過(guò)氧化氫介導(dǎo)人瓣膜間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激細(xì)胞模型的建立
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【摘要】:目的建立過(guò)氧化氫(hydrogen peroxide,H2O2)介導(dǎo)的瓣膜間質(zhì)細(xì)胞(valve interstitial cells,VICs)氧化應(yīng)激模型,為心臟瓣膜病始發(fā)機(jī)制的研究以及未來(lái)抗氧化治療藥物篩選提供細(xì)胞學(xué)模型。方法將分離培養(yǎng)的原代人主動(dòng)脈瓣VICs隨機(jī)分為對(duì)照組和處理組,分別以含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液和普通培養(yǎng)液+不同濃度梯度(0、50、100、300、500、800、1 000μmol/L)的H2O2進(jìn)行培養(yǎng)。采用H-E染色、MTT比色法、AnnexinⅤ/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞生存能力和凋亡的發(fā)生。結(jié)果處理24h后,MTT結(jié)果顯示各組VICs細(xì)胞存活率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),H2O2濃度在50、100μmol/L時(shí)細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比升高(P0.05),隨后細(xì)胞存活率隨H2O2濃度升高開始下降,在800μmol/L時(shí)出現(xiàn)快速降低的拐點(diǎn),此時(shí)細(xì)胞存活率為(69.8±8.3)%,1 000μmol/L時(shí)細(xì)胞存活率降為(14.3±11.0)%。H-E染色顯示在800μmol/L時(shí)VICs形態(tài)皺縮,胞核固縮。流式細(xì)胞檢測(cè)則進(jìn)一步證實(shí)800μmol/L時(shí)VICs出現(xiàn)明顯凋亡,此時(shí)多為中晚期凋亡。結(jié)論 H2O2最佳作用濃度為800μmol/L,作用時(shí)間為24h,在該條件下可成功建立氧化應(yīng)激細(xì)胞模型。
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院胸心外科;
【關(guān)鍵詞】: 過(guò)氧化氫 人瓣膜間質(zhì)細(xì)胞 氧化性應(yīng)激 細(xì)胞模型
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81370471,81370335)~~
【分類號(hào)】:R542.5;R-33
【正文快照】: Establishment of oxidative stress model with human valve interstitial cells mediated by H2O2XIONG Pu-xi,HAN Lin*,LIU Xiao-hong,GONG De-jun,PAN Wei-jun,XU Zhi-yunDepartment of Cardiothoracic Surgery,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Sha
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
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【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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,本文編號(hào):997135
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