本文關鍵詞：呼吸道合胞病毒的分離鑒定及其致病力的初步評價

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【摘要】：目的分離鑒定臨床呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),評價其致病力,為疫苗評價及致病機制的研究提供實驗材料。方法收集臨床呼吸道感染重癥患兒的鼻咽分泌物樣本進行RT-PCR初步鑒定,通過病毒培養(yǎng),空斑純化,電鏡觀察及病毒滴度測定,篩選出1株呼吸道合胞病毒候選株,經(jīng)全基因組測序后命名為BJ016。選用14日齡C57乳鼠,每組26只,采用BJ016為實驗組,PBS為對照組,分別對小鼠滴鼻感染,30μl/只。連續(xù)14日監(jiān)測2組小鼠體質(zhì)量變化及死亡率,肺組織的病毒載量、濕干比,HE染色觀察肺病理變化并計數(shù)炎性細胞總量,同時采用CBA測定血清中細胞因子的變化。結果 100份臨床呼吸道感染重癥患兒鼻咽分泌物樣本中,RT-PCR鑒定為RSV A亞型陽性共21例,經(jīng)病毒分離培養(yǎng)、空斑純化、電鏡觀察及RT-PCR鑒定后得到16株RSV臨床分離株,通過TCID50測定病毒滴度篩選出1株滴度為106.5TCID50/ml的候選株,基因組序列分析顯示其為NA1基因型,命名為BJ016。BJ016感染14日齡C57乳鼠后造成肺損傷,在第5日達到發(fā)病高峰時測定病載、濕干比、病理檢測并計數(shù)炎性細胞,實驗組較對照組具有明顯統(tǒng)計學差異,血清中MCP-1、IL-6、G-CSF及MIP-1α均顯著性升高。結論成功分離出1株能致死14日齡C57乳鼠的RSV病毒株并初步評價了其致病力,為疫苗評價及RSV致病機制的研究提供了良好的實驗材料。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病原生物學教研室;軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所病原微生物生物安全國家重點實驗室;北京兒童醫(yī)院病毒研究室;解放軍第302醫(yī)院肝膽外科;
【關鍵詞】： RSV 病毒分離 C乳鼠 致病力
【基金】：國家“863”項目(SS2012AA020905)
【分類號】：R392
【正文快照】： RSV是嚴重危害嬰幼兒健康的最常見呼吸道感染病原體。我國RSV發(fā)病的高峰季節(jié)主要是冬春季,首次感染多發(fā)生在1歲以內(nèi)的嬰幼兒,尤其是2~6個月的嬰幼兒,感染后常引起嬰幼兒細支氣管炎和支氣管肺炎等下呼吸道疾病,多表現(xiàn)為咳嗽、憋喘、高熱,甚至呼吸困難、心力衰竭、死亡,給人類健

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本文編號：860343