本文關鍵詞：抗IL-4全人源單鏈抗體的篩選和鑒定

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【摘要】：目的表達人白細胞介素4(IL-4),從全人源單鏈抗體(sc Fv)文庫中篩選抗IL-4全人源sc Fv并鑒定其特異性。方法采用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導p ET102/IL-4/BL21表達IL-4,進行純化鑒定。利用全人源噬菌體抗體文庫表達抗IL-4全人源sc Fv,用表達的IL-4作為抗原,篩選陽性克隆菌株經(jīng)PCR、酶切及測序鑒定。采用斑點雜交檢測抗IL-4sc Fv的特異性。結果表達的IL-4融合蛋白相對分子質量(Mr)為27 000。采用該抗原篩選出了表達抗IL-4的陽性克隆,PCR結果顯示,在約1000 bp處有擴增的目的條帶。酶切結果顯示,有2株克隆的指紋圖譜相同,其余均不同。選取指紋圖譜不同的且與IL-4結合能力強的4個sc Fv的克隆進行測序,顯示有3個的序列正確。斑點雜交顯示,這3株克隆表達的sc Fv均具有特異性。結論成功篩選到抗IL-4全人源sc Fv。
【作者單位】： 四川醫(yī)科大學免疫學教研室;四川醫(yī)科大學醫(yī)學病原生物學與免疫學實驗室;
【關鍵詞】： 白細胞介素(IL-) 全人源單鏈抗體 篩選 鑒定
【基金】：四川省青年基金(2012JQ0018) 四川省衛(wèi)生廳項目(130259) 瀘州市科技局項目(2012-177)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 白細胞介素4(interleukin 4,IL-4)、IL-13是由2型輔助性T(T helper 2,Th2)細胞、肥大細胞、嗜酸性粒細胞等細胞分泌的細胞因子,與2型炎癥反應有關,在多種疾病如哮喘、過敏性皮炎、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病等的發(fā)生機制中發(fā)揮重要作用[1-6]。研究顯示[7-12,4],IL-4、IL-13

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 年四季;黃黎;王栩;鄔于川;袁青;;人源性天然噬菌體展示文庫的構建及鑒定[J];中國免疫學雜志;2010年06期

【共引文獻】

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王欣梅;大腸桿菌f2噬菌體分子印跡膜的制備、評價和應用[D];華中科技大學;2011年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王慧,蔭俊,侯曉軍,邢洪光;抗肉毒毒素A人源單鏈抗體在酵母細胞中的分泌表達[J];微生物學通報;2005年02期

2 范小波;茍麗霞;劉昭;沈子龍;劉乃豐;吳國球;奚濤;;一種新型結締組織生長因子人源單鏈抗體的可溶性表達以及分離純化[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2010年04期

3 鐘彥偉,成軍,劉妍,董菁,楊繼珍,張玲霞;丙型肝炎病毒非結構蛋白3人源單鏈抗體的篩選與鑒定[J];中華傳染病雜志;2000年02期

4 周云;包林;金秋;張黎;蔡雪婷;盧悟廣;曹鵬;焦永軍;張建平;;抗人結締組織因子人源單鏈抗體的篩選、表達及活性鑒定[J];山東醫(yī)藥;2013年20期

5 段金柱,齊財,韓偉,王戰(zhàn)會,靳剛,閻錫蘊;抗SARS人源單鏈抗體H12的表達及復性[J];生物工程學報;2005年05期

6 何紅霞,貌盼勇,朱雷,侯俊,洪世雯,閻錫蘊;抗人免疫缺陷病毒1型gp120人源單鏈抗體的表達[J];中華實驗和臨床病毒學雜志;1998年03期

7 李富祥;張雅麗;丁世才;張以芳;王澤華;馬嵐;;變形鏈球菌重組表面蛋白(rA-P)人源單鏈抗體的篩選及其活性檢測[J];中國人獸共患病學報;2010年03期

8 李桂英;朱迅;周立宏;鄒德生;郝東云;田宇;杜柏榕;;特異性抗人cyclin D1人源單鏈抗體的篩選[J];中國實驗診斷學;2006年11期

9 袁青;黃黎;郭夕源;葉迎春;年四季;;IL-4、IL-13蛋白表達及抗IL-4、IL-13人源單鏈抗體的篩選[J];中國免疫學雜志;2013年06期

10 王慧,史晶,孟露露,李佩真,白瑜,蔭俊;抗A型肉毒毒素人源單鏈抗體融合蛋白的重組設計[J];微生物學通報;2005年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王媚娘;王天時;徐洪亮;武艷;李兵直;王文涵;李桂英;;抗CDK4人源單鏈抗體的作用機制研究[A];中國的遺傳學研究——遺傳學進步推動中國西部經(jīng)濟與社會發(fā)展——2011年中國遺傳學會大會論文摘要匯編[C];2011年

2 許晶晶;王磊;王琪;馮晶;曹玉華;陳勇;楊丹;李桂英;;抗CDK4人源單鏈抗體的原核表達、純化及活性分析[A];中國遺傳學會第八次代表大會暨學術討論會論文摘要匯編（2004-2008）[C];2008年

3 童貽剛;;從大容量噬菌體抗體庫中篩選抗Acr蛋白人源單鏈抗體[A];2012全國臨床微生物與感染免疫學術研討會論文集[C];2012年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 許晶晶;抗CDK4人源單鏈抗體的原核表達、純化及活性分析[D];吉林大學;2009年

2 王媚娘;抗CDK4人源單鏈抗體作用機制的研究[D];吉林大學;2011年

3 曹玉華;抗cyclin D1人源單鏈抗體AD9的原核表達、純化及活性研究[D];吉林大學;2008年

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本文編號：871008