發(fā)布時(shí)間：2017-09-24 02:18

  本文關(guān)鍵詞：廣州地區(qū)人呼吸道合胞病毒、副流感病毒及偏肺病毒等常見(jiàn)副粘病毒流行病學(xué)研究

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【摘要】：目的 急性呼吸道感染為臨床上常見(jiàn)疾病，兒童及老年人發(fā)病率較高，病原體種類多。病毒感染與急性呼吸道感染發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)。副粘病毒科中呼吸道合包病毒（RSV），副流感病毒(PIVs)和偏肺病毒(hMPV)是常見(jiàn)的重要呼吸道病原體，可引起多種呼吸道疾病。目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法以熒光定量PCR和免疫熒光法為主，這2種方法有快速簡(jiǎn)便特點(diǎn)，但無(wú)法獲取病毒毒株，尤其hMPV，限制了對(duì)病毒進(jìn)一步的研究。因此建立3種副粘病毒分離培養(yǎng)方法獲取毒株，尤其是hMPV，，為今后研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)，具有十分重要的意義。 據(jù)報(bào)道3種副粘病毒在不同國(guó)家或地區(qū)不同人群中的發(fā)病率和所致疾病嚴(yán)重程度存在差異。廣州地區(qū)地處亞熱帶，常見(jiàn)3種副粘病毒感染，但受人口衛(wèi)生環(huán)境等因素影響，病毒的流行周期及所致疾病嚴(yán)重程度可能存在差異。但關(guān)于這方面的流行病學(xué)研究仍然甚少，尤其是較晚發(fā)現(xiàn)的hMPV。甚少研究同時(shí)囊括3種副粘病毒進(jìn)行流行病學(xué)研究，比較感染臨床特征，探索病毒間的差異。而且過(guò)去副粘病毒研究對(duì)象以兒童患者為主，較少闡述病毒對(duì)成人的影響，比較二者之間病程差異。 本研究通過(guò)收集廣州地區(qū)急性呼吸道感染患者的鼻咽拭子，建立適用于3種副粘病毒的細(xì)胞分離培養(yǎng)方法，尤其是hMPV。同時(shí)描述3種副粘病毒在廣州地區(qū)的流行病學(xué)特點(diǎn)，比較RSV、PIVs和hMPV臨床特征，探索兒童與成人及3種病毒之間的臨床特征差異。 方法 1.病例收集 收集2009.7-2011.9間廣州地區(qū)急性呼吸道感染（ARTIs）患者的鼻咽拭子。熒光定量PCR（Real Time-PCR）檢測(cè)常見(jiàn)呼吸道病毒。 2.病毒分離培養(yǎng)方法建立 挑選RSV、PIVs和hMPV陽(yáng)性標(biāo)本各60份用于病毒細(xì)胞分離培養(yǎng)。本研究采用離心培養(yǎng)法進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)。RSV和PIVs接種細(xì)胞后（HEp-2或LLC-MK2細(xì)胞）3,000rpm離心1h，連續(xù)培養(yǎng)5-10d。由于hMPV較難培養(yǎng)，分離方法有所不同，使用離心培養(yǎng)法基礎(chǔ)上，接種Vero-E6細(xì)胞，且盲傳3代，每代培養(yǎng)18d。同時(shí)利用hMPV毒株比較不同病毒培養(yǎng)方法(轉(zhuǎn)鼓、離心和靜置培養(yǎng)法)對(duì)病毒復(fù)制效率影響。 3.流行病學(xué)研究 統(tǒng)計(jì)3種副粘病毒感染率及描述病毒人群和季節(jié)分布，整理患者信息（相關(guān)個(gè)人信息、實(shí)驗(yàn)室檢查信息和臨床特征等），應(yīng)用卡方檢驗(yàn)和Fisher確切概率法比較患者的臨床癥狀等，探索兒童與成人及3種病毒之間的臨床特征差異。 結(jié)果 本研究從2009年7月-2011年9月開(kāi)始收集急性呼吸道感染患者的呼吸道標(biāo)本，共27個(gè)月，Real Time-PCR檢測(cè)5424例標(biāo)本，5111例標(biāo)本符合入選標(biāo)準(zhǔn)，兒童患者（≤15歲）標(biāo)本3089例，成人患者（≥15歲）標(biāo)本2022例，男女比例是3094:2027。 5111例標(biāo)本中，檢出hMPV陽(yáng)性175例，占3.4%。RSV陽(yáng)性576例（10.4%），高于PIV，205例（4.0%）。