本文關(guān)鍵詞：Prelamin A相互作用蛋白的篩選及驗證（英文）

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【摘要】：【目的】篩選衰老相關(guān)蛋白prelamin A的相互作用蛋白并驗證其相互作用情況�！痉椒ā客ㄟ^酵母雙雜交方法從人骨骼肌c DNA文庫中篩選prelamin A的相互作用蛋白。一對一回復性雜交,GST pull-down,免疫共沉淀和Western blotting驗證其在細胞外的相互作用,構(gòu)建Ran BPM與綠色熒光蛋白融合表達載體p EGFP-N1-Ran BPM,與紅色熒光蛋白-prelamin A融合表達質(zhì)粒p Ds Red1-N1-prelamin A.共轉(zhuǎn)染HEK293細胞,激光共聚焦顯微觀察細胞內(nèi)的共定位情況。【結(jié)果】篩選得到包括Ran BPM在內(nèi)的21個候選相互作用蛋白。一對一回復性雜交,GST pull-down,免疫共沉淀和Western blotting證明兩者能在細胞外相互作用。激光共聚焦顯微觀察發(fā)現(xiàn)Ran BPM能與帶紅色熒光蛋白的prelamin A蛋白在核膜共定位�！窘Y(jié)論】Ran BPM可能通過與Prelamin A發(fā)生相互作用參與了細胞衰老的過程。
【作者單位】： 廣東省中醫(yī)院;臨沂市人民醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： prelamin A RanBPM/RanBP 酵母雙雜交 HGPS
【基金】：廣東省醫(yī)學科研基金項目(B2014181) 臨沂市科技局(201413022)
【分類號】：R3411
【正文快照】： Prelamin A as a precursor of Lamin A was encodedby gene LMNA.It has known that G608G mutation inLMNA gene c ould generate a truncated unprocessedprotein,termed progerin and then cause humanpremature ageing of HGPS[1].In order to investigatethe possible m

【共引文獻】

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本文編號：928575