本文關(guān)鍵詞：低頻電磁場(chǎng)對(duì)小鼠毛發(fā)生長(zhǎng)及KGF、β-catenin表達(dá)影響的研究

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【摘要】：目的觀察低頻電磁場(chǎng)（Low Frequency Electromagnetic Field, LFEMF）對(duì)小鼠毛發(fā)生長(zhǎng)的影響，同時(shí)觀察此過(guò)程中LFEMF對(duì)K15陽(yáng)性（K15+）干細(xì)胞及毛囊內(nèi)細(xì)胞增殖的調(diào)控作用以及對(duì)角質(zhì)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Keratinocyte Growth Factor）、β-catenin表達(dá)的影響，為解決毛囊及毛發(fā)再生提供新的治療方法。 方法采用松香/蠟混合物脫毛法制作C57BL/6小鼠毛發(fā)生長(zhǎng)模型，隨機(jī)分為對(duì)照組及低頻電磁場(chǎng)組（LFEMF組），每組18只。脫毛次日，LFEMF組采用50Hz、5mT磁場(chǎng)，每日30min，連續(xù)作用，并拍照記錄體外毛發(fā)生長(zhǎng)情況。分別在LFEMF干預(yù)3天、9天、16天后的次日，對(duì)兩組小鼠體外毛發(fā)生長(zhǎng)情況進(jìn)行評(píng)分，然后留取兩組小鼠脫毛處皮膚組織，進(jìn)行HE染色觀察兩組毛囊形態(tài)差異并定量分析毛囊長(zhǎng)度；分別提取各組全皮膚組織RNA和蛋白后，行熒光定量PCR檢測(cè)KGF和β-catenin基因表達(dá)量，Western-blot檢測(cè)KGF蛋白表達(dá)；最后，采用免疫熒光法分析KGF在毛囊內(nèi)的表達(dá)位點(diǎn)、并定量分析增殖細(xì)胞（Ki67+細(xì)胞）及表皮干細(xì)胞（K15+細(xì)胞）在毛囊內(nèi)的分布情況。 9天以后，，對(duì)照組及LFEMF組的小鼠脫毛處皮膚轉(zhuǎn)為灰色，9、16天時(shí)，LFEMF組的毛發(fā)生長(zhǎng)評(píng)分均高于對(duì)照組（P0.05）。同時(shí)，HE染色顯示3天的LFEMF組毛囊底端毛乳頭增大，并被毛母質(zhì)細(xì)胞包繞，毛乳頭上方可見(jiàn)黑色素形成，對(duì)照組毛囊毛乳頭上方可見(jiàn)增多的細(xì)胞層，但未包繞真皮乳頭；9、16天時(shí)，LFEMF組內(nèi)毛囊長(zhǎng)度較對(duì)照組增加（P0.05）。 免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：3、9、16天時(shí)，LFEMF組內(nèi)Ki67+細(xì)胞及K15+干細(xì)胞計(jì)數(shù)均多于對(duì)照組（P0.05）。其中，毛囊結(jié)構(gòu)中，Ki67+細(xì)胞主要分布于毛囊底端毛母質(zhì)區(qū)及外根鞘，K15+干細(xì)胞主要見(jiàn)于毛囊底端及外根鞘。隨著時(shí)間變化，兩組內(nèi)K15+干細(xì)胞計(jì)數(shù)亦呈下降趨勢(shì)。同時(shí)，K15免疫熒光結(jié)果亦可見(jiàn)LFEMF組毛囊內(nèi)K15+表達(dá)均強(qiáng)于對(duì)照組。 3、9、16天時(shí)，LFEMF組中的KGF基因及蛋白表達(dá)量均高于對(duì)照組(P0.05)；激光共聚焦顯微鏡下可見(jiàn)兩組中KGF主要分布于毛囊底端的母質(zhì)細(xì)胞周?chē)懊覂?nèi)根鞘，且LFEMF組中KGF陽(yáng)性表達(dá)高于對(duì)照組。同時(shí)，與對(duì)照組相比，3、9、16天的LFEMF組β-catenin基因表達(dá)均上調(diào)(P0.05)。 結(jié)論低頻電磁場(chǎng)可促進(jìn)C57BL/6小鼠的毛發(fā)生長(zhǎng)，其機(jī)制是低頻電磁場(chǎng)促進(jìn)KGF及β-catenin的表達(dá)、提高毛囊內(nèi)K15+干細(xì)胞和毛囊底端毛母質(zhì)區(qū)及外根鞘處細(xì)胞的增殖能力。
【關(guān)鍵詞】：低頻電磁場(chǎng) 毛發(fā)生長(zhǎng) 角質(zhì)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子 增殖
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R322.995
【目錄】：

