本文關鍵詞：青島地區(qū)銅綠假單胞菌耐藥性分析及金屬酶、外膜孔蛋白oprD2基因的檢測

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【摘要】：目的了解青島地區(qū)銅綠假單胞菌臨床分離菌株的耐藥特征,檢測分析金屬p-內(nèi)酰胺酶(MBL)分布和外膜孔蛋白oprD2基因缺失情況,為指導臨床合理應用抗菌藥物提供實驗依據(jù)。 方法收集2012年1月到2013年1月青島地區(qū)3所三級甲等綜合性醫(yī)院臨床分離的非重復銅綠假單胞菌共180株。VITEK2-compact微生物鑒定系統(tǒng)GNI卡進行細菌鑒定試驗；K-B瓊脂紙片擴散法進行藥敏試驗；E-test(IPM/EDTA)法進行金屬酶表型檢測；PCR技術(shù)進行金屬β-內(nèi)酰胺酶基因(IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2、 GIM、SPM、SIM、NDM)和外膜孔蛋白oprD2基因檢測。 結(jié)果①180株銅綠假單胞菌中標本類型分布以呼吸道分泌物最多,占81.11%(146/180)。②180株銅綠假單胞菌檢出率以ICU病房最高,占總數(shù)的50.56%(91/180)；其次為呼吸科病房,占28.89%(52/180)。③180株銅綠假單胞菌中檢出多重耐藥菌株61株,泛耐藥菌株28株,檢出率分別為33.89%(61/180)和15.56%(28/180)。銅綠假單胞菌對氨基糖苷類藥物慶大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐藥率分別為60.00%、61.11%和40.00%；對喹諾酮類藥物環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的耐藥率分別為44.44%和53.33%；對磺胺類藥物復方新諾明耐藥率為98.89%；對青霉素類藥物哌拉西林耐藥率為85.56%；對p-內(nèi)酰胺/p-內(nèi)酰胺酶抑制劑復合物,包括哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率分別為63.89%和28.33%；對頭孢類藥物,包括頭孢唑林、頭孢呋辛、頭孢噻肟、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢他啶以及頭孢吡肟的耐藥率依次為84.44%、83.33%、81.11%、72.22%、70.00%、49.44%和50.56%；對單環(huán)β-內(nèi)酰胺類藥物氨曲南耐藥率為52.78%；對碳青霉烯類藥物亞胺培南和美洛培南的耐藥率分別為38.33%和33.89%；對多粘菌素敏感率為100%。④耐亞胺培南銅綠假單胞菌(IRPA)的分離率為38.3%(69/180),69株IRPA中88.41%(61/69)的菌株為多重耐藥菌株；40.58%(28/69)的菌株為泛耐藥菌株。IRPA對20種臨床常用藥物中的16種藥物的耐藥率均在60%以上,僅對環(huán)丙沙星、阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦以及多粘菌素B的敏感度較高,其敏感率分別為47.83%、50.72%、62.32%和100.00%,且IRPA對17種藥物的耐藥率均顯著高于ISPA菌株(P0.05)。⑤亞胺培南耐藥組經(jīng)E-test試驗進行金屬酶表型篩查有13株金屬酶陽性,檢出率為18.84%(13/69)；亞胺培南敏感組未檢出金屬酶陽性菌株,檢出率為0.00%(O/111)。亞胺培南耐藥組經(jīng)PCR擴增金屬酶基因陽性的有11株,陽性率為15.94%(11/69),其中4株為IMP-1,7株為VIM-2,其他幾種基因(IMP-2、VIM-1、SPM、GIM、SIM和NDM)均未檢出；亞胺培南敏感組所有菌株各種金屬酶基因均未檢出。將耐藥組與敏感組金屬酶表型和基因型陽性菌株的檢出率進行比較,耐藥組的檢出率顯著高于敏感組(P0.05)。⑥亞胺培南耐藥組有53株oprD2基因缺失,缺失率為76.81%(53/69)；亞胺培南敏感組有12株oprD2基因缺失,缺失率為10.81%(12/111),耐藥組oprD2基因缺失率顯著高于敏感組(P0.05)。 結(jié)論①本地區(qū)銅綠假單胞菌分離菌株主要以引起患者的呼吸系統(tǒng)感染為主。②ICU是本地區(qū)銅綠假單胞菌感染的高發(fā)區(qū)。③本地區(qū)銅綠假單胞菌耐藥情況嚴重,尤其是耐亞胺培南銅綠假單胞菌,其對青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類等臨床常用藥物表現(xiàn)為不同程度耐藥,僅對環(huán)丙沙星、阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦以及多粘菌素B較為敏感。針對該菌感染可以選擇性使用敏感度比較高的含酶抑制劑類藥物頭孢哌酮/舒巴坦、氟喹諾酮類藥物環(huán)丙沙星和氨基糖苷類藥物阿米卡星,必要時可在嚴密監(jiān)測腎功能的情況下考慮采用多粘菌素治療。④金屬p-內(nèi)酰胺酶基因的存在和其產(chǎn)生的金屬酶是青島地區(qū)銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥的重要機制之一,酶的基因型主要為IMP-1和VIM-2。⑤外膜孔蛋白oprD2缺失推測為青島地區(qū)銅綠假單胞菌臨床分離株對亞胺培南耐藥的主要原因。
【關鍵詞】：銅綠假單胞菌 耐藥性 金屬酶 外膜孔蛋白oprD2基因
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R446.5;R3416
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 0 引言8-10
• 第一章 材料與方法10-18
• 1.1 菌株來源10
• 1.2 主要儀器10-11
• 1.3 主要試劑11
• 1.4 細菌學鑒定11
• 1.5 藥物敏感試驗11-13
• 1.6 金屬酶表型檢測13-14
• 1.7 金屬酶基因與外膜孔蛋白oprD2基因的PCR檢測14-16
• 1.8 統(tǒng)計學分析16-18
• 第二章 結(jié)果18-28
• 2.1 銅綠假單胞菌的藥敏結(jié)果18-23
• 2.1.1 銅綠假單胞菌的標本類型分布18
• 2.1.2 銅綠假單胞菌菌株的科室分布18-19
• 2.1.3 180株銅綠假單胞菌的藥敏結(jié)果19-21
• 2.1.4 亞胺培南耐藥銅綠假單胞菌的藥敏結(jié)果21-23
• 2.2 銅綠假單胞菌金屬酶表型和基因型檢測結(jié)果23-26
• 2.3 銅綠假單胞菌外膜孔蛋白oprD2基因缺失檢測結(jié)果26-28
• 第三章 討論28-33
• 3.1 青島地區(qū)臨床分離銅綠假單胞菌耐藥特征28-30
• 3.2 銅綠假單胞菌亞胺培南耐藥與產(chǎn)金屬酶的關系30-31
• 3.3 銅綠假單胞菌亞胺培南耐藥與外膜孔蛋白oprD2缺失的關系31-33
• 第四章 結(jié)論33-34
• 參考文獻34-36
• 綜述36-47
• 參考文獻44-47
• 攻讀學位期間的研究成果47-48
• 致謝48-49

【參考文獻】

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本文編號：998342