成功分離出14株RSV、19株P(guān)IVs和3株hMPV。92.2%副粘病毒感染患者是兒童，兒童3種副粘病毒感染率28.5%（956/3089），高于成人患者3.7%（75/2022）。兒童患者中，3種副粘病毒患者的平均年齡，RSVPIVshMPV（RSV vs hMPV，p0.001）。與兒童患者不同，成人患者平均年齡RSVPIVshMPV。 通過(guò)27個(gè)月對(duì)急性呼吸道感染患者常見(jiàn)副粘病毒的監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，廣州地區(qū)3種副粘病毒流行周期是相互重疊，RSV為主導(dǎo)。RSV和hMPV的流行季節(jié)較為相似，與Influenza流行周期也重疊。RSV和hMPV流行高峰出現(xiàn)在晚冬和初春，hMPV流行高峰一般會(huì)比RSV晚1個(gè)月出現(xiàn)，PIVs以PIV1和PIV3檢出為主，占89.7%。PIV1和PIV3流行高峰相互重疊，夏季和秋季。 副粘病毒患者混合感染其他呼吸道病毒現(xiàn)象較為常見(jiàn)， Influenza、EV、HCoV和MP4種病原體是的3種病毒患者最�；旌细腥酒渌粑啦《�。比較3種副粘病毒臨床特征，兒童患者臨床癥狀較嚴(yán)重，成人患者病情較輕。兒童患者的臨床特征以發(fā)熱，咳嗽，咳痰，喘息，腹瀉，納差等為主。RSV與PIVs患兒常發(fā)展為肺炎，hMPV常發(fā)展為支氣管肺炎。≤3歲的兒童比較中，RSV患者表現(xiàn)咳痰和厭吃更多，而PIVs患兒乏力和咽痛癥狀比其他2種病毒顯著。發(fā)熱和肺部Up音是hMPV患兒較顯著的臨床特征。成年人以流感樣癥狀為主，hMPV患者全身癥狀比RSV患者明顯。 結(jié)論 1、建立RSV、PIVs和hMPV分離培養(yǎng)方法，應(yīng)用離心培養(yǎng)法能較有效分離出RSV和PIVs。同時(shí)離心培養(yǎng)法與盲傳聯(lián)合應(yīng)用可實(shí)現(xiàn)hMPV分離培養(yǎng)，適合臨床病毒實(shí)驗(yàn)室。 2、描述了廣州地區(qū)RSV、PIVs和hMPV的流行病學(xué)特點(diǎn)，3種副粘病毒中，以RSV感染率最高，占主導(dǎo)。3種病毒流行周期相互重疊�！�3歲的兒童是病毒的主要感染人群。 3、通過(guò)比較3種副粘病毒患者臨床特征發(fā)現(xiàn)，兒童比成人嚴(yán)重。 RSV、PIVs和hMPV臨床特征及病情發(fā)展存在差異。與RSV和PIVs相比， hMPV同樣是十分重要的病原體，不能被忽視。
【關(guān)鍵詞】：呼吸道合胞病毒 副流感病毒 偏肺病毒 分離培養(yǎng) 臨床特征
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R373
【目錄】：

• 英文縮寫表3-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-10
• 前言10-14
• 第一部分 常見(jiàn)副粘病毒分離培養(yǎng)方法建立14-32
• 1.1. 實(shí)驗(yàn)材料14-17
• 1.2. 實(shí)驗(yàn)方法17-23
• 1.3. 結(jié)果23-28
• 1.4 討論28-32
• 第二部分 廣州地區(qū)常見(jiàn)副粘病毒流行病學(xué)研究和臨床癥狀比較32-46
• 2.1. 實(shí)驗(yàn)材料32
• 2.2. 實(shí)驗(yàn)方法32-33
• 2.3. 結(jié)果33-41
• 2.4 討論41-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 綜述53-63
• 參考文獻(xiàn)58-63
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果（含發(fā)表的學(xué)術(shù)論文）63-64
• 致謝64-66

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 馮旰珠;周鋒;黃茂;姚X;;熱毒寧抗呼吸道合胞病毒(RSV,Long株)作用體外實(shí)驗(yàn)研究[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年09期

本文編號(hào)：908790