本文關(guān)鍵詞：計算機輔助精液分析精子運動參數(shù)在體外受精中的應用

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【摘要】：世界衛(wèi)生組織(WHO)對男性不育的定義為：育齡夫婦同居1年以上,不采用任何避孕措施,因男方因素導致的不育。按其發(fā)病過程可分為原發(fā)不育和繼發(fā)不育。原發(fā)性不育癥是指夫婦婚后女方從未受孕生育者；繼發(fā)性不育指夫婦婚后女方曾經(jīng)受孕生育,但近3年未用避孕措施而不受孕者。目前在育齡夫婦中約有10%-20%不育,其中男性因素約占50%,而且發(fā)病率呈逐年上升趨勢。導致男性不育的因素有：疾病、營養(yǎng)不良、內(nèi)分泌紊亂、遺傳及環(huán)境等,以上原因通過不同機制影響男性精液質(zhì)量,致使精子活力下降,形態(tài)異常,正常形態(tài)的精子比率降低,也可破壞精子DNA的完整性,影響精子功能,使精卵結(jié)合受阻。甚至出現(xiàn)死精子癥或無精子癥,嚴重降低男性生育能力。 在男性不育的診治過程中,精液質(zhì)量分析是臨床了解男性生育能力的重要檢測項目,傳統(tǒng)精液分析作為了解男性精液質(zhì)量的最基本檢查,在臨床中應用也最為廣泛。但是傳統(tǒng)精液分析因存在操作復雜,效率不高等缺點,已不能滿足越來越多患者的檢查需求。而且精子濃度、活力及正常形態(tài)的檢查結(jié)果并不能完全反映精子授精能力,只依靠精液分析中精子密度、活力的結(jié)果來判斷男性生育能力是很不準確的,有研究發(fā)現(xiàn)部分進行體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization embryo transfer, IVF-ET)的患者中,不乏受精率低下(受精率≤30%)或者受精失敗的患者,但其中男方精液分析密度、活力等結(jié)果卻處于正常參考值范圍內(nèi),臨床上把這類患者稱為不明原因?qū)е碌牟挥Y。這足以說明精子密度、活力等在診斷男性不育時的并不能完全體現(xiàn)男性生育能力。然而隨著計算機的發(fā)展和應用,20世紀80年代出現(xiàn)了計算機輔助精液分析(computer assisted sperm analysis, CASA)系統(tǒng),該系統(tǒng)除了可分析精子密度,活力等常規(guī)指標外,還能快速、準確、客觀的檢測體現(xiàn)精子運動特征的動態(tài)參數(shù),這些參數(shù)體現(xiàn)精子功能,為男性不育的診治提供新的方向,這些參數(shù)包括：曲線速度(curvilinear velocity, VCL)、直線速度(straight line velocity,VSL)、平均速度(average path velocity, VAP)、直線性(linearity, LIN)、前向性(straightness, STR)、擺動性(wobble, WOB)、側(cè)擺幅度(amplitude of lateral head displacement, ALH)、鞭打頻率(beat/cross frequency, BCF)。計算機輔助精液分析(CASA)系統(tǒng)的原理是利用圖像采集設備將顯微鏡下精子的運動軌跡輸入計算機,通過圖像處理軟件的分析,從而獲得以上精子運動參數(shù)、精子密度及活力等。該技術(shù)與傳統(tǒng)人工精液分析相比,具有快速、準確、客觀等特點。 體外受精聯(lián)合胚胎移植術(shù)(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)亦稱之為試管嬰兒,1978年世界上第一個試管嬰兒在英國誕生,標志著這項技術(shù)的成熟及臨床應用上的成功,我國首例試管嬰兒也在1988年誕生。體外受精聯(lián)合胚胎移植術(shù)的原理是通過內(nèi)窺鏡或經(jīng)陰道超聲下從女性卵巢中取出成熟卵子,并與男方精子在體外進行受精,受精卵發(fā)育成胚胎后再移植到女性子宮內(nèi)繼續(xù)妊娠,使胚胎在母體子宮內(nèi)發(fā)育成胎兒。試管嬰兒技術(shù)的誕生和發(fā)展讓成千上萬的不孕不育夫婦實現(xiàn)了繁衍后代的愿望,自從上世紀70年代世界上的第 一個試管嬰兒誕生以來,經(jīng)過30多年的發(fā)展,該輔助技術(shù)不斷發(fā)展并應用日漸廣泛,到現(xiàn)今全世界已有超過400萬新生兒借助試管嬰兒技術(shù)出生,并且出生人數(shù)逐年增長。此外,IVF技術(shù)對男性不育的研究也有巨大的促進作用,有了體外受精技術(shù)后,國內(nèi)外學者便開始從男性角度去尋找體外受精失敗的原因,使研究男性精液參數(shù)與IVF結(jié)局的關(guān)系成為可能。而且反映精子功能的有些試驗,比如精子-透明帶結(jié)合試驗評價精子頂體功能,試管嬰兒可為此提供研究平臺。 正常受精率、卵裂率及優(yōu)良胚胎形成率是反映體外受精結(jié)局的三個重要指標。體外受精后觀察受精情況,無原核為未受精,雙原核和雙極體為正常受精,一個或多個原核為異常受精。