本文關(guān)鍵詞：Rab13通過影響PKA活性調(diào)節(jié)occludin及F-actin在大鼠血睪屏障的分布

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【摘要】：目的探討Rab13-PKA通路對大鼠血睪屏障功能的調(diào)節(jié)。方法首先構(gòu)建靶向大鼠Rab13的shRNA載體,通過大鼠睪丸內(nèi)注射轉(zhuǎn)染Rab13 shRNA,Western印跡檢測Rab13體內(nèi)沉默效果及沉默后BTB相關(guān)連接蛋白表達改變,放射自顯影檢測睪丸組織內(nèi)PKA活性變化,睪丸組織冰凍切片免疫熒光染色及鬼筆環(huán)肽染色分別觀察occludin及肌動蛋白絲在生精上皮的分布。結(jié)果 Rab13 shRNA睪丸內(nèi)轉(zhuǎn)染后Rab13表達量與對照shRNA轉(zhuǎn)染相比下降約70%(P0.01),而BTB相關(guān)連接蛋白表達無變化;Rab13沉默后PKA活性與對照組相比有明顯升高(P0.01);免疫熒光結(jié)果表明,Rab13沉默后occludin在VIII期生精上皮的分布顯著高于對照組,而在其他期別生精上皮中則無顯著變化;鬼筆環(huán)肽染色顯示Rab13沉默后F-actin在BTB處的分布明顯增強;此外,occludin及F-actin的分布變化可被PKA抑制劑H89所拮抗。結(jié)論 Rab13可通過影響PKA活性調(diào)節(jié)大鼠BTB緊密連接蛋白occludin及F-actin的分布,從而參與調(diào)節(jié)BTB功能。
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： Rab 血睪屏障 蛋白激酶A
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(批準(zhǔn)號:81100462,81370756)
【分類號】：Q78;R339.2
【正文快照】： 血睪屏障(blood-testis barrier,BTB)位于生精上皮近基底膜處相鄰支持細(xì)胞(Sertoli cell,SC)間,作為免疫屏障,BTB將生精細(xì)胞減數(shù)分裂及減數(shù)分裂后的發(fā)育過程同體循環(huán)相分隔,使這些過程在相對獨立的近腔小室中進行[1,2]。BTB是哺乳動物體內(nèi)最為嚴(yán)密的血-組織屏障之一,這有賴于

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2 張s，

本文編號：964892