本文關(guān)鍵詞：體外誘導(dǎo)人羊膜上皮細(xì)胞分化為結(jié)膜上皮樣細(xì)胞的實驗研究

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【摘要】：目的：建立體外培養(yǎng)人羊膜上皮細(xì)胞（HAECs）和兔結(jié)膜上皮細(xì)胞的方法，通過將兩種細(xì)胞共培養(yǎng)，觀察并檢測是否能將人羊膜上皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化為結(jié)膜上皮樣細(xì)胞。 方法：①分別采用酶消化法和組織塊法獲得HAECs和兔結(jié)膜上皮細(xì)胞，并對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察；②將HAECs和兔結(jié)膜上皮細(xì)胞在Transwell非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)中共培養(yǎng)10天，，以誘導(dǎo)HAECs分化；③通過倒置顯微鏡和原子力顯微鏡對誘導(dǎo)前后的HAECs進(jìn)行形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)比較，對誘導(dǎo)前后的HAECs進(jìn)行PAS染色、HE染色，免疫熒光法檢測誘導(dǎo)前后HAECs中CK4、MUC4、MUC5AC的表達(dá)，實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測分化細(xì)胞MUC4、MUC5AC mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：共培養(yǎng)后的人羊膜上皮細(xì)胞和兔結(jié)膜上皮細(xì)胞形態(tài)較為相似，誘導(dǎo)后的HAECs中可見少量PAS陽性細(xì)胞，細(xì)胞免疫熒光法檢測到誘導(dǎo)后HAECs中CK4、MUC4、MUC5AC呈陽性表達(dá)，qRT-PCR檢測到分化后細(xì)胞MUC4、MUC5AC mRNA表達(dá)水平較誘導(dǎo)前上調(diào)。 結(jié)論：HAECs在與兔結(jié)膜上皮細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)條件下，可以向結(jié)膜上皮樣細(xì)胞和杯狀細(xì)胞轉(zhuǎn)分化。
【關(guān)鍵詞】：人羊膜上皮細(xì)胞 共培養(yǎng) 轉(zhuǎn)分化 兔結(jié)膜上皮細(xì)胞 組織工程結(jié)膜
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-5
• 目錄5-6
• 前言6-9
• 1．結(jié)膜的組織結(jié)構(gòu)和功能6
• 2. 結(jié)膜重建的主要治療方法6
• 3. 組織工程結(jié)膜的研究進(jìn)展6-8
• 4. 人羊膜上皮細(xì)胞的干細(xì)胞特性及其在結(jié)膜重建的應(yīng)用前景8-9
• 第一部分 人羊膜上皮細(xì)胞和兔結(jié)膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定9-17
• 材料與方法10-15
• 結(jié)果15-16
• 討論16-17
• 第二部分 誘導(dǎo)人羊膜上皮細(xì)胞向結(jié)膜上皮樣細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及鑒定17-27
• 材料與方法18-24
• 結(jié)果24-25
• 討論25-27
• 全文結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-34
• 附圖34-47
• 在學(xué)期間發(fā)表論文47-48
• 致謝48

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：898755