受精卵經(jīng)過多次連續(xù)迅速的細胞分裂,形成許多小細胞的發(fā)育過程稱為卵裂。根據(jù)胚胎的卵裂球數(shù)目、卵裂球大小、胚胎碎片量將胚胎分為6級,Ⅰ級為均勻的卵裂球,無碎片；Ⅱ級卵裂球大小均勻,裂片≤20%；Ⅲ級卵裂球大小不均勻,裂片≤20%；Ⅳ級卵裂球大小均勻或不均勻,碎片20%～50%；Ⅴ級卵裂球大小均勻或不均勻,碎片50%；Ⅵ全碎片。發(fā)育成7、8細胞Ⅰ、Ⅱ級定義為優(yōu)良胚胎。試管嬰兒正常受精率、卵裂率及優(yōu)良胚胎形成率與胚胎移植、妊娠率及胎兒正常發(fā)育關(guān)系密切,是生育健康胎兒的必要條件。 近年來,輔助生殖技術(shù)(assisted reproductive technology, ART)的發(fā)展,使一些以往無法生育的不孕不育夫婦獲得了生育的機會,隨著接受輔助生殖的患者增加,因男性因素導致的低受精率(≤30%)和受精失敗的病例亦越來越多。目前國內(nèi)外有關(guān)影響IVF結(jié)局的研究主要集中于女方因素,如女方年齡、盆腔輸卵管及卵子質(zhì)量等,男方因素的研究則側(cè)重于精子密度、活力及形態(tài)等,然而精子密度、活力及形態(tài)只反映精液質(zhì)量,并不能完全反映精子的功能,即授精能力。目前國內(nèi)外對于計算機輔助精液分析中體現(xiàn)精子運動能力的參數(shù)(VCL、VSL、VAP、LIN、STR、WOB、ALH、BCF)重視較少,其對體外受精結(jié)局的作用更鮮有報道,研究這些參數(shù)與IVF卵細胞正常受精率、受精后卵裂率及優(yōu)良胚胎形成率的關(guān)系臨床意義愈顯重要,從而為尋找可以影響IVF預后的指標拓展思路及方向。 目的檢測正常受精率高組患者與正常受精率低組患者計算機輔助精液分析運動參數(shù)(VCL、VSL、VAP、LIN、STR、WOB、ALH、BCF)的差異性,檢測卵裂率組高患者與卵裂率低組患者以上參數(shù)的差異性,檢測各參數(shù)在優(yōu)良胚胎率高組與優(yōu)良胚胎率低組之間的差異；探討計算機輔助精液分析(CASA)相關(guān)運動參數(shù)與行IVF治療后正常受精率、卵裂率及優(yōu)良胚胎率的關(guān)系。 方法收集2011年1月～2012年1月期間第1次在本院生殖中心就診的不孕患者288例、年齡25～45歲、不孕原因有輸卵管阻塞、子宮內(nèi)膜異位及排卵障礙等。共進行體外受精(IVF)288個周期。288例患者按受精情況分為正常受精率≥50%組,正常受精率50%組；根據(jù)卵裂情況分為卵裂率≥90%組及卵裂率90%組；根據(jù)優(yōu)良胚胎形成情況分為優(yōu)良胚胎形成率≥50%組,優(yōu)良胚胎形成率50%組,記錄取卵前男方2次精液檢查精子運動相關(guān)參數(shù)的均值,用兩獨立樣本t檢驗法確定各組間VCL、VSL、VAP、LIN、STR、WOB、ALH、BCF的均值是否存在統(tǒng)計學差異,從而判定與試管嬰兒正常受精率、卵裂率及優(yōu)良胚胎形成率相關(guān)的精子運動參數(shù)。 結(jié)果288個周期中共取卵3539個,每周期取卵數(shù)12.29±6.51個,總正常受精率為68.44%±18.19%,總卵裂率96.98%±10.14%,總優(yōu)良胚胎形成率50.21%±27.01%。其中正常受精率≥50%的248例,正常受精率50%的40例;卵裂率≥90%的257例,90%的31例；優(yōu)良胚胎形成率≥50%的161例,優(yōu)良胚胎形成率50%的127例。 正常受精率≥50%組VCL、VAP、ALH值明顯高于正常受精率50%組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；卵裂率≥90%組VCL、VAP值明顯高于卵裂率90%組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；優(yōu)良胚胎形成率≥50%組與優(yōu)良胚胎形成率50%組間VCL、VSL、VAP、LIN、STR、WOB、ALH、BCF均無統(tǒng)計學差異(P0.05)。 結(jié)論①正常受精率、卵裂率與精子運動能力有關(guān)；②試管嬰兒優(yōu)良胚胎形成率的大小與精子運動參數(shù)無關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：計算機輔助精液分析 試管嬰兒 正常受精率 卵裂率 優(yōu)良胚胎形成率
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R321.1;TP391.7
【目錄】：

• 摘要3-7
• ABSTRACT7-13
• 目錄13-14
• 前言14-16
• 材料與方法16-22
• 結(jié)果22-24
• 討論24-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-37
• 綜述37-48
• 參考文獻46-48
• 英文縮略詞表48-49
• 研究生期間發(fā)表的論文49-50
• 致謝50-51

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