本文關鍵詞：應用TALEN技術敲除gata4基因建立斑馬魚先天性心臟病模型

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【摘要】：目的人工構建TALEN靶向敲除載體敲除gata4基因,建立斑馬魚先天性心臟病動物模型。方法采用單元組裝法構建靶向敲除gata4基因的載體,將其體外轉錄成TALEN mRNAs,通過顯微注射的方式注入單細胞期受精卵中,胚胎檢測TALEN的敲除效率,再通過剪尾、酶切、測序篩選發(fā)生基因突變的斑馬魚及突變的類型。結果酶切、測序結果證實成功構建出正確的gata4靶向敲除載體,注入斑馬魚受精卵中,發(fā)生基因敲除的效率為35.18%,通過剪尾、PCR、酶切檢測成功地篩選出了發(fā)生基因突變的斑馬魚,測序結果顯示出不同種類的gata4基因突變。結論成功構建gata4基因敲除的斑馬魚動物模型,為進一步研究人類gata4基因突變引起先天性心臟病的發(fā)病機制提供了良好的動物模型。
【作者單位】： 北京協(xié)和醫(yī)學院研究生院;國家衛(wèi)生計生委科學技術研究所;
【關鍵詞】： TALEN gata基因 斑馬魚 模型 動物 先天性心臟病
【基金】：中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務專項資金項目-優(yōu)秀青年科技人才創(chuàng)業(yè)基金項目(編號:2012GJSSJKC02) 國家十二五科技支撐計劃計劃生育技術安全性評價標準化實驗動物培育關鍵性共享技術研究項目(編號:2012BA131B06)
【分類號】：R541.1;R-332
【正文快照】： 。先天性心臟病(congenital heart disease,CHD)是由于胚胎發(fā)育過程中心臟、血管發(fā)育異常而導致心臟、血管在形態(tài)、結構、功能和代謝方面發(fā)生異常的一大類疾病,是人類極為普遍和具有破壞性的出生缺陷,發(fā)病率約占活產(chǎn)嬰兒的0.8%[1],嚴重危害胎兒、新生兒、嬰幼兒及兒童健康。目

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本文編號：857977