發(fā)布時間：2017-09-18 05:02

  本文關(guān)鍵詞：緩釋的堿性成纖維細(xì)胞生長因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子對于水凝膠中內(nèi)皮祖細(xì)胞集落形成單位的影響

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【摘要】：目的研究堿性成纖維細(xì)胞生長因子(b FGF)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)對于水凝膠中內(nèi)皮祖細(xì)胞集落形成單位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影響。方法制備分別含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝膠,分為A、B 2組。同時包埋EPCs,流式細(xì)胞儀檢測培養(yǎng)7 d后的細(xì)胞存活率,倒置顯微鏡觀察EPCs的生長及長入水凝膠的情況并計數(shù),分析b FGF、VEGF對EPCs存活率的影響。培養(yǎng)7 d后用定量實時聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測總RNA量,并檢測PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表達。然后用酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)法檢測2組去水凝膠的培養(yǎng)上清液中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表達,并用熒光法檢測水凝膠的降解速度,b FGF、VEGF對EPCs釋放MMP的影響。最后以雞胚絨毛尿囊膜(CAM)技術(shù)檢測含有b FGF、VEGF的水凝膠體外誘導(dǎo)血管新生的作用。結(jié)果 A組水凝膠,消化7 d后,流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)39.43%的EPCs尚存,B組4.14%;兩組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。水凝膠表面種植EPCs可觀察到的細(xì)胞數(shù)A組為378.333 3,B組為302.333 3;兩組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。ELISA法檢測2組中MMP-2、MMP-9的表達,發(fā)現(xiàn)水凝膠中MMP-2和MMP-9隨時間推移在72 h內(nèi)持續(xù)釋放,A組較B組釋放濃度顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。熒光法檢測水凝膠的降解發(fā)現(xiàn),從第1天開始,A組水凝膠降解百分比急速升高,之后增長速度減緩,而B組呈繼續(xù)增長之勢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。定量RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)A組較B組基因Ct值高,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。CAM技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)A組(空白組)、B組(不含b FGF、VEGF組)、C組(含b FGF、VEGF組)的新生血管總數(shù)分別為9、25、36;兩兩比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論體外研究證實,緩釋的b FGF、VEGF不僅能促進水凝膠中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,還能刺激血管新生。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)
【關(guān)鍵詞】： 堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF) 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF) 內(nèi)皮祖細(xì)胞集落形成單位(EPCs) 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP) 雞胚絨毛尿囊膜(CAM)技術(shù) 血管新生
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81141077)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 血管新生(angiogenesis)是在原有血管網(wǎng)基礎(chǔ)上,通過血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)或內(nèi)皮細(xì)胞形成新生血管的復(fù)雜過程[1]。VEGF促進血管內(nèi)皮細(xì)胞生長并形成血管,構(gòu)成血管網(wǎng),加快側(cè)支循環(huán)的建立,改善局部血液供應(yīng)情況,從而起到治療局部缺血的作

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄭凱;梅斌;;Effects of Exogenous Sonic Hedgehog Peptide on Proliferation, Adhesion, Migration of Endothelial Progenitor Cells from Peripheral Blood[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2013年03期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄭凱;項帥;董漢華;王偉;孫以民;梅斌;;大鼠食管靜脈曲張模型中VEGF參與內(nèi)皮祖細(xì)胞的調(diào)控[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年06期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王寧;糖尿病對內(nèi)皮祖細(xì)胞不同細(xì)胞亞群數(shù)量及EPCs表達TLR4的影響以及SDF-1對EPCs移植療效的影響研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 石皖榮;牛乳鐵蛋白抗菌肽抗人肺癌細(xì)胞增殖及其作用機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

2 劉棟;陽離子抗癌肽HPRP-A1體外誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡的實驗研究[D];吉林大學(xué);2014年

3 王曉茜;抗微生物肽和抗癌肽的特征信息提取及預(yù)測算法研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 朱智;陳剛;李興睿;殷茜;楊志芳;易繼林;;Endothelial Progenitor Cells Homing to the Orthotopic Implanted Liver Tumor of Nude Mice[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2012年05期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 荊明新;李盈祺;謝寶春;;不同刺激因子對狗骨髓CFU-C的影響[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1985年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郎筠淵;翟海峰;吳萍;王季石;孫志強;陸林;;大鼠慢性暴露甲基苯丙胺后戒斷期的免疫調(diào)節(jié)[A];貴州省2008年血液學(xué)年會論文匯編[C];2008年

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本文編號：873515