本文關(guān)鍵詞：MicroRNA在造血過程中其上下游調(diào)控因子的研究

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【摘要】：MicroRNA是一類長度在22個核苷酸左右的內(nèi)源非編碼RNA,廣泛存在于動物,植物,病毒等多種生物體中。第一個被發(fā)現(xiàn)的mircroRNA lin-4通過與lin-4基因3’端非編碼區(qū)互補配對從而使其蛋白表達水平降低。已有很多文獻報道m(xù)iRNA參與許多細胞生命活動,包括造血。造血是指造血干細胞分化形成各種血細胞的過程,在這個過程中,很多調(diào)節(jié)因子相互共同控制這一分化過程。已經(jīng)有很多報道m(xù)iRNA在造血過程中起到重要的作用。我們通過前面的研究和相關(guān)文獻報道,確定可能在造血過程起到作用的microRNA,分別是mir-144/451,mir-142和mir-223。雖然miRNA在造血中的功能己近確定,但其上下游調(diào)控的靶基因還不是很清楚。我們利用生物信息學(xué)和其他相關(guān)文獻報道,篩選出可能的上下游基因,再通過實驗手段進一步驗證。最后我們發(fā)現(xiàn)了mir-142的下游靶基因racl,racl是一個GTPase蛋白家族的一員,參與許多細胞生命活動。在mel細胞紅系分化的過程中,mir-142有可能通過下調(diào)racl的表達抑制了mel的紅系分化過程。
【關(guān)鍵詞】：MicroRNA造血 上下游調(diào)控因子 Mir-142-3p Rac1 Mel
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R331
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 第一章 綜述9-16
• 第一節(jié) MicroRNA的形成及生物學(xué)功能9-11
• 第二節(jié) MicroRNA與造血11-13
• 第三節(jié) 造血中的轉(zhuǎn)錄因子-microRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)13-16
• 第二章 實驗材料和方法16-30
• 第一節(jié) 實驗材料16-19
• 1.細胞株16
• 2.細胞培養(yǎng)16-17
• 3.質(zhì)粒和引物序列17-18
• 4.抗體18
• 5.實驗試劑18-19
• 6.實驗儀器19
• 第二節(jié) 試驗方法19-30
• 1.細胞株19
• 2.質(zhì)粒的構(gòu)建19-20
• 3.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)20-21
• 4.RNA的提取及逆轉(zhuǎn)錄21-22
• 5.實時定量PCR技術(shù)22-23
• 6.蛋白質(zhì)兔疫印跡（Western Blotting, WB)技術(shù)23-27
• 7.穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系的構(gòu)建27-29
• 8.Luciferase assay 技術(shù)29
• 9.聯(lián)苯胺染色29-30
• 第三章 實驗結(jié)果與分析30-39
• 第一部分 尋找造血相關(guān)的microRNA的上游轉(zhuǎn)錄因子30-33
• 第一節(jié) 建立K562穩(wěn)定過表達細胞系30-31
• 第二節(jié) 在穩(wěn)定過表達細胞系中檢測miRNA的表達情況31-33
• 第二部分 尋找microRNA在造血中的下游IE基因33-39
• 第一節(jié) 利用網(wǎng)站預(yù)測候選IE基因33-35
• 第二節(jié) 生物學(xué)實驗方法鑒定miRNA下游的靶基因35-39
• 第四章 總結(jié)與討論39-40
• 參考文獻40-44
• 致謝44

【共引文獻】

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4 楊q，

本文編號：889088