本文關(guān)鍵詞：外源性GM3對(duì)Ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞功能與結(jié)構(gòu)的影響

  更多相關(guān)文章： 神經(jīng)節(jié)苷脂GM3 血管內(nèi)皮細(xì)胞 β-環(huán)糊精 細(xì)胞死亡 細(xì)胞鋪展 細(xì)胞遷移

【摘要】：神經(jīng)節(jié)苷脂GM3(ganglioside GM3)是含單個(gè)唾液酸的簡(jiǎn)單的神經(jīng)節(jié)苷脂,在正常的人體細(xì)胞膜上發(fā)揮著重要的作用。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),多種腫瘤和2型糖尿病的病人血清中GM3的濃度很高,此外,眾多證據(jù)表明,動(dòng)脈硬化斑塊中GM3的含量也顯著升高,這種高濃度的GM3對(duì)血管內(nèi)皮層細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能會(huì)產(chǎn)生什么樣的影響呢?目前尚不清楚。血管內(nèi)皮細(xì)胞層的完整性和滲透性等生理功能在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中起著重要作用。而血管內(nèi)皮細(xì)胞的死亡以及新生內(nèi)皮細(xì)胞的貼壁、鋪展和遷移能力對(duì)維持血管內(nèi)皮細(xì)胞的完整性和滲透性發(fā)揮重要作用。本課題首先從外源性的GM3對(duì)正常血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響出發(fā),探究高GM3含量的微環(huán)境對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化形成和發(fā)展的影響；并進(jìn)一步用膽固醇剔除劑來(lái)破壞膜“脂筏”結(jié)構(gòu)來(lái)探討GM3對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生影響的可能機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,外源性GM3能顯著地殺死正常內(nèi)皮細(xì)胞、抑制細(xì)胞鋪展能力、提高其遷移能力,說(shuō)明高GM3微環(huán)境可破壞正常血管內(nèi)皮層的完整性；同以往研究報(bào)道結(jié)果一致,Ox-LDL能夠破壞內(nèi)皮細(xì)胞層的完整性,而外源性GM3能夠加強(qiáng)Ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的作用,表明血管內(nèi)膜中的高GM3含量會(huì)促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展。結(jié)果顯示,用一定濃度的MβCD處理細(xì)胞后,能逆轉(zhuǎn)GM3對(duì)正�；騉x-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞的影響,從而初步解釋了GM3的影響機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)節(jié)苷脂GM3 血管內(nèi)皮細(xì)胞 β-環(huán)糊精 細(xì)胞死亡 細(xì)胞鋪展 細(xì)胞遷移
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 第1章 引言8-18
• 1.1 概述8-9
• 1.2 神經(jīng)節(jié)苷脂的結(jié)構(gòu)和功能9-12
• 1.2.1 神經(jīng)節(jié)苷脂的結(jié)構(gòu)9-10
• 1.2.2 神經(jīng)節(jié)苷脂的功能10-12
• 1.2.2.1 GM3對(duì)正常的血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用研究11
• 1.2.2.2 GM3在病理學(xué)中的作用與研究11-12
• 1.3 低密度脂蛋白的結(jié)構(gòu)與功能的研究12-14
• 1.3.1 低密度脂蛋白的結(jié)構(gòu)12
• 1.3.2 低密度脂蛋白的功能12
• 1.3.3 低密度脂蛋白在氧化后的生物學(xué)特性的改變12-13
• 1.3.4 正常人體內(nèi)氧化型低密度脂蛋白的水平13
• 1.3.5 患者體內(nèi)氧化型低密度脂蛋白的水平13-14
• 1.3.6 氧化型低密度脂蛋白對(duì)正常的血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響14
• 1.4 動(dòng)脈粥樣硬化的形成過(guò)程與原因14-15
• 1.4.1 動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程14
• 1.4.2 動(dòng)脈粥樣硬化的原因14-15
• 1.4.3 Ox-LDL在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中的作用15
• 1.4.4 GM3在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中的作用15
• 1.5 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的生物學(xué)意義15-16
• 1.6 細(xì)胞鋪展的生物學(xué)意義16
• 1.7 細(xì)胞遷移在維持血管內(nèi)皮層完整性中的生理學(xué)意義16-17
• 1.8 展望17-18
