本文關(guān)鍵詞：低頻電磁場對小鼠毛發(fā)生長及KGF、β-catenin表達(dá)影響的研究

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【摘要】：目的觀察低頻電磁場（Low Frequency Electromagnetic Field, LFEMF）對小鼠毛發(fā)生長的影響，同時觀察此過程中LFEMF對K15陽性（K15+）干細(xì)胞及毛囊內(nèi)細(xì)胞增殖的調(diào)控作用以及對角質(zhì)化細(xì)胞生長因子（Keratinocyte Growth Factor）、β-catenin表達(dá)的影響，為解決毛囊及毛發(fā)再生提供新的治療方法。 方法采用松香/蠟混合物脫毛法制作C57BL/6小鼠毛發(fā)生長模型，隨機(jī)分為對照組及低頻電磁場組（LFEMF組），每組18只。脫毛次日，LFEMF組采用50Hz、5mT磁場，每日30min，連續(xù)作用，并拍照記錄體外毛發(fā)生長情況。分別在LFEMF干預(yù)3天、9天、16天后的次日，對兩組小鼠體外毛發(fā)生長情況進(jìn)行評分，然后留取兩組小鼠脫毛處皮膚組織，進(jìn)行HE染色觀察兩組毛囊形態(tài)差異并定量分析毛囊長度；分別提取各組全皮膚組織RNA和蛋白后，行熒光定量PCR檢測KGF和β-catenin基因表達(dá)量，Western-blot檢測KGF蛋白表達(dá)；最后，采用免疫熒光法分析KGF在毛囊內(nèi)的表達(dá)位點(diǎn)、并定量分析增殖細(xì)胞（Ki67+細(xì)胞）及表皮干細(xì)胞（K15+細(xì)胞）在毛囊內(nèi)的分布情況。 9天以后，，對照組及LFEMF組的小鼠脫毛處皮膚轉(zhuǎn)為灰色，9、16天時，LFEMF組的毛發(fā)生長評分均高于對照組（P0.05）。同時，HE染色顯示3天的LFEMF組毛囊底端毛乳頭增大，并被毛母質(zhì)細(xì)胞包繞，毛乳頭上方可見黑色素形成，對照組毛囊毛乳頭上方可見增多的細(xì)胞層，但未包繞真皮乳頭；9、16天時，LFEMF組內(nèi)毛囊長度較對照組增加（P0.05）。 免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：3、9、16天時，LFEMF組內(nèi)Ki67+細(xì)胞及K15+干細(xì)胞計數(shù)均多于對照組（P0.05）。其中，毛囊結(jié)構(gòu)中，Ki67+細(xì)胞主要分布于毛囊底端毛母質(zhì)區(qū)及外根鞘，K15+干細(xì)胞主要見于毛囊底端及外根鞘。隨著時間變化，兩組內(nèi)K15+干細(xì)胞計數(shù)亦呈下降趨勢。同時，K15免疫熒光結(jié)果亦可見LFEMF組毛囊內(nèi)K15+表達(dá)均強(qiáng)于對照組。 3、9、16天時，LFEMF組中的KGF基因及蛋白表達(dá)量均高于對照組(P0.05)；激光共聚焦顯微鏡下可見兩組中KGF主要分布于毛囊底端的母質(zhì)細(xì)胞周圍及毛囊內(nèi)根鞘，且LFEMF組中KGF陽性表達(dá)高于對照組。同時，與對照組相比，3、9、16天的LFEMF組β-catenin基因表達(dá)均上調(diào)(P0.05)。 結(jié)論低頻電磁場可促進(jìn)C57BL/6小鼠的毛發(fā)生長，其機(jī)制是低頻電磁場促進(jìn)KGF及β-catenin的表達(dá)、提高毛囊內(nèi)K15+干細(xì)胞和毛囊底端毛母質(zhì)區(qū)及外根鞘處細(xì)胞的增殖能力。
【關(guān)鍵詞】：低頻電磁場 毛發(fā)生長 角質(zhì)化細(xì)胞生長因子 增殖
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R322.995
【目錄】：

• 英文縮寫詞表3-4
• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 目錄8-13
• 前言13-16
• 1.實驗材料16-19
• 1.1 實驗動物16
• 1.2 主要實驗儀器及器械16-17
• 1.3 主要實驗試劑17-19
• 2.實驗方法19-30
• 2.1. 主要試劑的配制方法19-20
• 2.2 毛囊生長周期動物模型的建立20-21
• 2.3 實驗分組和干預(yù)方法21
• 2.4 體外毛發(fā)生長評分21
• 2.5 組織標(biāo)本的收集和處理21
• 2.6 主要實驗操作過程21-30
• 3 統(tǒng)計學(xué)方法30-31
• 4 實驗結(jié)果31-47
• 4.1 小鼠毛發(fā)生長模型31
• 4.2 小鼠毛發(fā)生長情況31-33
• 4.3 小鼠脫毛處再生毛囊生長情況33-35
• 4.3.1 鏡下觀察毛囊生長情況33-34
• 4.3.2 定量分析毛囊長度34-35
• 4.4 小鼠脫毛處Ki67+細(xì)胞表達(dá)情況35-38
• 4.4.1 毛囊中Ki67表達(dá)35-38
• 4.5 小鼠脫毛處K15+干細(xì)胞表達(dá)情況38-42
• 4.5.1 毛囊中K15表達(dá)38-41
• 4.5.2 免疫熒光法觀察K15~+表達(dá)41-42
• 4.6 KGF表達(dá)變化42-45
• 4.6.1 KGF基因表達(dá)42-43
• 4.6.2 KGF蛋白表達(dá)43-44
• 4.6.3 KGF在毛囊中的表達(dá)位置44-45
• 4.7 β-catenin基因表達(dá)45-47
• 5 討論47-51
• 6 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 在校期間完成論文及科研成果56-57
• 致謝57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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本文編號：954611