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小鼠胚胎成纖維細胞對體外培養(yǎng)肺泡上皮Ⅱ型細胞干性的維持作用

發(fā)布時間:2017-09-21 08:36

  本文關鍵詞:小鼠胚胎成纖維細胞對體外培養(yǎng)肺泡上皮Ⅱ型細胞干性的維持作用


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【摘要】:目的: 1.了解小鼠胚胎成纖維細胞作為滋養(yǎng)層對肺泡上皮II型細胞干性的維持作用。 2.建立肺泡上皮II型細胞使用滋養(yǎng)層的體外培養(yǎng)及傳代的技術方法。 3.了解白血病抑制因子在AT2細胞的體外培養(yǎng)中對其生長狀態(tài)以及其干性維持的作用。 方法: 用10ug/ml絲裂霉素C處理原代小鼠胚胎成纖維細胞(Mouseembryonic fibroblast cell,,MEF)使細胞失去有絲分裂能力的同時保持細胞功能活性。用處理后的MEF作滋養(yǎng)層來培養(yǎng)肺泡上皮Ⅱ型細胞(Alveolar type II cells,AT2),通過免疫熒光分別鑒定原代AT2細胞、傳代后使用滋養(yǎng)層培養(yǎng)的AT2細胞,以及傳代后不使用滋養(yǎng)層的AT2細胞。染色AT1標志物水通道蛋白5(Proteins-aquaporin5,AQP5)和AT2標志物肺泡表面活性蛋白C(Surfactant protein C,SPC)觀察傳代后使用了滋養(yǎng)層和未使用滋養(yǎng)層的AT2細胞染色情況,對比二者的不同。 結果: 1.傳代后接種在MEF上的AT2細胞能夠在培養(yǎng)第3天時形成克隆,并且能夠連續(xù)傳至第3代,而傳代后未接種在MEF上培養(yǎng)的AT2細胞并沒有形成鋪路石樣克隆生長,并且細胞生長形態(tài)扁平鋪張。 2.免疫熒光鑒定顯示傳代后接種在MEF滋養(yǎng)層上的細胞為SPC陽性AQP5陰性,而未接種在MEF上培養(yǎng)的細胞為SPC陰性AQP5陽性。 結論: 使用絲裂霉素C處理的MEF作為滋養(yǎng)層培養(yǎng)AT2細胞能夠在一定程度上維持AT2細胞的干性。
【關鍵詞】:小鼠胚胎成纖維細胞 滋養(yǎng)細胞 肺泡上皮II型細胞
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R329.2
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照5-6
  • 摘要6-8
  • ABSTRACT8-10
  • 前言10-11
  • 1 材料與方法11-21
  • 2 結果21-22
  • 3 討論22-26
  • 結論26-27
  • 參考文獻27-30
  • 附插圖30-36
  • 文獻綜述36-42
  • 參考文獻40-42
  • 致謝42-43
  • 攻讀學位期間發(fā)表論文情況43-44
  • 攻讀學位期間參研課題情況44-45

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 錢莘;安江洪;敖緒軍;孫建國;陳正堂;;小鼠支氣管肺泡干細胞的培養(yǎng)鑒定和分選[J];第三軍醫(yī)大學學報;2008年09期

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3 韓軍濤,陳璧;胚胎干細胞滋養(yǎng)層細胞的培養(yǎng)及其預處理條件[J];西北國防醫(yī)學雜志;2003年02期

4 袁國林,鄒萍,程范軍,劉凌波,伍曉菲,王紅祥;胚胎成纖維細胞與含LIF的培養(yǎng)體系支持鼠造血祖細胞體外擴增[J];中國實驗血液學雜志;2004年06期



本文編號:893471

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