發(fā)布時(shí)間：2017-09-22 11:38

  本文關(guān)鍵詞：小分子干擾RNA沉默高遷移率族蛋白B1抑制肝星狀細(xì)胞Ⅰ型和Ⅲ型膠原合成

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【摘要】：目的研究小分子干擾RNA(si RNA)干擾高遷移率族蛋白B1(HMGB 1)表達(dá)對(duì)肝星狀細(xì)胞(HSC)Ⅰ型和Ⅲ型膠原表達(dá)的影響。方法將化學(xué)合成的HMGB 1基因特異性si RNA以脂質(zhì)體包裹,轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞,設(shè)陰性對(duì)照和空白對(duì)照,抽提細(xì)胞總RNA和蛋白質(zhì),采用Western blot法檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ型和Ⅲ型膠原表達(dá)情況;采用細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)Ⅰ型和Ⅲ型膠原表達(dá)與定位;采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)培養(yǎng)上清液中Ⅰ型和Ⅲ型膠原水平。結(jié)果轉(zhuǎn)染HMGB 1基因特異性si RNA的HSC-T6細(xì)胞Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白水平顯著下調(diào),免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)也提示轉(zhuǎn)染si RNA后細(xì)胞內(nèi)Ⅰ型和Ⅲ型膠原水平較對(duì)照組明顯降低;在培養(yǎng)72 h時(shí),上清液Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原水平分別較對(duì)照組下降了(46.36±3.82)%和(41.92±3.58)%(F=33.14,P0.01;F=27.56,P0.01)。結(jié)論HMGB 1特異性si RNA能高效抑制HSC-T6細(xì)胞膠原的合成和分泌,因而可能具有預(yù)防和治療肝纖維化的潛力。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院消化內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 肝星狀細(xì)胞 小分子干擾RNA 高遷移率族蛋白B 膠原
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):81200279)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 肝星狀細(xì)胞(Hepatic stellate cells,HSC)的激活是肝纖維化發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。HSC激活的始動(dòng)因素是肝臟損傷和炎癥反應(yīng),而HSC激活的過程包括早期啟動(dòng)和后期持續(xù)激活,激活的“持久性”是維持HSC激活狀態(tài)及產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular ma-trix,ECM),尤其是I型和Ⅲ型膠原的必

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 蔣玉鳳;周德江;張建軍;黃飛;史小玲;;肝纖維化相關(guān)細(xì)胞因子雙重RNA干擾質(zhì)粒的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染肝星狀細(xì)胞研究[J];實(shí)用肝臟病雜志;2012年06期

2 張瑩;孔賀利;張建軍;劉梅;任鋒;劉霜;陳煜;段鐘平;鄭素軍;;shRNA重組慢病毒沉默SMAD3對(duì)大鼠肝纖維化的抑制作用[J];實(shí)用肝臟病雜志;2014年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳曉麗;李杭;陳天武;;肝纖維化的磁共振定量診斷與分期研究進(jìn)展[J];國(guó)際醫(yī)學(xué)放射學(xué)雜志;2013年06期

2 何志國(guó);趙永忠;盧青;周英瓊;肖緒華;劉，

本文編號(hào)：900628