• 英文縮寫(xiě)詞表3-4
• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 目錄8-13
• 前言13-16
• 1.實(shí)驗(yàn)材料16-19
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物16
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及器械16-17
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑17-19
• 2.實(shí)驗(yàn)方法19-30
• 2.1. 主要試劑的配制方法19-20
• 2.2 毛囊生長(zhǎng)周期動(dòng)物模型的建立20-21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)分組和干預(yù)方法21
• 2.4 體外毛發(fā)生長(zhǎng)評(píng)分21
• 2.5 組織標(biāo)本的收集和處理21
• 2.6 主要實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程21-30
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法30-31
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-47
• 4.1 小鼠毛發(fā)生長(zhǎng)模型31
• 4.2 小鼠毛發(fā)生長(zhǎng)情況31-33
• 4.3 小鼠脫毛處再生毛囊生長(zhǎng)情況33-35
• 4.3.1 鏡下觀察毛囊生長(zhǎng)情況33-34
• 4.3.2 定量分析毛囊長(zhǎng)度34-35
• 4.4 小鼠脫毛處Ki67+細(xì)胞表達(dá)情況35-38
• 4.4.1 毛囊中Ki67表達(dá)35-38
• 4.5 小鼠脫毛處K15+干細(xì)胞表達(dá)情況38-42
• 4.5.1 毛囊中K15表達(dá)38-41
• 4.5.2 免疫熒光法觀察K15~+表達(dá)41-42
• 4.6 KGF表達(dá)變化42-45
• 4.6.1 KGF基因表達(dá)42-43
• 4.6.2 KGF蛋白表達(dá)43-44
• 4.6.3 KGF在毛囊中的表達(dá)位置44-45
• 4.7 β-catenin基因表達(dá)45-47
• 5 討論47-51
• 6 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 在校期間完成論文及科研成果56-57
• 致謝57

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 楊亞軍;王冬春;周秋貴;丁家宜;;水溶性米諾地爾對(duì)C57BL/6小鼠毛發(fā)生長(zhǎng)影響的研究[J];海峽藥學(xué);2007年07期

2 邢書(shū)亮;亓發(fā)芝;徐劍煒;張勇;王研;馮自豪;楊震;;脂溢性脫發(fā)成年男性額部毛囊角蛋白15表達(dá)及意義[J];中國(guó)臨床醫(yī)學(xué);2007年02期

3 張鳴生;何斌;朱洪翔;吳博;龐文君;李東風(fēng);林秋雄;劉旋安;徐達(dá)傳;;不同頻率低強(qiáng)度脈沖電磁場(chǎng)對(duì)表皮干細(xì)胞增殖的影響[J];中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志;2006年11期

4 張鳴生;何斌;朱洪翔;吳博;龐文君;李葉揚(yáng);徐達(dá)傳;;低強(qiáng)度電磁場(chǎng)對(duì)創(chuàng)面愈合過(guò)程中表皮干細(xì)胞增殖和分化的影響[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2006年06期

5 張敏;朱曉文;王雪兒;張琳;;C57BL/6小鼠皮膚毛囊發(fā)育的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2010年01期

6 邱家琦;張鳴生;李新平;白文芳;吳博;白利明;徐武華;;低頻電磁場(chǎng)對(duì)BDNF基因修飾的BMSCs增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2012年01期

7 梁玲;李新平;白文芳;白利明;朱洪翔;許偉成;馮玉;王鑫;陳藝;張鳴生;;低頻電磁場(chǎng)在基因修飾表皮干細(xì)胞移植修復(fù)創(chuàng)面中的作用[J];中國(guó)組織工程研究;2013年32期

8 張菊芳;沈海燕;王宇燕;祝飛;賈明;郭曉波;;雄激素型脫發(fā)患者高密度毛囊單位移植并發(fā)癥分析[J];中華移植雜志(電子版);2012年02期

本文編號(hào)：954611