本文關鍵詞：甲型副傷寒桿菌抗噬菌體及生物膜形成基因的篩選及鑒定

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【摘要】：細菌生物膜(bacterial biofilm,BF)與大部分的細菌感染相關,有助于病原菌抵抗外部不利的環(huán)境,包括抗生素和抗噬菌體等.為了研究生物膜和抗噬菌體的作用機制,本文以6株抗噬菌體甲型副傷寒桿菌(副甲菌)突變菌作為研究對象,在Rif+(利福平)(200 mg/L)平板中劃線并滴加噬菌體驗證能否抗噬菌體,將6株突變菌接種于96孔板中,每組3個重復,觀察其成膜能力以及生物膜的形態(tài),定點突變和互補實驗驗證突變菌的噬菌體抗性是否由突變基因所引起.結果顯示:劃線平板中野生型副甲菌在滴加1.2×106個噬菌體處出現(xiàn)空缺,而6株突變菌在滴加2.4×109個噬菌體后仍能生長,表明6株突變菌具有抗噬菌體特性;6株突變菌中,σ-54依賴的翻譯調節(jié)器突變菌成膜能力(A595=1.1±0.2)較野生型副甲菌(A595=0.5±0.1)顯著性增強,且差異顯著(P0.05),光學顯微鏡下菌體聚集成粗大的不規(guī)則團塊;同源重組敲除野生型副甲菌σ-54依賴的翻譯調節(jié)器,突變菌出現(xiàn)噬菌體抗性,將表達σ-54依賴的翻譯調節(jié)器的載體轉化該突變菌,突變菌又恢復了噬菌體敏感性.結果表明,σ-54依賴的翻譯調節(jié)器是抗噬菌體和生物膜形成相關的基因.
【作者單位】： 昆明理工大學醫(yī)學院;昆明學院醫(yī)學院;成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院核醫(yī)學科;
【關鍵詞】： 甲型副傷寒沙門菌 轉座 抗噬菌體 生物膜
【基金】：云南省教育廳科學研究基金資助項目(2010Y398) 云南省應用基礎研究面上項目(2010ZC055,2012FB135) 國家自然科學基金資助項目(31160193)~~
【分類號】：R378
【正文快照】： 甲型副傷寒桿菌(副甲菌,Salmonella paratyphiA)是人獸共患病甲型副傷寒的病原菌,能夠入侵并生存在宿主腸道細胞,導致急性腸道炎癥、腹瀉等[1].據(jù)報道,全球傷寒腸熱病臨床病例估計有2700萬,死亡病例約為20萬,其中大部分是由副甲菌引起的[2],在中國特別是廣西、浙江、江蘇、貴

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本文編號：861050