發(fā)布時間：2017-09-17 08:08

  本文關(guān)鍵詞：前列腺素E1在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)人正常肝細(xì)胞株L02細(xì)胞凋亡中的作用及相關(guān)機(jī)制的探討

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【摘要】：目的：近幾年的研究結(jié)果表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress, ER stress)是多種肝臟疾病中的常見病理現(xiàn)象,脂肪酸、酒精、病毒、藥物等因素可誘導(dǎo)肝細(xì)胞ER stress,強(qiáng)烈而持久的ER stress誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡。既往研究證實(shí)前列腺素E1(prostaglandin E1, PGE1)具有保護(hù)肝細(xì)胞凋亡、促進(jìn)肝細(xì)胞增殖等作用,但對其在ER stress誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡中的作用尚不清楚。本研究的目的是探討PGE1對ERstress誘導(dǎo)正常人肝細(xì)胞L02細(xì)胞凋亡中的作用及相關(guān)機(jī)制。 方法：1、以正常人肝細(xì)胞株L02細(xì)胞為研究對象,采用不同濃度毒胡蘿卜素(thapsigargin, TG)誘導(dǎo)L02細(xì)胞ER stress及細(xì)胞凋亡,通過流式細(xì)胞儀檢測不同時間點(diǎn)L02細(xì)胞的凋亡率；2、用1μM TG誘導(dǎo)L02細(xì)胞ER stress及細(xì)胞凋亡,同時加用0.5gM及1μM濃度PGE1,觀察不同時間點(diǎn)PGE1對TG誘導(dǎo)L02細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用,用4-苯基丁酸(4-phenyl butyric acid, PBA)作陽性對照；3、用1μMTG誘導(dǎo)ER stress,通過蛋白免疫印跡方法(western blotting, WB)檢測葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose regulated protein78, GRP78)、剪切型X盒結(jié)合蛋白1(spliced X-box binding protein1, sXBP-1)、CHOP (C/EBP-homologous protein)的表達(dá)判斷ER stress;4、用WB法檢測PGE1對TG誘導(dǎo)的L02細(xì)胞GRP78、sXBP-1、CHOP蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用；5、用1μM PGE1作用于L02細(xì)胞,用WB法檢測不同時間點(diǎn)肝細(xì)胞內(nèi)GRP78的表達(dá)。 結(jié)果：1、1μM TG作用于L02細(xì)胞6h后凋亡率顯著升高,至48h凋亡率達(dá)到32.66%,各時間點(diǎn)與空白對照(NC)比較差異均有顯著性意義(P0.01)。1μM、2μM及3μMTG在48h劑量依賴性增加L02細(xì)胞凋亡率,相差有顯著性意義(P0.01)；2、0.5μM及1μMPGE1、5mM及10mM PBA在48h呈劑量依賴性降低TG誘導(dǎo)L02細(xì)胞的凋亡率(P0.01),1μMPGE1及10mMPBA在6h、24h及48h均顯著降低TG誘導(dǎo)的L02細(xì)胞凋亡率(P0.01)；3.1μMTG作用于L02細(xì)胞后,GRP78、sXBP1、CHOP的表達(dá)顯著增加,PGEl在作用6h后明顯增加TG誘導(dǎo)的GRP78、sXBP1、CHOP的表達(dá),隨著時間的延長GRP78、sXBP1、CHOP的表達(dá)逐漸減弱,48h后3種蛋白的表達(dá)弱于TG組；4、PGE1顯著誘導(dǎo)L02細(xì)胞GRP78表達(dá),6h達(dá)到高峰。 結(jié)論：我們的研究證實(shí)PGE1顯著減少ER stress誘導(dǎo)的L02細(xì)胞凋亡。PGE1減少TG誘導(dǎo)的L02細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能與其早期上調(diào)GRP78蛋白的表達(dá),后期下調(diào)GRP78蛋白的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：L02細(xì)胞 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 GRP78 sXBP1 凋亡
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 英文縮略詞表3-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-24
• 結(jié)果24-44
• 討論44-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 病例報告：肝硬化并發(fā)乳糜胸水一例報告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)56-61
• 1. 病例報告56-57
• 2. 文獻(xiàn)復(fù)習(xí)57-58
• 3. 討論58-59
• 參考文獻(xiàn)59-61
• 綜述：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)自噬的分子機(jī)制及意義61-73
• 參考文獻(xiàn)67-73
• 課題選題來源73-74
• 致謝74-75
• 自我介紹75

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：868244