本文關(guān)鍵詞：SOCE通道在CAPRI膜轉(zhuǎn)位過程中作用的研究

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【摘要】：CAPRI是GAPIP4BP家族的成員之一，具有針對小G蛋白Ras、Rap的特異性GAP (GTPase-Activating Protein)活性。CAPRI蛋白內(nèi)含C2A、C2B、GRD、PH/Btk四個結(jié)構(gòu)域，其中C2A-C2B結(jié)構(gòu)域具有鈣離子結(jié)合能力，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度上升時C2A-C2B結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)CAPRI的膜轉(zhuǎn)位；GRD為CAPRI功能結(jié)構(gòu)域，具有RasGAP與RapGAP酶活性，可以使小G蛋白由GTP結(jié)合形式水解為GDP結(jié)合形式，從而使小G蛋白失活�，F(xiàn)有的研究結(jié)果表明：當(dāng)細(xì)胞在ATP、Histamine的刺激下， CAPRI從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)位至細(xì)胞膜，并激活CAPRI的RasGAP與RapGAP活性。但是在不同的細(xì)胞中，GFP-CAPRI的膜轉(zhuǎn)位存在差異，例如HeLa細(xì)胞膜中，GFP-CAPRI有較明顯的半衰期，而HEK293細(xì)胞膜上觀察不到這種現(xiàn)象。本研究旨在探討在HEK293細(xì)胞中毒胡蘿卜素（Tg）是否可以引起GFP-CAPRI的膜轉(zhuǎn)位以及GFP-CAPRI膜轉(zhuǎn)位與SOC通道之間的關(guān)系。研究結(jié)果顯示，毒胡蘿卜素（Tg）刺激HEK293細(xì)胞時誘導(dǎo)的SOCE參與CAPRI的膜轉(zhuǎn)位。SOCE通道非特異阻滯劑2-APB，Gd3+以及使用sh-STIM1敲除內(nèi)源性STIM1表達(dá)時，，均明顯減弱Tg誘導(dǎo)的GFP-CAPRI膜轉(zhuǎn)位，STIM1持續(xù)活化突變體（constitutive active）STIM1D76A即使不用毒胡蘿卜素（Tg）刺激，亦可引起GFP-CAPRI膜轉(zhuǎn)位。同時，在原代星型膠質(zhì)細(xì)胞中，ATP不能夠顯著滅活Rap-GTP，而毒胡蘿卜素（Tg）刺激細(xì)胞可以使內(nèi)源性RapGTP結(jié)合形式減少，SOCE通道非特異性抑制劑Gd3+可以部分抑制上述現(xiàn)象。以上研究結(jié)果表明：HEK293細(xì)胞中SOCE通道參與Tg引起的GFP-CAPRI的膜轉(zhuǎn)位。在原代星型膠質(zhì)細(xì)胞中，SOCE通道可能通過CAPRI，調(diào)節(jié)Ras-MAPK信號通路。
【關(guān)鍵詞】：CAPRI SOCE STIM1
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-7
• ABSTRACT7-8
• 前言8-9
• 材料與方法9-16
• 結(jié)果16-21
• 討論21-23
• 參考文獻(xiàn)23-27
• 綜述27-41
• 參考文獻(xiàn)34-41
• 致謝41

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：910650