨固蛋白[1],其以脂微區(qū)的聚合形式分布在細(xì)胞的表面,它主要的功能是防止補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物(MAC)對(duì)同種或自身細(xì)胞的溶解性破壞[2],

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本文編號(hào):1051382

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