本文關(guān)鍵詞：小鼠胚胎成纖維細(xì)胞對體外培養(yǎng)肺泡上皮Ⅱ型細(xì)胞干性的維持作用

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【摘要】：目的： 1.了解小鼠胚胎成纖維細(xì)胞作為滋養(yǎng)層對肺泡上皮II型細(xì)胞干性的維持作用。 2.建立肺泡上皮II型細(xì)胞使用滋養(yǎng)層的體外培養(yǎng)及傳代的技術(shù)方法。 3.了解白血病抑制因子在AT2細(xì)胞的體外培養(yǎng)中對其生長狀態(tài)以及其干性維持的作用。 方法： 用10ug/ml絲裂霉素C處理原代小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（Mouseembryonic fibroblast cell，，MEF）使細(xì)胞失去有絲分裂能力的同時保持細(xì)胞功能活性。用處理后的MEF作滋養(yǎng)層來培養(yǎng)肺泡上皮Ⅱ型細(xì)胞（Alveolar type II cells，AT2），通過免疫熒光分別鑒定原代AT2細(xì)胞、傳代后使用滋養(yǎng)層培養(yǎng)的AT2細(xì)胞，以及傳代后不使用滋養(yǎng)層的AT2細(xì)胞。染色AT1標(biāo)志物水通道蛋白5（Proteins-aquaporin5，AQP5）和AT2標(biāo)志物肺泡表面活性蛋白C（Surfactant protein C，SPC）觀察傳代后使用了滋養(yǎng)層和未使用滋養(yǎng)層的AT2細(xì)胞染色情況，對比二者的不同。 結(jié)果： 1.傳代后接種在MEF上的AT2細(xì)胞能夠在培養(yǎng)第3天時形成克隆，并且能夠連續(xù)傳至第3代，而傳代后未接種在MEF上培養(yǎng)的AT2細(xì)胞并沒有形成鋪路石樣克隆生長，并且細(xì)胞生長形態(tài)扁平鋪張。 2.免疫熒光鑒定顯示傳代后接種在MEF滋養(yǎng)層上的細(xì)胞為SPC陽性AQP5陰性，而未接種在MEF上培養(yǎng)的細(xì)胞為SPC陰性AQP5陽性。 結(jié)論： 使用絲裂霉素C處理的MEF作為滋養(yǎng)層培養(yǎng)AT2細(xì)胞能夠在一定程度上維持AT2細(xì)胞的干性。
【關(guān)鍵詞】：小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 滋養(yǎng)細(xì)胞 肺泡上皮II型細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-11
• 1 材料與方法11-21
• 2 結(jié)果21-22
• 3 討論22-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻27-30
• 附插圖30-36
• 文獻綜述36-42
• 參考文獻40-42
• 致謝42-43
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況43-44
• 攻讀學(xué)位期間參研課題情況44-45

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：893471