本文關(guān)鍵詞：上調(diào)小鼠骨髓來源樹突狀細胞FcγRⅡb表達可抑制其抗原提呈功能

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【摘要】：目的構(gòu)建FcγRⅡb慢病毒載體,感染小鼠骨髓來源樹突狀細胞(BMDC),觀察BMDC抗原提呈功能變化。方法小鼠骨髓細胞中提取RNA,反轉(zhuǎn)錄后進行PCR擴增得到FcγRⅡb目的基因,將FcγRⅡb基因插入慢病毒表達載體TRE中構(gòu)建FcγRⅡb重組慢病毒載體。HEK293T細胞包裝慢病毒,體外進行小鼠BMDC的誘導培養(yǎng)及鑒定。將慢病毒感染BMDC后,實時定量PCR檢測BMDC中FcγRⅡb mRNA水平,Western blot法檢測BMDC中FcγRⅡb蛋白水平,流式細胞術(shù)分析BMDC表面分子CD80、CD86、CD40、MHCⅡ的變化。結(jié)果成功構(gòu)建FcγRⅡb重組慢病毒載體,經(jīng)酶切、PCR鑒定及測序鑒定成功。體外誘導培養(yǎng)BMDC,可見細胞表面大量樹枝樣突起形成。包裝慢病毒感染BMDC后,FcγRⅡb mRNA和蛋白水平均較未感染BMDC增高。流式細胞術(shù)分析感染后BMDC表面分子CD80、CD86、CD40、MHC II的表達量均較未感染BMDC下降。結(jié)論DC上FcγRⅡb的過表達能夠下調(diào)其抗原提呈功能。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學院病原生物學與免疫學系;解放軍401醫(yī)院醫(yī)務(wù)處;寧夏醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學院生育力保持省部級共建教育部重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： FcγRⅡb 慢病毒 樹突狀細胞
【基金】：國家自然科學基金(81160375) 寧夏醫(yī)科大學校級科研項目(XZ201403)
【分類號】：R392
【正文快照】： Fcγ受體(Fcγreceptor,FcγR)是一類特異性的Ig G Fc受體,功能上可以分為活化性受體和抑制性受體兩類。FcγRⅡb(CD32b)作為目前唯一發(fā)現(xiàn)的抑制性FcγR,對免疫平衡起重要調(diào)節(jié)作用[1]。FcγRⅡb低表達或基因敲除鼠易患SLE等自身免疫性疾病[2]。FcγRⅡb表達量的變化可以影響自

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本文編號：911507