本文關(guān)鍵詞：D-半乳糖致衰老大鼠椎間盤退變及補腎活血湯干預的研究

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【摘要】：研究目的： 本研究通過大鼠皮下注射D-半乳糖,明確D-半乳糖是否能夠成功的造成大鼠衰老椎間盤退變的模型,為造椎間盤退模型增添一種新的方法有重要意義。并研究補腎活血湯對造模后椎間盤組織內(nèi)TNF-α、IL-1p、TGF-p1的影響,明確補腎活血湯是否對上述細胞因子有調(diào)控作用,探索補腎活血湯防治腰椎間盤退變的部分分子生物學機制,并為延緩或阻止腰椎間盤自然退變提供客觀評價指標。 研究方法： 采用SPF級3月齡健康SD大鼠92只,雌雄各半,按照隨機數(shù)字表分為4組,A空白組20只,B假模型組24只,C模型組24只,D中藥組24只。其中C、D兩組大鼠皮下注射D-半乳糖30天造模,B組皮下注射等劑量生理鹽水作為假模型組,A組自然喂養(yǎng),造模成功后,D組予以補腎活血湯灌胃,其余各組予以等量蒸餾水灌胃。灌胃期間,各組大鼠予以正常飼料。灌胃結(jié)束后,取大鼠椎間盤組織,制作組織切片,在光鏡下觀察椎間盤組織形態(tài),并用Elisa法測量椎間盤中TNF-α IL-1β、TGF-β1的表達水平。 研究結(jié)果： 1、光鏡下觀察實驗大鼠椎間盤形態(tài)：A組和B組纖維環(huán)完整無開裂,其膠原纖維層稍有變薄,軟骨細胞有少許增多,髓核稍有皺縮；C組椎間盤纖維環(huán)不完整,有裂縫,膠原纖維已被軟骨組織取代或基本為軟骨組織,并有少量似鈣物質(zhì)沉著,髓核成分減少或鏡下不可見,并可見到骨化；D組纖維環(huán)膠原纖維層較A組和B組薄,纖維環(huán)有裂隙,軟骨細胞浸潤增多,髓核稍有皺縮,較A、B組為重,未見到明顯骨化組織。其中,D組與C組比較,D組退變較輕。 2、分子水平：各組之間雌雄組兩組比較P0.05,無統(tǒng)計學意義,說明性別對此次試驗沒有影響。①B組假手術(shù)組和A組空白組比較,統(tǒng)計無顯著性差異(P0.05),C組模型組與A組空白組比較,有統(tǒng)計學意義(P=0.0180.05)。②經(jīng)灌服補腎活血湯后,D組中藥組與C組模型組比較,p=0.0250.05,差異有統(tǒng)計學意義。③所有組別在治療4周后腰椎間盤組織內(nèi)的各因子陽性表達率增高,其中模型組中細胞因子的OD值更高,進一步說明了皮下注射D-半乳糖能快速增加大鼠椎問盤內(nèi)細胞因子的表達,使其退變速度加快。 研究結(jié)論： 1、隨年齡增長,腰椎問盤呈現(xiàn)退變趨勢； 2、皮下注射D-半乳糖能誘導大鼠衰老,加速大鼠椎間盤的退變,即能成功模仿衰老所致椎間盤退行性變模型； 3、補腎活血湯能有效延緩誘導衰老大鼠椎間盤的退變程度,其作用機制可能與其能夠調(diào)控造模后大鼠椎間盤局部組織內(nèi)的細胞因子有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：D-半乳糖 椎間盤退變 補腎活血 實驗研究 細胞因子
【學位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R-332;R285.5
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 中英文對照表10-11
• 前言11-12
• 第一部分 實驗材料與方法12-17
• 1.1 實驗材料12-13
• 1.2 實驗方法13-17
• 第二部分 實驗結(jié)果與分析17-25
• 2.1 標本的采集與處理17
• 2.2 標本蠟塊制作17-18
• 2.3 HE染色18-19
• 2.4 指標檢測19-21
• 2.4.1 檢測方法19-21
• 2.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計學檢驗21
• 2.6 實驗結(jié)果21-25
• 第三部分 討論25-43
• 3.1 組方的討論25-30
• 3.2 實驗依據(jù)的討論30-36
• 3.2.1 實驗指標的討論30-31
• 3.2.2 動物模型31-36
• 3.3 實驗結(jié)果的討論36-38
• 3.3.1 光鏡下觀察椎間盤組織學形態(tài)的討論36-37
• 3.3.2 椎間盤組織中細胞因子Elisa的測定結(jié)果討論37-38
• 3.4 椎間盤組織細胞因子與椎間盤退變的研究動態(tài)38-41
• 3.4.1 細胞因子在椎間盤退變中的作用39-41
• 3.4.2 針對炎癥因子的治療41
• 3.5 補腎活血湯延緩腰椎間盤退行性變的可能機理研究41-43
• 第四部分 結(jié)論與展望43-44
• 參考文獻44-47
• 附圖47-50
• 致謝50-51
• 附錄一51-63
• 參考文獻59-63
• 附錄二63

【參考文獻】

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本文編號：996367