本文關(guān)鍵詞：剛地弓形蟲ROP18基因的克隆及生物信息學分析

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【摘要】：目的對剛地弓形蟲RH株的棒狀體蛋白18(TgROP18)基因進行克隆,同時采用生物信息學分析TgROP18蛋白序列。方法提取剛地弓形蟲RH株速殖子總RNA,根據(jù)TgROP18基因(GenBank登陸號為AM075204)的開放閱讀框設(shè)計引物,采用逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)擴增ROP18基因,并對其產(chǎn)物進行測序;采用在線生物軟件預測TgROP18蛋白的結(jié)構(gòu)與功能。結(jié)果 TgROP18基因RT-PCR擴增產(chǎn)物與預期一致,大小為1 665bp;測序分析顯示,ROP18基因序列與GenBank上已發(fā)表的序列完全一致。TgROP18蛋白含有554個氨基酸,分子式為C2753H4405N801O811S20,分子質(zhì)量單位為62.34ku,理論等電點為9.34;在TgROP18蛋白的二級結(jié)構(gòu)中,α-螺旋、β-折、β-轉(zhuǎn)角、無規(guī)則卷曲所占比例分別為41.52%、19.13%、7.76%和31.59%;TgROP18蛋白含有10個親水性較高的區(qū)域(臨界值為2.0),28個表面可及性較高的區(qū)域(臨界值為1.9),10個保守結(jié)構(gòu)區(qū)域,7個翻譯后修飾位點,21個B細胞抗原表位,21個CTL抗原表位及26個Th抗原表位有。結(jié)論生物信息學分析表明,TgROP18蛋白具有良好的免疫原性,這將為弓形蟲疫苗的研究提供基礎(chǔ)資料。
【作者單位】： 河北北方學院病原生物與免疫學研究所;
【關(guān)鍵詞】： 剛地弓形蟲 ROP 克隆 真核表達質(zhì)粒 生物信息學分析
【基金】：河北省自然科學基金項目(No.H2013405091) 河北省高等學�？茖W技術(shù)研究重點項目(No.ZH2012010) 河北北方學院校級重大課題(No.ZD201312)
【分類號】：R382.5
【正文快照】： *?**?剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種專性細胞內(nèi)寄生原蟲,且宿主群廣泛,能感染包括人類在內(nèi)的200多種動物[1]。弓形蟲感染一般為隱性感染,一旦機體免疫功能受到抑制或損害時,如艾滋病患者、使用免疫抑制劑患者、接受器官移植患者等,則可出現(xiàn)急性感染,嚴重者可導致死亡。

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本文編號：1002493