本文關(guān)鍵詞：低氧和糖皮質(zhì)激素上調(diào)巨噬細(xì)胞小G蛋白R(shí)hoB表達(dá)及其生物學(xué)意義的研究

  更多相關(guān)文章： 低氧 糖皮質(zhì)激素 RhoB 巨噬細(xì)胞功能

【摘要】：缺氧是臨床最常見(jiàn)的病理生理過(guò)程，全身性缺氧與高原性疾病、呼吸系統(tǒng)和心血管疾病等的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。而局部性缺氧常見(jiàn)于心腦血管的梗塞、炎癥和過(guò)度的組織增生（如腫瘤）等。低氧和炎癥常同時(shí)發(fā)生，低氧可以激活免疫細(xì)胞（巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和淋巴細(xì)胞），導(dǎo)致這些細(xì)胞基因表達(dá)和炎癥因子分泌的改變，從而參與炎癥反應(yīng)。這是低氧導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和組織損傷的原因之一，也是導(dǎo)致腫瘤炎癥微環(huán)境的重要因素。糖皮質(zhì)激素（Glucocorticoid, GC）是體內(nèi)最重要的應(yīng)激激素，已證實(shí)在低氧條件下GC分泌增多。糖皮質(zhì)激素受體（Glucocorticoid receptor,GR）是配體依賴(lài)性的轉(zhuǎn)錄因子，，GC能在GR介導(dǎo)下，通過(guò)調(diào)節(jié)基因表達(dá)，在低氧適應(yīng)及維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮作用。但是目前已知的能介導(dǎo)低氧適應(yīng)和GC作用的靶基因還不多，進(jìn)一步尋找這些靶基因?qū)τ陉U明低氧的適應(yīng)機(jī)制和GC的作用機(jī)制有重要意義。 RhoB是小G蛋白家族一個(gè)成員，主要存在于細(xì)胞的內(nèi)體（endosome），RhoB在GTP結(jié)合（活性態(tài)）和GDP結(jié)合（非活性態(tài)）之間轉(zhuǎn)換，與GTP結(jié)合的RhoB能激活下游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與不同的細(xì)胞過(guò)程，如調(diào)節(jié)細(xì)胞的骨架重組和囊泡運(yùn)輸，并作為腫瘤抑制蛋白，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡等過(guò)程。已知生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和基因毒應(yīng)激等可以快速上調(diào)RhoB的表達(dá)。國(guó)外有研究顯示，與野生型小鼠骨髓巨噬細(xì)胞相比，從RhoB基因敲除小鼠骨髓中分離的巨噬細(xì)胞（RhoB-/-）與玻璃板的粘附作用減弱，但遷移加快，提示RhoB參與調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞與基質(zhì)的粘附和遷移。我們前期的工作也發(fā)現(xiàn)GC能在包括巨噬細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞中上調(diào)RhoB的表達(dá)，近期又發(fā)現(xiàn)低氧可以上調(diào)肺組織和A549細(xì)胞中RhoB的表達(dá)。但是低氧能否上調(diào)巨噬細(xì)胞的RhoB，RhoB是否參與了GC對(duì)巨噬細(xì)胞的作用還不清楚。本課題首先觀察了低氧單獨(dú)以及低氧和Dex聯(lián)合作用對(duì)RhoB表達(dá)的影響，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步觀察了RhoB對(duì)巨噬細(xì)胞粘附和遷移行為的影響以及與Dex對(duì)巨噬細(xì)胞作用的關(guān)系，以進(jìn)一步闡明RhoB在低氧適應(yīng)、巨噬細(xì)胞功能調(diào)節(jié)和GC效應(yīng)中可能的作用。 我們的工作發(fā)現(xiàn)，低氧可以上調(diào)大鼠脾臟組織以及小鼠腹腔巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞中RhoB mRNA和蛋白的表達(dá)。人工合成的糖皮質(zhì)激素-地塞米松（Dex）也能明顯誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞RhoB表達(dá)，與低氧聯(lián)合處理細(xì)胞可使RhoB的表達(dá)進(jìn)一步增加。采用siRNA干擾技術(shù)抑制RhoB表達(dá)可使巨噬細(xì)胞與培養(yǎng)板的粘附作用明顯減弱，而遷移增強(qiáng)，表明RhoB具有促進(jìn)巨噬細(xì)胞粘附和抑制其遷移的作用。我們還發(fā)現(xiàn)，Dex具有促進(jìn)巨噬細(xì)胞粘附和抑制其遷移的作用。抑制RhoB的表達(dá)可使Dex的上述作用減弱，表明Dex誘導(dǎo)RhoB表達(dá)介導(dǎo)了Dex促進(jìn)巨噬細(xì)胞粘附和抑制其遷移的作用。另外，我們研究了常氧和低氧的條件下，RhoB的表達(dá)受到抑制后對(duì)巨噬細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響，我們發(fā)現(xiàn)低氧可以上調(diào)巨噬細(xì)胞炎癥因子表達(dá)，同時(shí)無(wú)論在常氧還是低氧的條件下，RhoB的表達(dá)受到抑制后，IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA水平都是下降的，其中IL-1β,IL-6的mRNA表達(dá)明顯的降低，上述結(jié)果表明，RhoB參與到低氧促進(jìn)巨噬細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的過(guò)程中。
【關(guān)鍵詞】：低氧 糖皮質(zhì)激素 RhoB 巨噬細(xì)胞功能
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R363
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略語(yǔ)9-10
• 前言10-13
• 材料與試劑13-15
• 實(shí)驗(yàn)方法15-22
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-32
• 討論32-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 小結(jié)和展望37-38
• 綜述38-44
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 致謝44-46

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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5 姜梅;前列腺癌基因組學(xué)研究及雄激素信號(hào)通路在前列腺癌中作用的初探[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

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8 王東娟;胰高血糖素樣肽-1介導(dǎo)cAMP/PKA/Rho信號(hào)通路在糖尿病心肌微血管損傷中的保護(hù)作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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7 張曉梅;應(yīng)用RhoA shRNA對(duì)原發(fā)性肝癌生物學(xué)行為的調(diào)控研究[D];華中科技大學(xué);2007年

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9 董玉金;LyGDI在腫瘤細(xì)胞輻射凋亡敏感性中的作用與P53調(diào)控研究[D];蘇州大學(xué);2009年

10 金貽鐸;低氧和糖皮質(zhì)激素對(duì)小G蛋白R(shí)hoB表達(dá)的上調(diào)作用及其機(jī)制[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

本文編號(hào)：924629