本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌Hsp16.3刺激小鼠巨噬細(xì)胞向M2分化

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【摘要】：目的:探討結(jié)核分枝桿菌熱休克蛋白16.3(Mycobacterium tuberculosis heat shock proteins 16.3,MTB Hsp16.3)在體外細(xì)胞水平對小鼠骨髓來源M1型巨噬細(xì)胞的影響作用。方法:從BALB/c小鼠的脛股骨中取骨髓細(xì)胞,與GM-CSF共培養(yǎng)獲取骨髓來源的M0型巨噬細(xì)胞,流式檢測CD11b和F4/80的表達(dá);分別用IFN-γ、IL-4誘導(dǎo)M0型巨噬細(xì)胞,光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),熒光定量PCR、ELISA檢測各組細(xì)胞IL-12、TNF-α、i NOS、IL-10、TGF-β、Arg-1的表達(dá)情況,構(gòu)建小鼠骨髓來源M1/M2型巨噬細(xì)胞的技術(shù)平臺;用MTB Hsp16.3刺激M0、M1型巨噬細(xì)胞,分別孵育24、48、72、96 h,采用ELISA、qRT-PCR檢測不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)液上清和細(xì)胞內(nèi)的IL-12、TNF-α、i NOS、IL-10、IL-4、TGF-β、Arg-1的表達(dá)情況。結(jié)果:光鏡下觀察M0型巨噬細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞偽足較短;M1型巨噬細(xì)胞形狀呈長梭形,并有偽足伸出現(xiàn),突觸很長;M2型巨噬細(xì)胞偽足較短,細(xì)胞整體形態(tài)較為收攏。FCM檢測有90%以上的骨髓細(xì)胞細(xì)胞具有CD11b和F4/80雙陽性的特征。ELISA和qRT-PCR檢測發(fā)現(xiàn),M1型巨噬細(xì)胞高表達(dá)IL-12、TNF-α、i NOS;M2型巨噬細(xì)胞高表達(dá)IL-4、TGF-β、IL-10、Arg-1。MTB Hsp16.3刺激巨噬細(xì)胞后,M0和M1型巨噬細(xì)胞均高表達(dá)IL-10、TGF-β,低表達(dá)TNF-α、i NOS,且在48-72 h增加或降低的水平達(dá)到峰值。結(jié)論:成功誘導(dǎo)了小鼠骨髓來源的M1、M2型巨噬細(xì)胞;MTB Hsp16.3促進(jìn)M1型巨噬細(xì)胞高表達(dá)M2型相關(guān)的細(xì)胞因子,可促進(jìn)M1型巨噬細(xì)胞向M2型樣巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)換。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室 貴州省生物治療人才基地;遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸二科;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 巨噬細(xì)胞 結(jié)核分枝桿菌熱休克蛋白.
【基金】：國家自然科學(xué)基金地區(qū)項(xiàng)目(81460249)資助
【分類號】：R378.911
【正文快照】： 1本文受國家自然科學(xué)基金地區(qū)項(xiàng)目(81460249)資助。2遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸二科,遵義563099。結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tu-berculosis,MTB)引起的慢性傳染性疾病,2012年全球結(jié)核病患者為860萬,其中130萬例死亡(包括32萬例HIV陽性人群)[1],我國更是繼印度之后的

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8 任虹;感染期子宮頸癌U14細(xì)胞荷瘤小鼠抑制巨噬細(xì)胞CCL5分泌的機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 李美玲;雙酚A對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞極化影響的體外研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 劉瓊;黃芪多糖影響巨噬細(xì)胞向脂肪細(xì)胞趨化的作用及機(jī)制研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

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