• 第2章 外源性GM3對(duì)正常的內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的影響18-34
• 2.1 材料與試劑18
• 2.1.1 材料18
• 2.1.2 主要試劑與儀器18
• 2.1.3 培養(yǎng)基的配制與試驗(yàn)試劑18
• 2.1.3.1 培養(yǎng)基的配制18
• 2.1.3.2 主要試劑的配制18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-23
• 2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇19
• 2.2.2 細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代19
• 2.2.3 細(xì)胞凍存19
• 2.2.4 不同濃度的神經(jīng)節(jié)苷脂GM3對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖的影響19-20
• 2.2.5 神經(jīng)節(jié)苷脂GM3對(duì)細(xì)胞鋪展的影響20-21
• 2.2.5.1 不同的濃度GM3對(duì)細(xì)胞鋪展的影響20
• 2.2.5.2 GM3在不同時(shí)間段和不同濃度血清下對(duì)HUVEC鋪展的影響20-21
• 2.2.5.3 低溫條件下GM3對(duì)細(xì)胞鋪展的影響21
• 2.2.6 不同濃度的GM3對(duì)細(xì)胞遷移的影響21-22
• 2.2.7 mβCD破壞細(xì)胞膜上脂筏后神經(jīng)節(jié)苷脂GM1的熒光分布情況22
• 2.2.8 脂筏破壞后逆轉(zhuǎn)了GM3對(duì)細(xì)胞增殖的影響22-23
• 2.2.9 脂筏破壞后逆轉(zhuǎn)了GM3對(duì)細(xì)胞鋪展的影響23
• 2.3 結(jié)果23-32
• 2.3.1 不同的濃度GM3對(duì)細(xì)胞增殖的影響23-24
• 2.3.2 不同的濃度GM3對(duì)細(xì)胞鋪展的影響24-25
• 2.3.3 GM3對(duì)不同時(shí)間段和不同血清濃度的培養(yǎng)液中的細(xì)胞鋪展的影響25-28
• 2.3.4 低溫處理的GM3對(duì)細(xì)胞鋪展的影響28
• 2.3.5 GM3對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞遷移的影響28-29
• 2.3.6 mβCD破壞細(xì)胞膜上脂筏后神經(jīng)節(jié)苷脂GM1的熒光分布情況29-30
• 2.3.7 脂筏破壞后逆轉(zhuǎn)了GM3對(duì)細(xì)胞增殖的影響30-31
• 2.3.8 脂筏破壞后逆轉(zhuǎn)了GM3對(duì)細(xì)胞鋪展的影響31-32
• 2.4 討論32
• 2.5 小結(jié)32-34
• 第3章 GM3對(duì)Ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能的影響34-44
• 3.1 材料與試劑34
• 3.1.1 材料34
• 3.1.2 主要試劑與儀器設(shè)備34
• 3.1.3 相關(guān)試劑與培養(yǎng)基配制34
• 3.2 試驗(yàn)方法34-39
• 3.2.1 氧化型低密度脂蛋白的制備34-35
• 3.2.2 TBA法鑒定氧化型低密度脂蛋白35-36
• 3.2.3 BCA法測(cè)蛋白濃度36-37
• 3.2.4 mβCD破壞脂筏后攝取Ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響37
• 3.2.5 mβCD破壞脂筏后攝取Ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞鋪展的影響37-38
• 3.2.6 mβCD剔除外源性的GM3后吞噬Ox-LDL對(duì)HUVEC增殖的影響38
• 3.2.7 mβCD剔除外源性的GM3后吞噬Ox-LDL對(duì)HUVEC鋪展的影響38-39
• 3.3 結(jié)果39-42
• 3.3.1 TBA法鑒定氧化型低密度脂蛋白39
• 3.3.2 BCA法測(cè)量蛋白濃度39-40
• 3.3.3 mβCD破壞脂筏后攝取Ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響40
• 3.3.4 mβCD破壞脂筏后攝取Ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞鋪展的影響40-41
• 3.3.5 mβCD剔除外源性的GM3后吞噬Ox-LDL對(duì)HUVEC增殖的影響41
• 3.3.6 mβCD剔除外源性的GM3后吞噬Ox-LDL對(duì)HUVEC鋪展的影響41-42
• 3.4 討論42-43
• 3.5 小結(jié)43-44
• 第4章 討論與建議44-46
• 4.1 討論44-45
• 4.2 建議45-46
• 致謝46-47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 附錄A1 試劑51-52
• 附錄A2 儀器設(shè)備52-53
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 楊涌,徐頌立,劉建濤,魏重琴;神經(jīng)節(jié)苷脂GM_3對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞脂質(zhì)含量的影響[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年03期

2 朱志榮,張偉,郭秀珍;脂蛋白(a)和氧化修飾低密度脂蛋白與冠心病關(guān)系的探討[J];臨床內(nèi)科雜志;1998年01期

，

本文編號(hào)：1027674